本文選題：丹參酮　切入點：力竭運動　出處：《福建中醫(yī)藥大學》2013年碩士論文

【摘要】：研究目的：本課題旨在研究丹參酮對力竭運動大鼠血清CK、LDH活性、腓腸肌組織形態(tài)學及細胞凋亡相關(guān)因子Caspase-3、8、9的影響,探討丹參酮改善力竭運動大鼠腓腸肌細胞凋亡的可能機制。研究方法：選用體重200ga：20g的雄性SD大鼠,按隨機數(shù)字表分為安靜對照組(A組)和運動組(B組),運動組大鼠又分為力竭運動組(B0組),運動+低劑量丹參酮組(B1組),運動+中劑量丹參酮組(B2組),運動+高劑量丹參酮組(B3組),運動+維生素E組(B4組)(所有分組n=8只)。安靜對照組不做任何運動,常規(guī)飼養(yǎng),自由飲食；運動組大鼠進行力竭運動。B1、B2、B3、B4組予在力竭運動后腹腔注射藥物。B1低劑量組3mg/kg/d,B2中劑量組6mg/kg/d, B3高劑量組12mg/kg/d, B4維生素E組25mg/kg/d、經(jīng)過5周力竭運動實驗后,各組分別取血清、腓腸肌組織保存,用光鏡及透射電鏡觀察腓腸肌形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,檢測血清指標CK. LDH的變化,應(yīng)用免疫組織化學法檢測Caspase-3、8、9蛋白的表達及TUNEL法檢測腓腸肌細胞凋亡及細胞凋亡指數(shù),應(yīng)用Real-time PCR檢測Caspase-3 mRNA的表達情況。研究結(jié)果：1.血清CK、LDH檢測結(jié)果比較1.1正常對照組血清CK、LDH分別為996.57±64.23、618.17±72.96；與正常對照組比較,力竭運動模型組血清CK、LDH活性明顯升高,分別為1961.60±305.74(P0.05)、1398.20±95.62(P0.01)。1.2低、中、高劑量丹參酮組分別與力竭運動模型組比較,血清CK活性均明顯降低,分別為1334.20±139.56、1188.80±91.93、1337.20±130.91(P0.05)；血清LDH活性均明顯降低,分別為1113.30±159.58(P0.05)、802.00±120.34(P0.01)、1094.80±147.17(P0.05)。1.3維生素E組與力竭運動模型組比較,血清CK、LDH活性均明顯降低,分別為1226.20±159.73(P0.05)、1079.40±85.83(P0.01)。2.形態(tài)學觀察(1)HE染色結(jié)果：模型組大鼠腓腸肌組織有以下病理改變：腓腸肌纖維腫脹,結(jié)構(gòu)紊亂,排列不齊；肌橫紋不清晰,局部肌膜不完整；肌核分布不均,出現(xiàn)核聚集或部分肌細胞核消失；肌間隙嚴重消失。而丹參酮組能明顯改善力竭運動損傷,肌纖維排列明顯較整齊,條理較清晰,只有少部分肌纖維腫脹；肌細胞核較均勻分布在肌膜下,無增生和腫脹或固縮,較清晰；肌纖維間隙尚正常。(2)電鏡觀察結(jié)果：正常組腓腸肌纖維排列規(guī)則整齊,清晰可辨,可見線粒體分布于相鄰的肌原纖維之間,包膜尚清楚,而模型組大鼠腓腸肌組織出現(xiàn)肌絲排列不整齊,模糊,肌節(jié)紊亂,Z線異常,出現(xiàn)模糊、流變、扭曲,線粒體空泡樣變,腫脹,溶解。不同劑量丹參酮組腓腸肌肌纖維較模型組損傷程度要輕,以中劑量組改善最為明顯。3.免疫組化檢測結(jié)果模型組中Caspase-3、8、9細胞陽性著色程度明顯較正常組深,免疫組化評分明顯高于正常組(P0.01)；與模型組相比較,丹參酮組Caspase-3、8、9細胞陽性著色程度明顯較淺,免疫組化評分明顯低于模型組(P0.01)；與模型組相比較,維生素E組Caspase-3、8、9細胞陽性著色程度明顯較淺,免疫組化評分明顯低于模型組(P0.01或P0.05)。4.TUNEL檢測結(jié)果：模型組凋亡細胞數(shù)量明顯增多,高于正常對照組(P0.01)；丹參酮組凋亡細胞數(shù)量明顯低于模型組(P0.01)；維生素E組細胞凋亡數(shù)量較模型組減少(P0.05)。5.Real-time PCR檢測結(jié)果：模型組Caspase-3 mRNA相對表達量明顯高于正常對照組(2-△△Ct2)；低劑量丹參酮組Caspase-3 mRNA相對表達量與模型組相比較未見顯著差異(0.52-△△Ct2)；中劑量丹參酮組Caspase-3 mRNA相對表達量明顯低于模型組(2-△△Ct0.5)；高劑量丹參酮組Caspase-3 mRNA相對表達量明顯低于模型組(2-△△Ct0.5)；維生素E組Caspase-3 mRNA相對表達量明顯低于模型組(2-△△Ct0.5)。研究結(jié)論：1、不同劑量丹參酮可降低力竭運動大鼠血清CK、LDH活性,對力竭運動大鼠的腓腸肌損傷具有一定保護作用,不同劑量之間未呈現(xiàn)量效關(guān)系,以中劑量丹參酮的療效較佳。2、不同劑量丹參酮都能改善腓腸肌組織病理形態(tài),減輕腓腸肌結(jié)構(gòu)的破壞,緩解腓腸肌損傷情況,中劑量丹參酮組改善效果最為明顯。3、丹參酮可以通過下調(diào)Caspase-3、8、9蛋白及Caspase-3 mRNA的表達來實現(xiàn)抗凋亡作用,從而改善腓腸肌組織損傷狀態(tài)。
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本文編號：1690088