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用AFLP技術(shù)篩選淡色庫蚊溴氰菊酯抗性相關(guān)分子標(biāo)記

發(fā)布時(shí)間:2024-03-25 00:32
  蚊媒病是全世界最重要的人類傳染病之一,嚴(yán)重危害人類身心健康;瘜W(xué)防制是控制蚊媒病的一個(gè)重要手段。實(shí)踐證明殺蟲劑對(duì)于控制蚊媒病的傳播非常有效。然而隨著殺蟲劑的長(zhǎng)期、大量使用,蚊媒的抗藥性也隨之發(fā)生和發(fā)展。抗藥性已成為當(dāng)前控制蚊媒病的最大障礙。發(fā)現(xiàn)并研究新的抗藥性靶標(biāo)將有助于闡明抗藥性的分子基礎(chǔ)和尋找抗藥性的治理方法。 大量研究表明,蚊殺蟲劑抗性性狀是一種數(shù)量性狀。因此,建立蚊抗性-敏感雜交系,篩選遺傳標(biāo)記,是研究蚊的抗性遺傳機(jī)理和防制的重要基礎(chǔ)。本研究首先采用淡色庫蚊溴氰菊酯抗性(R)、敏感(S)品系進(jìn)行正、反交,得到兩個(gè)雜交F2代群體,并對(duì)比觀察其生物學(xué)特性;以WHO成蚊接觸筒生物測(cè)定法將F2個(gè)體的表型區(qū)分為10-60分鐘擊倒時(shí)間點(diǎn)和24小時(shí)恢復(fù)與未恢復(fù)8種表型,采用生存分析法分析蚊在溴氰菊酯選擇壓力下的生存情況;接著,采用分群分析法(BSA法)對(duì)雜交F2代溴氰菊酯抗性相關(guān)的分子標(biāo)記進(jìn)行篩選分析。用AFLP引物篩選所建立的抗藥性2個(gè)極端水平基因池,得到與溴氰菊酯抗性性狀緊密連鎖的特異性DNA片段;并分別在F2抗性、敏感群體中進(jìn)行驗(yàn)證。 本研究通過淡色庫蚊溴氰菊酯抗性、敏感品系進(jìn)行正、反...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    一、 材料
        (一) 供試蚊
        (二) 主要試劑
        (三) 主要溶液配方
        (四) 主要儀器設(shè)備
    二、 方法
        (一) 淡色庫蚊溴氰菊酯抗性、敏感雜交系的建立
        (二) 抗性性狀鑒定與檢驗(yàn)
        (三) BSA 法篩選遺傳標(biāo)記
        (四) 雜交 F2 群體 AFLP 分子標(biāo)記多態(tài)性鑒定
結(jié)果
    一、 淡色庫蚊溴氰菊酯抗性、敏感雜交系的建立
        (一) 人工交配試驗(yàn)成功率
        (二) 雜交系和自交系 F1 代生物學(xué)特性對(duì)比觀察
        (三) 雜交系和自交系 F2 代抗性水平檢測(cè)(幼蟲浸漬法)
    二、 淡色庫蚊溴氰菊酯抗性、敏感雜交系的抗性性狀鑒定與檢驗(yàn)
        (一) 雜交系 F2 群體的抗性性狀鑒定
        (二) 雜交系 F2 群體的抗性性狀的統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)
    三、 BSA 法篩選與抗藥性相關(guān)的 AFLP 分子標(biāo)記
        (一) 單蚊 DNA 質(zhì)量鑒定
        (二) BSA 法構(gòu)建淡色庫蚊溴氰菊酯抗性、敏感基因池
        (三) AFLP 擴(kuò)增多態(tài)性帶型分析
        (四) 抗性、敏感 DNA 池 AFLP 引物多態(tài)性分析
    四、 在雜交系 F2 群體中鑒定 AFLP 分子標(biāo)記的多態(tài)性分析
        (一) AFLP 標(biāo)記 R 的多態(tài)性分析
        (二) AFLP 標(biāo)記 S 的多態(tài)性分析
討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號(hào):3938259

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