本文關鍵詞：手性納米纖維的冠狀蛋白和細胞學效應研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：納米生物學整合了多學科知識，已經(jīng)成為生物醫(yī)學重要的分支。由于其應用于生物成像，疾病診斷，腫瘤治療的廣闊前景，為了更好的探索其生物醫(yī)學方面的應用，需要對其生物體系的納米生物界面和生物學效應更深入的研究。目前，深入研究的納米材料有膠體金顆粒，嵌段共聚物，以及碳納米材料等，但是對一維納米材料的生物安全性及其對細胞影響的研究還很少，主要集中在碳納米管對機體的毒性研究，但是這些研究不足以完全理解1D納米材料和生物體系之間的相互作用。本文研究了一維納米材料中納米纖維和細胞間的相互作用。本論文中利用手性天冬氨酸具有和硝酸鋅形成配位聚合物的能力，合成了具有手性的含金屬的納米纖維，通過掃描電子顯微鏡（SEM）表征了其納米纖維的屬性，直徑約為100nm，長度可達上百微米；圓二色譜（CD）光譜顯示兩種手性納米纖維在250nm處具有相反的科頓效應峰，驗證了合成材料的手性；同時，通過電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜（ICP-AES）表明合成的手性納米纖維在PBS（pH7.4）中是沒有釋放鋅離子的，即手性納米纖維在PBS（pH7.4）中是穩(wěn)定存在的。 細胞微環(huán)境是近年來研究的熱點，細胞微環(huán)境在細胞增殖，傷口愈合，胚胎發(fā)育，組織分化等生理現(xiàn)象中起著重要的作用。而對于腫瘤的發(fā)生發(fā)展，，科學家認為正是由于其特殊的微環(huán)境，比如低pH，低氧，還有其特有的分泌蛋白等，造成了腫瘤難以治愈的根本原因。而現(xiàn)有的納米材料還缺乏高效靶向性，其原因可能是由于冠狀蛋白的存在和腫瘤微環(huán)境的影響。本文合成的手性納米纖維能特異性的吸附細胞微環(huán)境中的分泌蛋白熱休克蛋白90（Hsp90）和基質金屬蛋白酶（MMPs），這些冠狀蛋白在以前的研究中還沒有報道過。采用一維聚丙烯酰氨凝膠電泳（SDS-PAGE）和質譜結合的方法鑒定了手性納米纖維表面吸附的蛋白Hsp90，再進一步通過明膠酶譜法鑒定出了MMP2，MMP9蛋白，這些細胞外基質中的蛋白能夠調節(jié)各種細胞反應和細胞內信號通路，比如細胞遷移，增殖，自噬等。本研究中還合成了其他手性氨基酸與金屬離子形成的配位聚合物納米材料，結果顯示手性氨基酸對吸附冠狀蛋白的種類沒有影響，而金屬離子在這類材料吸附冠狀蛋白中起著核心地位。 最后，本文研究了手性納米纖維對細胞行為及胞內信號的改變，數(shù)據(jù)提示了手性納米纖維能夠抑制細胞遷移，減緩細胞增殖，提升細胞內活性氧簇（ROS）水平，和激活細胞內自噬效應。這些研究顯示手性納米纖維能特異性的吸附細胞微環(huán)境的蛋白和分泌蛋白，并對細胞行為和細胞內信號通路進行調控。并且其生物學效應顯示，L型手性納米纖維比D型手性納米纖維激活更大的細胞反應，但是最后的累積效應幾乎相同，這種累積效應依賴于手性納米纖維的作用時間及其濃度。
【關鍵詞】：手性納米纖維 冠狀蛋白 細胞學效應 腫瘤微環(huán)境 熱休克蛋白90 基質金屬酶 納米生物界面
