發(fā)布時間：2017-10-21 09:40

  本文關(guān)鍵詞：SPR生物傳感器檢測類胰蛋白酶在過敏性休克死亡豚鼠體內(nèi)含量變化

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【摘要】：研究背景 過敏性休克是外界某些抗原性物質(zhì)進(jìn)入已致敏的機(jī)體后，通過免疫機(jī)制在短時間內(nèi)發(fā)生的一種強(qiáng)烈的多臟器累及癥群，嚴(yán)重者迅速進(jìn)入休克狀態(tài)，如不及時搶救，，�？稍�5—10min內(nèi)死亡。由于其常規(guī)尸體檢驗無特異性病理改變，一直給法醫(yī)學(xué)鑒定造成很大困擾。機(jī)體初次接觸變應(yīng)原時產(chǎn)生特異性IgE，IgE吸附于肥大細(xì)胞表面，使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)機(jī)體再次接觸變應(yīng)原時，變應(yīng)原即與肥大細(xì)胞表面IgE結(jié)合，引起肥大細(xì)胞活化并釋放生物活性介質(zhì)，這是引起過敏性休克的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，過敏介質(zhì)包括組胺，激肽原酶，LTs，PAF等，但是這些活性介質(zhì)半衰期只有幾秒到幾分鐘，且在死后極其不穩(wěn)定。類胰蛋白酶是肥大細(xì)胞脫顆粒時釋放的一種特異性蛋白，其半衰期長，大于1h，死后穩(wěn)定。我國正常人血清類胰蛋白酶的含量平均值為2.24ng／mL，其中大多數(shù)人血清檢測不到類胰蛋白酶，有研究表明：不同國家人血清類胰蛋白酶濃度略有差異，一般認(rèn)為正常人血清類胰蛋白酶的濃度不超過5ng／mL，而過敏性休克死者血清類胰蛋白酶含量可以達(dá)到正常人的幾十倍。國內(nèi)外已有學(xué)者應(yīng)用放射免疫法、免疫組化法、ELISA等方法檢測尸體血中類胰蛋白酶的含量來診斷過敏性休克。 目的 應(yīng)用表面等離子共振(SPR)技術(shù)檢測過敏性休克死亡豚鼠血清類胰蛋白酶，試圖為過敏性休克死亡提供客觀診斷依據(jù)。分析兩種不同SPR分析方法對實驗結(jié)果的影響。 方法 本研究選擇健康豚鼠作為動物模型。首先，將16只健康豚鼠隨機(jī)均分為實驗組和對照組，每組再分為死亡即時組和冷凍3d組。以人混合血清誘發(fā)動物過敏性休克致死。分別于實驗組死亡即時組豚鼠死后3h、5h、10h、20h取血，采用分子自組裝方法將抗類胰白酶單克隆抗體(Anti-TPSAB1)固定在SPR生物傳感器芯片表面，檢測豚鼠血清中類胰蛋白酶。采用通入方式和滴定方式兩種不同的方法檢測實驗組死亡即時組豚鼠血清類胰蛋白酶。 結(jié)果 實驗組豚鼠血清類胰蛋白酶的SPR響應(yīng)值比對照組顯著升高，冷凍3d組豚鼠血清類胰蛋白酶的SPR響應(yīng)值與死亡即時組豚鼠血清類胰蛋白酶的SPR響應(yīng)值無明顯差別，說明在冷凍3d的條件下對豚鼠血清類胰蛋白酶的表達(dá)無明顯影響。實驗組死亡即時組豚鼠死后3h、5h、10h、20h血清類胰蛋白酶無明顯變化，說明死亡3h、5h、10h、20h左右不影響豚鼠血清類胰蛋白酶表達(dá)。分別以通入方式和滴定方式檢測實驗組死亡即時組豚鼠血清類胰蛋白酶，實驗結(jié)果無明顯差異，說明兩種方法均可以用來檢測血清類胰蛋白酶。 結(jié)論 基于SPR生物傳感器在動物血清類胰蛋白酶方面具有很好的應(yīng)用前景，可作為診斷過敏性休克死亡的一項依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：類胰蛋白酶 過敏性休克 表面等離子共振生物傳感器 法醫(yī)病理學(xué)
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：D919
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-7
• 中文摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-18
• 1 材料與方法18-22
• 2 對比兩種不同的 SPR 檢測方法對實驗結(jié)果的影響22-24
• 3 結(jié)果24-32
• 4 討論32-36
• 全文總結(jié)36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 文獻(xiàn)綜述41-54
• 參考文獻(xiàn)47-54
• 致謝54-55

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 燕紅玲;何韶衡;;類胰蛋白酶的檢測及臨床意義[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報;2009年08期

本文編號：1072672