發(fā)布時間：2017-11-17 10:28

  本文關(guān)鍵詞：模擬失重30天后再超重對猴腮腺組織HSP70、sAA、PSP表達的影響

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【摘要】：目的:隨著我國中長期載人航天工程的迅速發(fā)展,航天醫(yī)學(xué)的重要性日益凸顯,口腔航天醫(yī)學(xué)也受到廣泛關(guān)注。研究顯示,失重后再超重與單純承受超重作用相比,對機體的損傷更加明顯。唾液是具有潤滑、消化、清潔等重要作用的體液,其分泌受到緊張、寒冷、運動等心理、生理性應(yīng)激條件的影響。腮腺是口腔中最大的一對唾液腺,其分泌的唾液中含有多種蛋白,分別發(fā)揮免疫、消化等重要的功能。本研究旨在通過觀察模擬失重30天再超重環(huán)境下腮腺組織中熱休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、唾液淀粉酶(salivary alpha-amylase,s AA)以及腮腺分泌蛋白(parotid secretory protein,PSP)表達變化,探討模擬失重、超重環(huán)境對猴腮腺組織分泌功能的影響。材料與方法:本實驗采用頭低位臥床建立失重模型,用58型動物離心機建立超重過載模型,以23只雄性獼猴作為研究對象,隨機分為對照組[A組]、實驗組[失重(B組)、超重+13 Gx/230 s(C組)、失重后再超重(D組,依據(jù)不同的+Gx強度和時間分為4個亞組:分別是+11 Gx/270 s D1組、+13 Gx/230 s D2組、+15 Gx/200 s D3組、+13 Gx/230 s后恢復(fù)9天D4組)]。除D4組在恢復(fù)9天后取材,其余各組均在實驗結(jié)束的次日進行取材。通過蘇木精—伊紅染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)觀察腮腺組織形態(tài)學(xué)變化;利用免疫組織化學(xué)(Imunohistochemistry,IHC)染色以及Western Blot檢測HSP70在蛋白水平的表達變化;通過定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)、Western Blot技術(shù)檢測腮腺組織中的主要分泌蛋白——s AA和PSP在信使核糖核酸(messeger Ribonucleic acid,m RNA)水平及蛋白水平的表達情況。為進一步確定s AA和PSP的表達變化機制,實驗采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)測定腮腺組織細胞中s AA和PSP的上游重要調(diào)控因子之一環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)的含量。結(jié)果:1.形態(tài)學(xué)觀察:對照組獼猴腮腺組織結(jié)構(gòu)正常;失重30 d組可見腮腺導(dǎo)管擴張、淋巴細胞浸潤、血管擴張充血;超重組腮腺導(dǎo)管輕度擴張;失重30 d后超重各組腮腺實質(zhì)中淋巴細胞浸潤灶增多,淋巴細胞浸潤區(qū)域腺泡細胞出現(xiàn)萎縮,并可見血管擴張充血加重;失重后+15 Gx/200 s組還可見腺泡細胞粘液樣變。2.應(yīng)激蛋白的檢測:免疫組化顯示,對照組腮腺組織中HSP70弱表達;各實驗組腮腺組織中HSP70強陽性表達;Western Blot結(jié)果顯示,實驗組(除D4組外)腮腺組織中,HSP70的表達顯著高于對照組(P0.05),隨著超重過載強度加大HSP70的表達量具有隨之增強的趨勢。3.功能蛋白的檢測:q RT-PCR結(jié)果顯示,與對照組相比,各實驗組腮腺組織中,s AA、PSP和c AMP表達減少,其中D2、D3組s AA和PSP減少顯著(P0.01);與C組相比,D2組腮腺組織中s AA表達降低,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);與D2組相比,D4組s AA和PSP表達顯著增多。Western Blot結(jié)果顯示,s AA、PSP和c AMP在蛋白水平的變化與m RNA水平具有一致性。結(jié)論:1.模擬失重30天、超重、失重30天再超重環(huán)境,均可造成獼猴腮腺組織結(jié)構(gòu)的輕度損傷。2.模擬失重30天、超重、失重30天再超重環(huán)境下獼猴腮腺組織中HSP70表達增強;s AA、PSP和c AMP表達減少;提示腮腺組織具有較強的應(yīng)激反應(yīng)能力,以上特殊環(huán)境可影響腮腺組織的分泌功能。3.模擬失重30 d再超重導(dǎo)致腮腺組織病理損傷、HSP70表達增強、s AA和PSP表達減弱,均比單純超重組更為凸顯,表明模擬失重30天可加劇獼猴腮腺組織的超重反應(yīng)。4.模擬失重30天再超重環(huán)境下腮腺組織形態(tài)學(xué)、應(yīng)激蛋白、功能蛋白的表達,經(jīng)過9 d的恢復(fù)以上指標(biāo)均趨于正常,表明模擬失重30天再超重環(huán)境對腮腺組織的損傷和影響是可逆的。
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R852.22

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1 郭楊;模擬失重30天后再超重對猴腮腺組織HSP70、sAA、PSP表達的影響[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

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本文編號：1195723