目的:本研究以無機(jī)砷為暴露因素,通過觀察無機(jī)砷暴露對(duì)DC抗原遞呈功能的影響,以及p62依賴性Nrf2活化在其中可能發(fā)揮的調(diào)控作用,進(jìn)一步探索無機(jī)砷在介導(dǎo)免疫抑制中的可能機(jī)制,進(jìn)而為砷中毒的遠(yuǎn)期致癌防治提供線索和理論依據(jù)。研究方法:1、小鼠BMDCs誘導(dǎo)培養(yǎng)及小鼠脾單細(xì)胞懸液制備。2、檢測(cè)指標(biāo)與方法:(1)采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測(cè)BMDCs表型受體。(2)采用MTT方法測(cè)定混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)淋巴細(xì)胞增殖活力。(3)采用基因沉默方法建立Nrf2/p62沉默BMDCs。(4)采用實(shí)時(shí)定量PCR與ELISA方法檢測(cè)T淋巴細(xì)胞與DC中相關(guān)細(xì)胞因子含量。(5)采用Western blot方法檢測(cè)DC中Nrf2等相關(guān)蛋白含量。結(jié)果:1、無機(jī)砷對(duì)DC抗原遞呈功能具有抑制作用。經(jīng)1μM As~Ⅲ處理后,Th1、Th2、Th17型細(xì)胞因子、Treg型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子的mRNA轉(zhuǎn)錄水平均降低,且細(xì)胞因子Ifn-γ(1:5)與Il-2(1:10)、Il-13(1:10)與Il-4(1:5)、Il-17(1:10)與Il-22(1:10)、轉(zhuǎn)錄因子Foxp3(1:10)、細(xì)胞因子Il-10(1:10...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1，BMDCs純度檢測(cè)與無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)T淋巴細(xì)胞增殖活力的影響

3結(jié)果3.1無機(jī)砷對(duì)DC抗原遞呈功能的抑制作用3.1.1無機(jī)砷暴露后的BMDCs抑制T淋巴細(xì)胞增殖活力如圖1（A）所示，收集培養(yǎng)至第6天的BMDCs半懸浮集落細(xì)胞，使用CD11c+-FITC特異性標(biāo)記物進(jìn)行細(xì)胞標(biāo)記，采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞的純度，結(jié)果....

圖2，無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)Th1型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響

中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文LPS單獨(dú)處理的T淋巴細(xì)胞Th1型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子T-bet、細(xì)胞因子Ifn-γ與Il-2的轉(zhuǎn)錄水平顯著升高，且細(xì)胞因子Ifn-γ（1:5）與Il-2（1:10）的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。與25ng/mlLPS組....

圖3，無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)Th2型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響

無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)Th2型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響注：1μMAsⅢ處理2h，再與25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs與脾臟淋巴細(xì)胞以1:5、1:10共培養(yǎng)48h，檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞中Th2轉(zhuǎn)錄因子G....

圖4，無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)Th17型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響

無機(jī)砷暴露后的BMDCs對(duì)Th17型細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子及細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響注：1μMAsⅢ處理2h，再與25ng/mlLPS共刺激24h后，收集BMDCs與脾臟淋巴細(xì)胞以1:5、1:10共培養(yǎng)48h，檢測(cè)脾淋巴細(xì)胞中Th17型轉(zhuǎn)錄因....

本文編號(hào)：3970056