本文關(guān)鍵詞：氯化錳長期低劑量染毒對大鼠子代生精細胞的影響及其作用機理

  更多相關(guān)文章： 錳 生精細胞 凋亡 OPA1 DRP1 Caspase 9 Bim FOXO3A

【摘要】：目的:通過親代雌性SD大鼠長期低劑量錳染毒,觀察其對子代雄性大鼠生精細胞的影響。方法:雌性SD大鼠(體重90-120 g)32只隨機分為對照組、2 mg/kg、4 mg/kg及8mg/kg染錳組,8只/組。分別腹腔注射等容氯化錳(Mn Cl·4H2O)和生理鹽水(NS),5d/w,1次/d,共8w。后與正常雄性SD大鼠交配,通過陰道栓檢測確定孕期后持續(xù)染毒6w(妊娠期和哺乳期各3w)。取子代成熟期(8w齡)雄性SD大鼠睪丸和血清做以下檢測:1.蘇木精-伊紅(HE)染色觀察睪丸結(jié)構(gòu);2.Real-time PCR技術(shù)檢測雄性子鼠睪丸凋亡相關(guān)基因OPA1、DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A的mRNA表達情況;3.免疫組化法和Western blot檢測上述凋亡相關(guān)蛋白定位和定量表達情況;4.化學發(fā)光法檢測子代大鼠血清總睪酮含量;5.WST-1法檢測子代大鼠血清SOD活力;6.可見光法檢測子代大鼠血清CAT活力;7.酶促反應(yīng)法檢測子代大鼠血清GSH-Px活力。結(jié)果:1.對照組睪丸曲細精管管腔大小基本一致、各級生精細胞有序排列,間質(zhì)正常無充血、出血及炎癥細胞浸潤;各染錳組睪丸組織結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同程度的形態(tài)學改變,且其程度隨染錳劑量增加而逐漸加重。2.錳對大鼠子代睪丸生精細胞DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A表達的影響:與對照組相比,各染錳組DRP1、Caspase 9、Bim、FOXO3A mRNA、免疫組化染色陽性細胞率和蛋白相對表達量均較正常組偏高(P0.05),且各染錳組相比,隨染錳劑量的增加而增強(P0.05)。3.錳對大鼠子代睪丸生精細胞OPA1的表達影響:與對照組相比,各染錳組OPA1mRNA、免疫組化染色陽性細胞率和蛋白相對表達量均較正常組偏低(P0.05),且各染錳組相比,隨染錳劑量的增加而減弱(P0.05)。4.錳對子代雄性大鼠血清總睪酮含量的影響:各染錳組較對照組相比均降低(P0.05),且各染錳組之間相比,隨染錳劑量的增加而降低(P0.05)。5.錳對子代雄性大鼠血清抗氧化酶系統(tǒng)的影響:與對照組相比,各染錳組SOD、CAT和GSH-Px活力均降低(P0.05),且各染錳組之間相比,隨染錳劑量的增加而降低(P0.05)。結(jié)論:長期低劑量染錳可通過胎盤屏障和血睪屏障進入子代大鼠睪丸,引起生精細胞凋亡,導致其生精障礙。可能的機制為:1.作用于下丘腦-垂體-性腺軸,降低子代大鼠血清睪酮水平,引起精子發(fā)育的細胞周期阻滯;2.通過降低子代大鼠血清抗氧化酶活性,增加其體內(nèi)氧化應(yīng)激狀態(tài),誘導生精細胞細胞膜的脂質(zhì)過氧化而啟動細胞凋亡;3.通過上調(diào)FOXO3A、誘導Bim基因表達,和/或上調(diào)DRP1、下調(diào)OPA1基因表達,打破了線粒體融合/分裂平衡,啟動了線粒體凋亡信號傳遞途徑,誘導其下游信號Caspase 9的表達來實現(xiàn)生精細胞的凋亡過程。
【關(guān)鍵詞】：錳 生精細胞 凋亡 OPA1 DRP1 Caspase 9 Bim FOXO3A
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-28
• 結(jié)果28-39
• 討論39-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻45-49
• 綜述：錳的雄性生殖毒理效應(yīng)及其機制研究進展49-56
• 參考文獻53-56
• 致謝56-57
• 作者簡介57

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