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R114;TB383.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-12
• 第一章 緒論12-21
• 1.1 引言12
• 1.2 納米纖維12-13
• 1.3 細胞與納米材料的生物界面13-14
• 1.4 冠狀蛋白14-16
• 1.5 納米材料激活的細胞內信號通路16-19
• 1.6 腫瘤微環(huán)境19
• 1.6.1 細胞外基質金屬蛋白酶（MMPs）19
• 1.6.2 胞外熱休克蛋 90（eHsp90）19
• 1.7 本研究的目的和意義19-21
• 第二章 手性納米纖維的合成和表征21-27
• 2.1 儀器試劑21-22
• 2.2 納米材料合成方法22
• 2.3 性質表征22-25
• 2.3.1 SEM22-23
• 2.3.2 CD23
• 2.3.3 ICP-AES23-24
• 2.3.4 表面電勢24
• 2.3.5 手性氨基酸納米材料 SEM 表征24-25
• 2.4 討論25
• 2.5 小結25-27
• 第三章 手性納米纖維的細胞毒性檢測27-32
• 3.1 儀器試劑27
• 3.2 細胞來源和培養(yǎng)方法27
• 3.3 細胞學效應27-30
• 3.3.1 細胞存活率27-28
• 3.3.2 細胞膜完整性檢測28-29
• 3.3.3 FBS，BSA 封閉后的細胞存活率29-30
• 3.4 討論30
• 3.5 小結30-32
• 第四章 手性納米纖維的冠狀蛋白32-42
• 4.1 儀器試劑32
• 4.2 制備和鑒定冠狀蛋白方法32-36
• 4.2.1 制備冠狀蛋白32-33
• 4.2.2 SDS-PAGE33
• 4.2.3 銀染33-35
• 4.2.4 明膠酶譜法35-36
• 4.2.4.1 試劑配制35-36
• 4.2.4.2 樣品制備36
• 4.2.4.3 實驗步驟36
• 4.3 冠狀蛋白表征36-39
• 4.3.1 手性納米纖維形成的冠狀蛋白36-37
• 4.3.2 手性氨基酸納米材料的冠狀蛋白37-38
• 4.3.3 冠狀蛋白的質譜分析檢測38-39
• 4.3.4 冠狀蛋白的掃描電鏡觀察39
• 4.4 討論39-40
• 4.5 小結40-42
• 第五章 手性納米纖維的細胞學效應42-49
• 5.1 儀器試劑42
• 5.2 細胞學效應檢測方法42-43
• 5.2.1 細胞遷移實驗方法42
• 5.2.2 細胞周期檢測方法42-43
• 5.2.3 細胞內 ROS 水平檢測43
• 5.2.4 Western Blotting43
• 5.3 手性納米纖維對細胞行為的影響43-47
• 5.3.1 對腫瘤細胞遷移的影響43-44
• 5.3.2 對腫瘤細胞周期的影響44-46
• 5.3.3 對腫瘤細胞內 ROS 水平的影響46-47
• 5.3.4 對腫瘤細胞自噬效應的影響47
• 5.4 討論47-48
• 5.5 小結48-49
• 第六章 總結和展望49-50
• 6.1 總結49
• 6.2 展望49-50
• 參考文獻50-56
• 作者簡介和科研成果56-57
• 致謝57

