本文關(guān)鍵詞：模擬微重力環(huán)境對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞MMP8表達(dá)的影響　出處：《空軍醫(yī)學(xué)雜志》2016年06期 　論文類(lèi)型：期刊論文

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【摘要】：目的觀察模擬微重力環(huán)境下人牙周膜成纖維細(xì)胞(human periodontal ligament fibroblasts,h PDLFs)中MMP8表達(dá)的變化。方法 (1)采用改良酶組織塊法培養(yǎng)h PDLFs并對(duì)其來(lái)源進(jìn)行免疫組織化學(xué)鑒定;(2)建立模擬微重力下h PDLFs培養(yǎng)模型;(3)建立藥物誘導(dǎo)h PDLFs成骨向分化的模型,將實(shí)驗(yàn)分為骨向誘導(dǎo)組以及非骨向誘導(dǎo)組,并分別觀察骨向誘導(dǎo)組以及非骨向誘導(dǎo)組中培養(yǎng)第1、2、3天,h PDLFs中ALP和OC表達(dá)的變化;(4)應(yīng)用RT-PCR和Western-blot檢測(cè)h PDLFs中MMP8在模擬微重力下表達(dá)量的變化。結(jié)果 (1)成功分離獲得了h PDLFs,免疫組織化學(xué)染色結(jié)果為Keratin染色陰性,Vimentin染色陽(yáng)性,細(xì)胞胞漿棕黃色著色,著色分布較為均勻;(2)成功地建立了模擬微重力下h PDLFs培養(yǎng)模型,通過(guò)生長(zhǎng)曲線的繪制,選擇3 d為實(shí)驗(yàn)觀察最佳時(shí)間,h PDLFs在回轉(zhuǎn)器中生長(zhǎng)狀態(tài)良好;(3)非誘導(dǎo)組第3天,ALP的分泌較正常重力對(duì)照組下降約20%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。在骨向誘導(dǎo)組第3天,模擬微重力組ALP的分泌較正常重力對(duì)照組下降約16%,骨向誘導(dǎo)組中,正常重力對(duì)照組和模擬微重力組均可觀察到ALP的分泌增加,具有時(shí)間依賴(lài)性,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),說(shuō)明骨模擬微重力效應(yīng)可降低h PDLFs中ALP和OC的分泌,但骨誘導(dǎo)劑可以減弱其降低的趨勢(shì);(4)在模擬微重力組中,h PDLFs中MMP8的m RNA和蛋白的表達(dá)均較正常重力組增加,并且MMP8的表達(dá)在骨向誘導(dǎo)組中高于非誘導(dǎo)組,第3天差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論模擬微重力環(huán)境中降低h PDLFs骨向分化的能力,并且MMP8表達(dá)較正常重力組增加,表明MMP8參與調(diào)節(jié)模擬微重力環(huán)境對(duì)h PDLFs的成骨向分化。
[Abstract]:Objective to observe the human periodontal ligament fibroblasts of human periodontal ligament fibroblasts in simulated microgravity environment. Methods: h PDLFs was cultured by modified enzyme tissue block method and its origin was identified by immunohistochemistry. (2) establish h PDLFs culture model under simulated microgravity; The model of PDLFs osteogenic differentiation induced by drugs was established. The experiment was divided into osteoinduction group and non-osteotropic induction group, and the 1st stage of osteoinduction group and non-osteotropic induction group were observed respectively. The changes of ALP and OC expression in PDLFs at day 3; (4) RT-PCR and Western-blot were used to detect the expression of MMP8 in h PDLFs under simulated microgravity. H PDLFs was obtained successfully. The results of immunohistochemical staining showed that Keratin staining was negative and vimentin staining was positive, and the cytoplasm of the cells was brownish stained, and the staining distribution was more uniform. (2) the model of h PDLFs culture under simulated microgravity was successfully established. Through drawing the growth curve, 3 days was selected as the best time to observe the experiment. H PDLFs grew well in the gyroscope. The secretion of ALP in the non-induced group was about 20% lower than that in the normal gravity control group on the 3rd day, and the difference was statistically significant (P 0.05). The secretion of ALP in simulated microgravity group was about 16% lower than that in normal gravity control group. In the bone orientation induction group, normal gravity control group and simulated microgravity group could observe the increase of ALP secretion in a time-dependent manner. There was significant difference (P 0.05), which indicated that bone mimic microgravity could decrease the secretion of ALP and OC in h PDLFs, but bone inducer could weaken the decreasing trend. (4) in the simulated microgravity group, the expression of m RNA and protein of MMP8 in PDLFs was higher than that in the normal gravity group, and the expression of MMP8 in the group of bone orientation induction was higher than that in the non-induced group. On the 3rd day, the difference was statistically significant (P 0.05). Conclusion in the simulated microgravity environment, the ability of reducing the bone differentiation of h PDLFs is reduced, and the expression of MMP8 is higher than that of the normal gravity group. The results indicated that MMP8 was involved in regulating the osteogenic differentiation of h PDLFs in simulated microgravity environment.
【作者單位】： 解放軍第306醫(yī)院全軍口腔疾病診治中心;
【基金】：航天醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與應(yīng)用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題(SMFA14K03) 國(guó)家自然科學(xué)基金課題(81341106)
【分類(lèi)號(hào)】：R852.22
【正文快照】： 模擬微重力環(huán)境對(duì)人牙周膜成纖維細(xì)胞MMP8表達(dá)的影響@王睿$解放軍第306醫(yī)院全軍口腔疾病診治中心!100101北京 @牛忠英$解放軍第306醫(yī)院全軍口腔疾病診治中心!100101北京 @黨平$解放軍第306醫(yī)院全軍口腔疾病診治中心!100101北京 @郭楊$解放軍第306醫(yī)院全軍口腔疾病診治中心!

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