發(fā)布時間：2018-05-16 04:17

  本文選題：slug基因 + RNA干擾��； 參考：《青島大學醫(yī)學院學報》2017年01期

【摘要】：目的探討siRNA干擾slug基因表達對體外腸隱窩上皮細胞IEC-6接受X線照射的敏感性影響及其機制。方法以體外培養(yǎng)大鼠小腸隱窩上皮細胞IEC-6為研究對象,將轉(zhuǎn)染siRNA-slug(實驗組)、轉(zhuǎn)染siRNA(陰性對照組)和未轉(zhuǎn)染siRNA(空白對照組)的細胞進行X射線照射處理,24h后,用Western blot法檢測各組細胞的Slug和細胞P53正向凋亡上調(diào)因子(PUMA)蛋白的表達,CCK8法檢測細胞在不同劑量X射線照射下的生長抑制情況,流式細胞儀檢測細胞凋亡情況。結(jié)果實驗組Slug蛋白表達與陰性對照組和空白對照組比較明顯降低,PUMA蛋白表達明顯高于陰性對照組和空白對照組,差異有顯著性(F=1 760、421,P0.01)。與陰性對照組和空白對照組比較,實驗組細胞的凋亡率增加,差異有統(tǒng)計學意義(F=33.02,P0.01)。在0~6Gy劑量范圍內(nèi),隨著X線照射劑量的增加,各組細胞的增殖活性均降低(F=6.595~31.470,P0.05);在6Gy劑量X線照射下,實驗組細胞生長抑制率、早期+晚期凋亡率較陰性對照組和空白對照組明顯增高,差異有統(tǒng)計學意義(F=47.700、33.020,P0.01)。結(jié)論 siRNA干擾slug基因的表達能夠使促凋亡的PUMA蛋白表達增加,從而增強IEC-6細胞對X射線的敏感性。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of siRNA interfering slug gene expression on the sensitivity and mechanism of X ray irradiation to IEC-6 of intestinal crypt epithelial cells in vitro. Methods IEC-6 of rat intestinal crypt epithelial cells was cultured in vitro. The cells transfected with siRNA-slug (experimental group, negative control group) and untransfected siRNAs (blank control group) were treated with X ray irradiation for 24 hours. Western blot assay was used to detect the expression of Slug and p53 positive apoptosis up-regulation factor (Puma) protein. CCK8 method was used to detect the growth inhibition of cells exposed to different doses of X-rays, and flow cytometry was used to detect the apoptosis of cells. Results compared with the negative control group and the blank control group, the expression of Slug protein in the experimental group was significantly lower than that in the negative control group and the blank control group, and the difference was significant (P 0.01). Compared with the negative control group and the blank control group, the apoptosis rate of the experimental group increased, and the difference was statistically significant. In the range of 0~6Gy dose, the proliferative activity of each group decreased with the increase of X-ray irradiation dose. The rate of late apoptosis in early stage was significantly higher than that in negative control group and blank control group, and the difference was statistically significant (P 0.01). Conclusion siRNA interference with the expression of slug gene can increase the expression of apoptotic PUMA protein and enhance the sensitivity of IEC-6 cells to X-ray.
【作者單位】： 青島大學附屬醫(yī)院麻醉科;青島大學附屬醫(yī)院外科;青島大學附屬醫(yī)院小兒外科;
【基金】：山東省自然科學基金資助項目(2014ZRB01198)
【分類號】：R730.55

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