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王哲;李秀艷;王嬌娜;李從舉;;激光熔體靜電紡絲法制備PLA/EVOH復合纖維[J];材料導報;2013年10期

2 丁義純;謝成宸;朱健;朱永梅;彭信文;侯豪情;;靜電紡絲法制備低滲流閾值聚酰亞胺/炭黑導電復合材料[J];高分子材料科學與工程;2013年09期

3 Maryam Bazhban;Mahdi Nouri;Javad Mokhtari;;ELECTROSPINNING OF CYCLODEXTRIN FUNCTIONALIZED CHITOSAN/PVA NANOFIBERS AS A DRUG DELIVERY SYSTEM[J];Chinese Journal of Polymer Science;2013年10期

4 趙亮;徐艷麗;何孟;李敏;陳雨晴;;雙層蛛絲蛋白血管支架的體外降解研究[J];功能材料;2013年18期

5 趙楚楚;田龍;潘志娟;;提高靜電紡納米纖維力學性能的方法[J];產業(yè)用紡織品;2013年11期

6 李娟;羅以勤;;血小板在惡性腫瘤中的作用[J];國際檢驗醫(yī)學雜志;2013年20期

7 蒲叢叢;何建新;崔世忠;高衛(wèi)東;;電場對雙噴頭噴氣靜電紡納米纖維成形的影響[J];材料導報;2013年14期

8 米宏偉;吳雙泉;朱培洋;劉劍洪;;鋰離子電池硅-碳負極材料的研究進展[J];材料導報;2013年17期

9 李婷婷;張志明;;磷鉬酸/PMMA靜電紡絲纖維的制備及形貌研究[J];高分子通報;2014年04期

10 趙立;吳強;韓若冰;吳江;姚偉峰;;納米碳纖維及其應用的研究進展[J];材料導報;2013年21期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 姜潛遠;馬凱凱;蔣之銘;任學宏;黃東時;;二苯基甲烷二異氰酸酯交聯(lián)抗菌納米醋酯纖維的制備[A];第九屆中國抗菌產業(yè)發(fā)展大會論文集[C];2013年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳銳;靜電紡制備膠原蛋白/聚氨酯心臟瓣膜組織工程支架材料的研究[D];東華大學;2010年

2 曹希亮;垂體腫瘤轉化基因1在雄激素非依賴性前列腺癌發(fā)生過程中作用的初步研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2013年

3 高國棟;納米二氧化鈦暴露致小鼠生殖毒性及其基因表達的變化[D];蘇州大學;2013年

4 邱薇薇;功能聚合物光纖器件研究[D];中國科學技術大學;2013年

5 朱江;乳腺癌中TES基因的功能分析及其與預后關系的研究[D];山東大學;2013年

6 杜凡凡;含多面齊聚倍半硅氧烷的熒光聚合物的設計、合成與應用[D];中國科學技術大學;2013年

7 段曉品;刺激響應性聚合物膠束在抗腫瘤轉移及逆轉腫瘤耐藥中的應用[D];沈陽藥科大學;2013年

8 楊磊;應用分泌蛋白質組技術研究肝細胞癌患者血液蛋白標志物[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

9 李琳;1、多灶肺癌的基因組學研究2、EMP2基因在非小細胞肺癌腫瘤轉移中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

10 邵俊東;聚乳酸納米纖維支架的構建與改性及其納米力學性能研究[D];華南理工大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉君毅;SF-PLGA共混納米纖維的制備及在神經(jīng)修復中的應用[D];東華大學;2011年

2 陳峰;P（LLA-CL）復合納米纖維的制備、表征及在生物醫(yī)學領域的應用[D];東華大學;2008年

3 孫斌;芯/殼結構超細纖維及其用作傷口敷料的研究[D];天津大學;2007年

4 邱立軍;P（LLA-CL）電紡纖維的制備、表征及在小血管組織工程中的應用[D];東華大學;2009年

5 劉曉鋒;PEA納米纖維的制備與表征、改性及生物相容性研究[D];東華大學;2009年

6 曹西亮;紫外光誘導玻璃表面功能化技術的研究[D];北京化工大學;2013年

7 魏志陽;兩類納米材料的制備及其在能量轉化中的應用[D];蘭州大學;2013年

8 傅廣港;靜電紡絲法構建碳系導電網(wǎng)絡骨架及其超級電容器性能[D];西南交通大學;2013年

9 趙靜;新型兩親性藥物載體的合成及表征[D];鄭州大學;2013年

10 趙玉明;加鹽提高PVA靜電紡絲纖維膜性能及利用PVA對聚酯纖維膜進行改性[D];北京化工大學;2013年

  本文關鍵詞：手性納米纖維的冠狀蛋白和細胞學效應研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：295839