本文關(guān)鍵詞：六色熒光標(biāo)記快速PCR擴(kuò)增體系的建立及驗(yàn)證

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【摘要】：目的建立PCR快速擴(kuò)增程序和體系,并對其技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證。方法采用六色熒光標(biāo)記技術(shù),對24個(gè)常染色體STR基因座、1個(gè)Y-STR基因座和Amelogenin、Y-In Del基因座進(jìn)行復(fù)合擴(kuò)增及毛細(xì)管電泳檢測,同時(shí)考察體系的靈敏度、特異性、同一性、穩(wěn)定性、混合樣本及批量樣本測試,并觀察各種常見檢材及降解、脫落細(xì)胞檢材的分型情況。結(jié)果所建立的體系靈敏度達(dá)0.062 5 ng,快速擴(kuò)增僅耗時(shí)65 min就可獲得準(zhǔn)確分型;種屬特異性高;各種紙質(zhì)血樣本和混合、降解、脫落細(xì)胞檢材的分型正確。結(jié)論本研究建立的快速擴(kuò)增體系可顯著提升檢驗(yàn)速率,分型準(zhǔn)確、穩(wěn)定,對建立STR數(shù)據(jù)庫、研究群體遺傳學(xué)和進(jìn)行法醫(yī)學(xué)鑒定有重要意義。
【作者單位】： 許昌市公安局刑事科學(xué)技術(shù)研究所;襄城縣公安局刑偵大隊(duì);寧波海爾施基因科技有限公司;中國政法大學(xué)證據(jù)科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【分類號】：D919
【正文快照】： 100088)STR分型是目前法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中DNA分型技術(shù)的核心,而PCR擴(kuò)增反應(yīng)是DNA檢驗(yàn)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),常規(guī)PCR擴(kuò)增過程需要約3 h,如果能進(jìn)一步縮短,將有利于提高鑒定效率。快速PCR擴(kuò)增在保證各項(xiàng)性能指標(biāo)的前提下,能實(shí)現(xiàn)較短時(shí)間內(nèi)高效擴(kuò)增目的片段[1],現(xiàn)有商品化的Global FilerTMExpre

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 吳微微;郝宏蕾;金胄;鄭小婷;;PCR擴(kuò)增3因素對低拷貝模板STR分型的影響研究[J];中國法醫(yī)學(xué)雜志;2006年S1期

2 趙興春;姜伯瑋;葉健;;FTA卡直接擴(kuò)增緩沖增強(qiáng)劑的研制[J];刑事技術(shù);2012年03期

3 張璐;王保捷;丁梅;林子清;龐灝;邢佳鑫;宣金鋒;;循環(huán)次數(shù)與體系對DNA檢測靈敏度的影響[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2013年02期

4 ;[J];;年期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 謝新耀;直接PCR擴(kuò)增體系的建立與應(yīng)用性研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

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本文編號：1179856