本文關(guān)鍵詞：納米銀暴露致雄性小鼠睪丸基因表達(dá)的變化及其對(duì)生殖參數(shù)的影響

  更多相關(guān)文章： 納米銀 雄性生殖系統(tǒng) 基因表達(dá) 凋亡

【摘要】：納米科技是近年來(lái)不斷膨脹發(fā)展的一個(gè)研究領(lǐng)域,同時(shí)也是一個(gè)具有巨大潛力的經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域。納米尺度使得不同的材料具有特殊的物理和化學(xué)性質(zhì),因此各種類型的納米粒子不僅被用來(lái)制造新型消費(fèi)產(chǎn)品,也被應(yīng)用于生命科學(xué)和生物技術(shù)等各個(gè)方面。納米粒子種類繁多,其中納米銀材料是最具商業(yè)化能力的一種.單價(jià)的銀離子復(fù)合物,特別是硝酸銀被大量應(yīng)用在抗菌治療中,而納米銀粒子同樣保留了此抗菌特性,并被應(yīng)用于制造納米纖維墊子,外傷敷料,軟膏等;此外,因納米銀可防止細(xì)菌在物體表面定植,所以其也被用來(lái)制造導(dǎo)管,假體和服裝等。由此看來(lái),人類可接觸并暴露于生活中多種來(lái)源的納米銀粒子。目前,盡管含有納米銀的商品越來(lái)越多,但關(guān)于納米銀是否對(duì)人體具有毒性作用,以及是否會(huì)引起細(xì)胞不良反應(yīng)的研究尚缺乏。既往研究中,對(duì)納米銀的毒性研究大多集中在其對(duì)體外細(xì)胞作用的研究,包括對(duì)單核細(xì)胞、生精干細(xì)胞、人類成熟精子、人肺纖維母細(xì)胞、鼠胚胎干細(xì)胞等,而在體內(nèi)的研究較少,目前包括有青春期前納米銀暴露對(duì)成年大鼠生殖功能的研究,以及納米銀暴露對(duì)大鼠肝臟功能的影響,或者通過(guò)吸入法給藥來(lái)研究納米銀對(duì)呼吸系統(tǒng)的影響等,故本實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新性在于通過(guò)對(duì)雄性小鼠進(jìn)行長(zhǎng)期的納米銀暴露,并通過(guò)灌胃法給藥,來(lái)探究其對(duì)雄性生殖系統(tǒng)的毒性作用。目的:研究納米銀對(duì)雄性小鼠生殖系統(tǒng)的毒性作用,并在基因表達(dá)水平上探究其可能的作用機(jī)制。方法:將45只雄性Bal/c小鼠隨機(jī)分為3組,即對(duì)照組(純水),AgNP30mg/kg實(shí)驗(yàn)組,AgNP125mg/kg實(shí)驗(yàn)組,以灌胃法進(jìn)行染毒,每日1次,連續(xù)染毒90日。之后對(duì)小鼠睪丸組織進(jìn)行HE染色并觀察其病理改變,采用ELISA法測(cè)定小鼠血液中生殖激素水平,在顯微鏡下人工觀察并計(jì)數(shù)精子數(shù)量和活力,采用TUNEL法檢測(cè)睪丸組織的細(xì)胞調(diào)亡,通過(guò)微陣列分析及q RT-PCR技術(shù)鑒定各組睪丸中差異性表達(dá)的基因,并在蛋白水平上通過(guò)免疫熒光法和western blotting法對(duì)凋亡相關(guān)基因的表達(dá)進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:與對(duì)照組相比,AgNP125mg/kg實(shí)驗(yàn)組小鼠睪丸組織形態(tài)發(fā)生異常改變包括生精細(xì)胞空泡化,支持細(xì)胞減少,生精小管結(jié)構(gòu)異常;精子質(zhì)量下降包括數(shù)量減少和活動(dòng)力減弱;睪丸組織細(xì)胞凋亡增多;但各組間睪丸系數(shù)和血液中性激素水平(FSH/LH/E2/T)并無(wú)明顯差別。對(duì)比分析各組睪丸組織基因表達(dá)譜發(fā)現(xiàn),125 mg/kg AgNP實(shí)驗(yàn)組中有383個(gè)基因異常表達(dá),其中215個(gè)基因?yàn)橐阎δ芑?并且該實(shí)驗(yàn)組中凋亡相關(guān)分子Caspase3,Myc和Mdm2的表達(dá)均上調(diào)。結(jié)論:納米銀可能是通過(guò)改變凋亡相關(guān)基因的表達(dá)從而對(duì)雄性小鼠生殖系統(tǒng)產(chǎn)生有害影響。該研究結(jié)果不僅驗(yàn)證了納米銀對(duì)雄性生殖系統(tǒng)具有毒性作用,也再一次強(qiáng)調(diào)了關(guān)于納米銀的安全應(yīng)用問(wèn)題。
【關(guān)鍵詞】：納米銀 雄性生殖系統(tǒng) 基因表達(dá) 凋亡
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 1 前言12-13
• 2 材料與方法13-27
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料13-14
• 2.1.1 材料來(lái)源13
• 2.1.2 儀器及耗材13-14
• 2.2 研究方法14-27
• 2.2.1 動(dòng)物和處理14-15
• 2.2.2 計(jì)算睪丸系數(shù)15
• 2.2.3 睪丸的組織病理學(xué)評(píng)估15-16
• 2.2.4 性激素測(cè)定16
• 2.2.5 精子評(píng)估16-17
• 2.2.6 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)17-18
• 2.2.7 微陣列分析18-19
• 2.2.8 免疫熒光檢測(cè)蛋白表達(dá)19
• 2.2.9 Western Blotting法檢測(cè)蛋白表達(dá)19-21
• 2.2.10 實(shí)時(shí)定量PCR(q RT-PCR)21-26
• 2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析26-27
• 3 結(jié)果27-35
• 3.1 生長(zhǎng)發(fā)育27
• 3.2 睪丸系數(shù)和性激素分析27-28
• 3.3 睪丸組織病理學(xué)評(píng)估28-29
• 3.4 精子評(píng)估29-30
• 3.5 凋亡細(xì)胞檢測(cè)30-31
• 3.6 差異基因篩選及功能分類31
• 3.7 差異基因表達(dá)的驗(yàn)證31-35
• 4 討論35-38
• 5 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 綜述43-59
• 前言43-45
• 納米粒子的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)44
• LDH試驗(yàn)44-45
• MTT試驗(yàn)45
• MTS試驗(yàn)45
• 納米粒子的毒性作用機(jī)制45
• 納米碳管的細(xì)胞毒性45-46
• 納米二氧化鈦的細(xì)胞毒性46-47
• 量子粒的細(xì)胞毒性47-48
• 納米金的細(xì)胞毒性48
• 納米銀的細(xì)胞毒性48-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-59
• 致謝59-60
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷60
• 基本信息60
• 教育經(jīng)歷60
• 在讀期間發(fā)表的論文及參加會(huì)議情況60

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