本文選題：Caspase3　切入點(diǎn)：放射性標(biāo)記　出處：《中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文

【摘要】：目的:本研究設(shè)計(jì)了新型凋亡探針,合成了前體和標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行了 18F標(biāo)記和11C標(biāo)記的探索,并通過A549細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞阻斷實(shí)驗(yàn)、肝凋亡模型大鼠與對(duì)照組生物分布實(shí)驗(yàn)和荷A549瘤裸鼠PET顯像等一系列實(shí)驗(yàn),深入研究了 Caspase 3特異的異喹啉類的探針11C-HIQPM的生物學(xué)特性,初步證明了異喹啉類探針能夠特異結(jié)合凋亡細(xì)胞,具有在體探測(cè)凋亡細(xì)胞的潛力。方法:在不同的堿性環(huán)境和加熱溫度下,分析前體HIQPH和標(biāo)準(zhǔn)品(HIQPF、HIQPM、HIQPS)的穩(wěn)定性;分別利用氟多功能模塊和碳多功能模塊進(jìn)行18F和11C標(biāo)記,利用HPLC與標(biāo)準(zhǔn)品共進(jìn)樣鑒定產(chǎn)物,進(jìn)一步對(duì)確定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物進(jìn)行質(zhì)量控制;在體外,以順鉑誘導(dǎo)A549肺腺癌細(xì)胞凋亡,通過細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)測(cè)量11C-HIQPM與細(xì)胞結(jié)合不同時(shí)間的攝取規(guī)律以及細(xì)胞放射性攝取率與細(xì)胞凋亡率之間的關(guān)系,通過阻斷實(shí)驗(yàn)研究11C-HIQPM與Caspase 3結(jié)合的特異性,并檢測(cè)了12C-HIQPM對(duì)Caspase 3的半濃度抑制常數(shù);以D-半乳糖胺/脂多糖聯(lián)合應(yīng)用誘導(dǎo)大鼠肝細(xì)胞凋亡,研究了11C-HIQPM在正常大鼠和肝凋亡大鼠體內(nèi)的分布規(guī)律和區(qū)別;取荷A549瘤裸鼠,在順鉑化療作用前后分別進(jìn)行11C-HIQPMPET/CT顯像,對(duì)比腫瘤部位和肌肉組織放射性攝取值的變化。結(jié)果:前體和標(biāo)準(zhǔn)品在高溫和強(qiáng)堿下穩(wěn)定性差,在各種反應(yīng)條件下18F標(biāo)記均無法得到目標(biāo)產(chǎn)物18F-HIQPF; 11C標(biāo)記得到2位N甲基化的產(chǎn)物11C-HIQPM,放射化學(xué)純度大于98%,比活度為41.81±9.89 GBq/μmol (n = 5),體外穩(wěn)定性高;凋亡的A549細(xì)胞攝取11C-HIQPM最高的時(shí)間是20min,之后反而被細(xì)胞排出;A549細(xì)胞對(duì)11C-HIQPM的攝取率與細(xì)胞凋亡率相關(guān)(y= 0.0192 x +0.1310,R2 =0.9257) : Caspase3特異阻斷劑Ac-DEVD-CHO抑制凋亡細(xì)胞攝取11C-HIQPM的IC50 為 113.4 nM,表明11C-HIQPM 能與 Caspase 3 特異結(jié)合,12C-HIQPM 對(duì) Caspase 3的IC50為36nM; 11C-HIQPM在大鼠體內(nèi)主要經(jīng)腎臟代謝,其余器官存在少量非特異性攝取,模型組大鼠肝臟攝取值為正常大鼠肝臟攝取值的1.7倍:根據(jù)PET/CT顯像結(jié)果,荷A549瘤裸鼠化療前,腫瘤/肌肉攝取值比(T/M)為1.9,化療后,腫瘤/肌肉攝取值比為5.8,化療后腫瘤攝取值是化療前腫瘤攝取值的3.6倍,凋亡的腫瘤組織在PET圖像中呈現(xiàn)“高亮”區(qū)域,與周圍組織對(duì)比度高。結(jié)論:通過11C標(biāo)記得到新型異喹啉類凋亡顯像劑11C-HIQPM,體外細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)生物分布實(shí)驗(yàn)均表明11C-HIQPM能夠特異結(jié)合活化的Caspase 3,并有潛力應(yīng)用于在體凋亡細(xì)胞檢測(cè)。本研究初步驗(yàn)證異喹啉類顯像劑能夠適用于PET凋亡顯像。
[Abstract]:AIM : To study the biological characteristics of the probe 11C - HIQPM in normal rats and normal rats . The effects of 11C - HIQPM and Caspase - 3 were studied by means of cell - uptake experiments . The IC50 of 11C - HIQPM on the uptake of 11C - HIQPM was 1 . 7 times higher than that of normal rats . The results showed that 11C - HIQPM could specifically bind to Caspase 3 , and the tumor / muscle uptake value was 3.6 times that of normal rats .

【學(xué)位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R817

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本文編號(hào)：1730231