發(fā)布時間：2017-05-07 18:11

  本文關(guān)鍵詞：圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠學(xué)習(xí)記憶及海馬中miR-124與miR-132表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]氟是一種環(huán)境毒物,它不僅對骨骼和牙齒有害,而且它還具有神經(jīng)毒性,表現(xiàn)之一就是對學(xué)習(xí)記憶的有影響。隨著研究的深入,人們對氟暴露群體后代智商的研究越來越重視,miRNA參與調(diào)節(jié)了中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和活動,包括神經(jīng)突觸可塑性、神經(jīng)細(xì)胞的分化等,這些活動都與認(rèn)知功能密切相關(guān)。但氟對學(xué)習(xí)記憶的影響是否與miRNA有關(guān)還不清楚,本研究欲探討母鼠圍產(chǎn)期氟暴露后,是否引起仔鼠自發(fā)行為、學(xué)習(xí)記憶能力以及焦慮行為的改變,且是否伴隨了miRNA及其靶基因的變化,擬從轉(zhuǎn)錄后水平探討氟的神經(jīng)毒性機制,為氟中毒的預(yù)防和治療提供依據(jù)。[方法]健康性成熟的ICR小鼠進(jìn)行一周的適應(yīng)性飼養(yǎng)后,雌雄合籠(雌：雄為2：1),次日早晨檢查雌鼠陰道,查到陰道栓的當(dāng)天定為懷孕第0天(gestation day 0,GDO)。懷孕雌鼠隨機分為4組,分別為對照組(C組,去離子水)、低氟組(L組,25mg/LNaF)、中氟組(M組,50mg/L NaF)、高氟組(H組,100mg/NaF),每組懷孕母鼠6只。母鼠懷孕第7天通過飲水?dāng)z氟,仔鼠出生后第21天(PND 21)終止攝氟。仔鼠出生后第21天(PND 21)每組隨機選取12只仔鼠脫頸椎處死,取組織備用;12只仔鼠進(jìn)行行為學(xué)檢測。采用開場試驗和八臂迷宮檢測仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力,采用組織切片、HE染色,熒光定量PCR等技術(shù)手段檢測仔鼠海馬腦組織形態(tài)、學(xué)習(xí)記憶相關(guān)miRNA和mRNA的表達(dá)量,探討氟的神經(jīng)毒性機制。[結(jié)果]1仔鼠體重結(jié)果：與對照組比,母鼠圍產(chǎn)期氟暴露顯著降低了仔鼠出生后第3、6、9、12、15、18、21天仔鼠體重。2仔鼠股骨氟含量測定結(jié)果：與對照組相比,圍產(chǎn)期氟暴露顯著升高了仔鼠股骨中氟含量。3海馬病理切片HE染色結(jié)果：對照組仔鼠海馬區(qū)形態(tài)結(jié)構(gòu)清晰完整,分區(qū)明顯,細(xì)胞核為圓形或橢圓形,著色均勻,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,排列緊密,數(shù)目較多;低氟組基本無明顯病變;中氟組和高氟組神經(jīng)細(xì)胞總數(shù)減少,細(xì)胞核變小且形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞邊緣不明顯。4行為學(xué)檢測結(jié)果：曠場實驗中,與對照組相比,氟暴露仔鼠進(jìn)入中心區(qū)的次數(shù)呈下降趨勢,且高氟組進(jìn)入中心區(qū)的次數(shù)顯著減少。八臂迷宮實驗中,與對照組相比,高氟組增加了參考記憶錯誤、工作記憶錯誤和總進(jìn)臂次數(shù),說明圍產(chǎn)期氟暴露仔鼠損害了學(xué)習(xí)記憶能力。5仔鼠海馬中miRNA檢測結(jié)果：高氟組仔鼠海馬中miR-124和miR-132表達(dá)量顯著升高。6仔鼠海馬中mRNA檢測結(jié)果：高氟組DGCR8的表達(dá)量較對照組顯著上升，Mecp2和色氨酸羥化酶-2表達(dá)量顯著下降,其中中氟組和高氟組海馬色氨酸羥化酶-2表達(dá)量極顯著的減少;中氟組和高氟組海馬Mecp2的表達(dá)量顯著低于對照組,其中中氟組差異極顯著。處理組海馬組織中CREB含量顯著低于對照組。其余兩個基因dicer和BDNF沒有變化。谷氨酸受體基因表達(dá)量中,AMPA1、AMPA2和mGluR2表達(dá)量顯著低于對照組,其中AMPA1和mGluR2的中氟組顯著低于對照組,AMPA2的高氟組顯著下降。另外三個基因mGluR5、NMDAR2A和NMDAR2B沒有變化。[結(jié)論]圍產(chǎn)期氟暴露可損傷仔鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,其分子機制可能與海馬中miR-124和miR-132、谷氨酸受體、CREB等基因的表達(dá)受到影響有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：氟 圍產(chǎn)期 海馬 學(xué)習(xí)記憶
