本文關(guān)鍵詞：5-脂氧合酶在4-氨基聯(lián)苯所致HBE細(xì)胞氧化應(yīng)激中的作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：：[目的]研究4-氨基聯(lián)苯(4-aminobiphenyl,4-ABP)所導(dǎo)致的人支氣管上皮細(xì)胞氧化應(yīng)激及氧化損傷過程中5-LOX等氧化代謝酶所起的作用,為4-ABP在肝外組織中的代謝活化及損傷機(jī)制研究提供新的思路。[方法]選取人支氣管上皮細(xì)胞(HBE)為靶細(xì)胞,通過MTT實(shí)驗(yàn)選擇50μM、100μM、200μM三個劑量持續(xù)染毒細(xì)胞24h后,測定各染毒組ROS、SOD、CAT GSH、T-AOC、MDA水平變化,用Western Blot法檢測各染毒組Nrf2蛋白的表達(dá)情況。[結(jié)果]HBE細(xì)胞經(jīng)不同濃度4-ABP染毒處理后細(xì)胞內(nèi)ROS水平明顯升高,100、200μM染毒時ROS水平的升高差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)�？寡趸窼OD和CAT隨著4-ABP染毒劑量的增加呈先升高再降低的趨勢,低劑量染毒時SOD活性代償性增高,中、高劑量(100、200μM)染毒時SOD活力顯著意義的降低(p0.05)。CAT活性在低、中劑量(50、100gM)染毒明顯升高(p0.05)。4-ABP染毒處理后GSH含量和T-AOC水平顯著降低(p0.05),而細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA的含量顯著增加(p0.05)；Nrf2蛋白的表達(dá)也增加。5-LOX基因沉默處理和使用5-LOX的特異性抑制劑AA861均可抑制4-ABP所致的HBE細(xì)胞氧化應(yīng)激和氧化損傷,但對Nrf2蛋白無明顯影響。CYP4501A的抑制劑α-萘黃酮對4-ABP引起的氧化應(yīng)激和氧化損傷具有一定的保護(hù)作用,并能抑制氧化應(yīng)激刺激導(dǎo)致的Nrf2蛋白表達(dá)增加。而前列腺素合成酶的抑制萘普生則對4-ABP所致的氧化應(yīng)激和氧化損傷無明顯的保護(hù)作用。[結(jié)論]4-ABP可使HBE細(xì)胞ROS水平升高,影響細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)狀態(tài),導(dǎo)致氧化損傷,并呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。抑制5-LOX能有效降低4-ABP所致的氧化應(yīng)激水平和氧化損傷程度,提示5-LOX參與4-ABP的活化,引起氧化應(yīng)激。P450也在HBE細(xì)胞中4-ABP的代謝活化及其導(dǎo)致的氧化應(yīng)激中起著一定作用。圖16幅,表6個,參考文獻(xiàn)75篇。
【關(guān)鍵詞】：4-氨基聯(lián)苯 5-脂氧合酶 氧化應(yīng)激 活性氧
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 英文縮略表9-10
• 1 前言10-14
• 2 材料與方法14-25
• 2.1 材料與儀器14-16
• 2.1.1 材料14-15
• 2.1.2 主要儀器和設(shè)備15
• 2.1.3 主要試劑的配制15-16
• 2.2 方法16-24
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)16
• 2.2.2 細(xì)胞染毒16-17
• 2.2.3 細(xì)胞收獲17
• 2.2.4 細(xì)胞內(nèi)總蛋白的提取17
• 2.2.5 蛋白濃度測定17
• 2.2.6 MTT實(shí)驗(yàn)17-18
• 2.2.7 細(xì)胞內(nèi)活性氧測定18
• 2.2.8 4-ABP染毒后細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)狀態(tài)的檢測—SOD、CAT、GSH、T-AOC活力測定18-22
• 2.2.9 細(xì)胞內(nèi)丙二醛的測定22-23
• 2.2.10 氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白—Nrf2蛋白的表達(dá)測定23-24
• 2.3 統(tǒng)計(jì)分析24-25
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-37
• 3.1 4-氨基聯(lián)苯對HBE細(xì)胞存活率的影響25
• 3.2 5-LOX對4-ABP染毒后細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響25-27
• 3.3 脂氧合酶等對.4-ABP導(dǎo)致的抗氧化系統(tǒng)變化的影響27-33
• 3.3.1 5-LOX對4-ABP染毒后HBE細(xì)胞SOD活性的影響27-28
• 3.3.2 5-LOX對4-ABP染毒后細(xì)胞內(nèi)CAT活力的影響28-30
• 3.3.3 5-LOX對4-ABP染毒處理HBE細(xì)胞GSH含量的影響30-31
• 3.3.4 5-LOX對4-ABP染毒后HBE細(xì)胞總抗氧化能力影響31-33
• 3.4 5-LOX對4-ABP染毒后HBE細(xì)胞MDA含量影響33-34
• 3.5 各組細(xì)胞4-ABP染毒后Nrf2蛋白表達(dá)水平測定34-37
• 4 討論37-45
• 4.1 5-LOX對4-ABP作用后HBE細(xì)胞內(nèi)ROS水平的影響38-39
• 4.2 5-LOX對4-ABP處理后細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的影響39-42
• 4.2.1 5-LOX在4-ABP處理后細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性變化中的作用39-41
• 4.2.2 非酶的抗氧化劑谷胱甘肽變化41-42
• 4.3 5-LOX對4-ABP作用后總抗氧化能力的影響42
• 4.4 5-LOX對4-ABP染毒后HBE細(xì)胞MDA含量的影響42-43
• 4.5 4-ABP染毒后Nrf2表達(dá)水平的變化43-45
• 5 結(jié)論45-47
• 參考文獻(xiàn)47-53
• 綜述53-65
• 參考文獻(xiàn)59-65
• 攻讀學(xué)位期間主要研究成果65-66
• 致謝66

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 朱宏翔;胡建安;黃云;武越;熊敏如;;人支氣管上皮細(xì)胞5-脂氧合酶介導(dǎo)4-氨基聯(lián)苯的活化及DNA損傷[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2011年02期

2 胡建安,武越,Aron P.Kulkarni;脂氧合酶介導(dǎo)酚噻嗪類對聯(lián)苯胺等氧化的增強(qiáng)作用[J];中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志;2004年03期

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本文編號：343885