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六色熒光標記快速PCR擴增體系的建立及驗證

發(fā)布時間:2017-11-13 08:17

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【摘要】:目的建立PCR快速擴增程序和體系,并對其技術(shù)指標進行驗證。方法采用六色熒光標記技術(shù),對24個常染色體STR基因座、1個Y-STR基因座和Amelogenin、Y-In Del基因座進行復合擴增及毛細管電泳檢測,同時考察體系的靈敏度、特異性、同一性、穩(wěn)定性、混合樣本及批量樣本測試,并觀察各種常見檢材及降解、脫落細胞檢材的分型情況。結(jié)果所建立的體系靈敏度達0.062 5 ng,快速擴增僅耗時65 min就可獲得準確分型;種屬特異性高;各種紙質(zhì)血樣本和混合、降解、脫落細胞檢材的分型正確。結(jié)論本研究建立的快速擴增體系可顯著提升檢驗速率,分型準確、穩(wěn)定,對建立STR數(shù)據(jù)庫、研究群體遺傳學和進行法醫(yī)學鑒定有重要意義。
【作者單位】: 許昌市公安局刑事科學技術(shù)研究所;襄城縣公安局刑偵大隊;寧波海爾施基因科技有限公司;中國政法大學證據(jù)科學教育部重點實驗室;
【分類號】:D919
【正文快照】: 100088)STR分型是目前法醫(yī)學檢驗中DNA分型技術(shù)的核心,而PCR擴增反應是DNA檢驗中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),常規(guī)PCR擴增過程需要約3 h,如果能進一步縮短,將有利于提高鑒定效率?焖貾CR擴增在保證各項性能指標的前提下,能實現(xiàn)較短時間內(nèi)高效擴增目的片段[1],現(xiàn)有商品化的Global FilerTMExpre

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 吳微微;郝宏蕾;金胄;鄭小婷;;PCR擴增3因素對低拷貝模板STR分型的影響研究[J];中國法醫(yī)學雜志;2006年S1期

2 趙興春;姜伯瑋;葉健;;FTA卡直接擴增緩沖增強劑的研制[J];刑事技術(shù);2012年03期

3 張璐;王保捷;丁梅;林子清;龐灝;邢佳鑫;宣金鋒;;循環(huán)次數(shù)與體系對DNA檢測靈敏度的影響[J];法醫(yī)學雜志;2013年02期

4 ;[J];;年期

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 謝新耀;直接PCR擴增體系的建立與應用性研究[D];第三軍醫(yī)大學;2004年

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本文編號:1179856

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