【學(xué)位授予單位】：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要6-8
• 前言8-11
• 1 材料與方法11-22
• 1.1 試驗材料11-13
• 1.1.1 動物模型的建立11
• 1.1.2 主要試劑11-12
• 1.1.3 主要儀器12-13
• 1.2 試驗方法13-22
• 1.2.1 小鼠生長性能的測定13
• 1.2.2 樣品采集和處理13
• 1.2.3 仔鼠股骨中氟含量測定13-14
• 1.2.4 仔鼠海馬組織形態(tài)學(xué)觀察14
• 1.2.5 曠場實驗(Open fields test,OFT)14-15
• 1.2.6 八臂迷宮(Radial-arm maze)15-16
• 1.2.7 仔鼠海馬中總RNA的提取16-17
• 1.2.8 引物的設(shè)計17-18
• 1.2.9 實時熒光定量PCR反應(yīng)體系的建立18-22
• 1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計22
• 2 實驗結(jié)果22-28
• 2.1 小鼠生長狀態(tài)觀察22
• 2.2 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠體重的影響22-23
• 2.3 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠股骨中氟含量的影響23
• 2.4 仔鼠海馬組織病理切片觀察23-24
• 2.5 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠行為學(xué)的影響24-26
• 2.5.1 曠場實驗(Open field test)24
• 2.5.2 八臂迷宮(Radial-arm maze)24-26
• 2.6 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠海馬miRNA-124與miRNA-132的影響26
• 2.7 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠海馬中學(xué)習(xí)記憶相關(guān)mRNA的影響26-28
• 3 討論28-33
• 3.1 動物模型的建立28
• 3.2 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠體重的影響28
• 3.3 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠股骨濃度的影響28-29
• 3.4 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠海馬組織形態(tài)的影響29
• 3.5 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠曠場實驗的影響29
• 3.6 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠學(xué)習(xí)記憶的影響29-30
• 3.7 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠海馬miRNA-124和miRNA-132的影響30-31
• 3.8 圍產(chǎn)期氟暴露對仔鼠海馬中學(xué)習(xí)記憶相關(guān)mRNA的影響31-33
• 4 結(jié)論33-34
• 英文縮略詞表34-35
• 參考文獻(xiàn)35-40
• Abstract40-42
• 致謝42

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫秀發(fā);侯曉暉;;硒對高碘仔鼠腦髓化影響的分子機制[J];營養(yǎng)健康新觀察;2004年04期

2 張清林,王愛平,黃春倩,王治喬;膦氧氮丙啶對昆明種仔鼠生長發(fā)育的影響[J];衛(wèi)生毒理學(xué)雜志;1999年03期

3 李英華,朱惠民,董少霞,張建軍;高碘對仔鼠腦發(fā)育和智力的影響[J];中國地方病防治雜志;2000年01期

4 龍建綱,張燕琴,沈慧,秦海宏,王福O，

本文編號：350347