目的:本研究以無機砷為暴露因素,通過觀察無機砷暴露對DC抗原遞呈功能的影響,以及p62依賴性Nrf2活化在其中可能發(fā)揮的調控作用,進一步探索無機砷在介導免疫抑制中的可能機制,進而為砷中毒的遠期致癌防治提供線索和理論依據。研究方法:1、小鼠BMDCs誘導培養(yǎng)及小鼠脾單細胞懸液制備。2、檢測指標與方法:(1)采用流式細胞術方法檢測BMDCs表型受體。(2)采用MTT方法測定混合淋巴細胞反應(MLR)淋巴細胞增殖活力。(3)采用基因沉默方法建立Nrf2/p62沉默BMDCs。(4)采用實時定量PCR與ELISA方法檢測T淋巴細胞與DC中相關細胞因子含量。(5)采用Western blot方法檢測DC中Nrf2等相關蛋白含量。結果:1、無機砷對DC抗原遞呈功能具有抑制作用。經1μM As~Ⅲ處理后,Th1、Th2、Th17型細胞因子、Treg型細胞轉錄因子、細胞因子的mRNA轉錄水平均降低,且細胞因子Ifn-γ(1:5)與Il-2(1:10)、Il-13(1:10)與Il-4(1:5)、Il-17(1:10)與Il-22(1:10)、轉錄因子Foxp3(1:10)、細胞因子Il-10(1:10...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1，BMDCs純度檢測與無機砷暴露后的BMDCs對T淋巴細胞增殖活力的影響

3結果3.1無機砷對DC抗原遞呈功能的抑制作用3.1.1無機砷暴露后的BMDCs抑制T淋巴細胞增殖活力如圖1（A）所示，收集培養(yǎng)至第6天的BMDCs半懸浮集落細胞，使用CD11c+-FITC特異性標記物進行細胞標記，采用流式細胞術檢測細胞的純度，結果....

圖2，無機砷暴露后的BMDCs對Th1型細胞轉錄因子及細胞因子mRNA表達的影響

中國醫(yī)科大學碩士學位論文LPS單獨處理的T淋巴細胞Th1型細胞轉錄因子T-bet、細胞因子Ifn-γ與Il-2的轉錄水平顯著升高，且細胞因子Ifn-γ（1:5）與Il-2（1:10）的差異具有統計學意義（P<0.05）。與25ng/mlLPS組....

圖3，無機砷暴露后的BMDCs對Th2型細胞轉錄因子及細胞因子mRNA表達的影響

無機砷暴露后的BMDCs對Th2型細胞轉錄因子及細胞因子mRNA表達的影響注：1μMAsⅢ處理2h，再與25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs與脾臟淋巴細胞以1:5、1:10共培養(yǎng)48h，檢測脾淋巴細胞中Th2轉錄因子G....

圖4，無機砷暴露后的BMDCs對Th17型細胞轉錄因子及細胞因子mRNA表達的影響

無機砷暴露后的BMDCs對Th17型細胞轉錄因子及細胞因子mRNA表達的影響注：1μMAsⅢ處理2h，再與25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs與脾臟淋巴細胞以1:5、1:10共培養(yǎng)48h，檢測脾淋巴細胞中Th17型轉錄因....

本文編號：3970056