發(fā)布時(shí)間：2018-03-19 16:11

  本文選題：AIF　切入點(diǎn)：X線輻射　出處：《第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)》2015年16期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的初步探討X線誘導(dǎo)肺癌SPC-A-1細(xì)胞是否發(fā)生新的細(xì)胞死亡形式Parthanatos。方法以肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞為研究對象,以1、2、4、6、8、10 Gy梯度劑量輻射細(xì)胞,平板克隆法測定X線輻射對人肺癌細(xì)胞SPC-A-1的半數(shù)致死劑量(LD50),WST-1法進(jìn)行驗(yàn)證。LD50輻射細(xì)胞后4、8、12、24 h,RT-PCR法檢測細(xì)胞AIF轉(zhuǎn)錄水平變化,Western blot檢測細(xì)胞AIF蛋白表達(dá)變化,激光共聚焦觀察細(xì)胞AIF向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移情況,Western blot檢測細(xì)胞輻射后不同時(shí)間AIF在線粒體蛋白組分和核蛋白組分中的分布變化。TUNEL法檢測輻射后12 h細(xì)胞核DNA的斷裂。結(jié)果 X線對SPC-A-1細(xì)胞的LD50大致為3 Gy。以3 Gy輻射細(xì)胞后不同時(shí)間AIF在轉(zhuǎn)錄、蛋白水平均無顯著變化(P0.05)。輻射后12 h AIF由線粒體向細(xì)胞核轉(zhuǎn)位,伴隨細(xì)胞核的溶解、碎裂。亞細(xì)胞組分Western blot檢測到12 h后AIF在線粒體蛋白組分中顯著下降,由對照組的1.12±0.15下降至12 h組的0.21±0.07(P0.05),而在核蛋白組分中顯著上升,由對照組的0.05±0.02上升至12 h組的0.45±0.07(P0.05),同時(shí)在固縮的細(xì)胞核中檢測到DNA的斷裂。結(jié)論 AIF核轉(zhuǎn)位參與了X線誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過程。輻射后12 h AIF由線粒體向細(xì)胞核轉(zhuǎn)位顯著增多,導(dǎo)致細(xì)胞核固縮、碎裂、溶解,細(xì)胞發(fā)生了Parthanatos。
[Abstract]:Objective to investigate whether a new cell death form Parthanatosin was found in lung cancer SPC-A-1 cells induced by X-ray. Methods SPC-A-1 cells from lung adenocarcinoma were studied and irradiated with a gradient dose of 810 Gy. The expression of AIF protein in human lung cancer cell line SPC-A-1 was detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) at 24 h after irradiation with LD50. The expression of AIF protein was detected by Western blot. Laser confocal scanning was used to observe the transfer of AIF into the nucleus. The distribution of AIF in mitochondria and nuclear protein at different time after irradiation was detected by Western blot. Tunel method was used to detect the break of nuclear DNA 12 h after irradiation. Results the LD50 of SPC-A-1 cells was about 3Gy. AIF was transcribed at different time after 3 Gy irradiation. There was no significant change in protein level (P 0.05). AIF translocated from mitochondria to nucleus at 12 h after irradiation, followed by nuclear dissolution and fragmentation. The subcellular component Western blot showed a significant decrease in AIF in mitochondrial protein component 12 h after irradiation. It decreased from 1.12 鹵0.15 in control group to 0.21 鹵0.07 P0.05 in 12h group, but increased significantly in nuclear protein component. From 0. 05 鹵0. 02 in the control group to 0. 45 鹵0. 07 P0. 05 in the 12 h group, DNA fragmentation was detected in the pyknotic nucleus. Conclusion the nuclear translocation of AIF is involved in the apoptosis induced by X ray. The translocation of AIF from mitochondria to the nucleus increases significantly at 12 h after irradiation. It causes the nucleus to shrink, break, and dissolve, and the cells develop Parthanatos.
【作者單位】： 廣東省人民醫(yī)院(廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院)腫瘤中心放療科;廣東醫(yī)學(xué)院附屬彭湃紀(jì)念醫(yī)院腫瘤科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金(81302033)~~
【分類號】：R734.2;R730.44

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1635010