發(fā)布時間：2017-03-24 01:04

  本文關(guān)鍵詞：DEHP對大鼠孕酮合成及StAR、P450scc基因表達影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-2-ethylhexyl phthalate, DEHP)的暴露對青春期雌性大鼠孕酮分泌水平的影響，以及對孕酮合成的限速步驟——類固醇急性調(diào)節(jié)蛋白（StAR）、膽固醇側(cè)鏈裂解酶（P450scc）的基因表達的影響。通過對青春期雌性大鼠短期染毒，對參與激素合成有關(guān)基因的表達水平進行分析，初步探討DEHP對雌性生殖毒性的可能機制。預(yù)期結(jié)果將為DEHP的生殖內(nèi)分泌干擾研究提供基礎(chǔ)資料，為闡明環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的生殖內(nèi)分泌干擾機制及其危害防治研究提供重要的科學(xué)依據(jù)。 方法 1、取青春期的雌性SD大鼠32只，隨機分到對照組和DEHP（低、中、高）三個實驗組中，四個劑量組每組8只。按10mg/kg/d、100mg/kg/d和1000mg/kg/dDEHP分別對各實驗組大鼠進行灌胃，并用溶劑(玉米油)作為對照為對照組進行灌胃。 2、連續(xù)灌胃10天，采集大鼠的血液，分離血清，測定孕酮含量；取大鼠卵巢組織提取總mRNA，逆轉(zhuǎn)錄PCR（Reverse Transcription Polymerase ChainReaction，RT-PCR）分析測定StAR和P450scc基因表達水平。 3、應(yīng)用Excel錄入數(shù)據(jù)，統(tǒng)計學(xué)分析使用SPSS19.0進行，以α=0.05的檢驗標(biāo)準(zhǔn)，判斷差異是否具有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1、模型效果 鄰苯二甲酸單乙基己基酯(Mono-2-ethylhexyl phthalate，MEHP)是DEHP的初級代謝產(chǎn)物，大鼠血清中MEHP含量隨著染毒劑量增加呈上升趨勢，說明動物染毒成功。 2、大鼠體重和卵巢重量變化 隨著染毒時間延長，各組大鼠體重均增加；隨著染毒劑量的增高，體重增加量有減小趨勢。隨著染毒劑量的增加雙側(cè)卵巢重量逐漸減小，高劑量組（1000mg/kg）與其他三組比較，卵巢重量減少有統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05）。 3、血清中孕酮的檢測結(jié)果 低劑量組（10mg/kg）比對照組（0mg/kg）和中劑量組（100mg/kg）的血清孕酮水平略高，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義；高劑量組（1000mg/kg）血清孕酮水平明顯高于其他三組（P0.01）。 4、各劑量組大鼠StAR mRNA、P450scc mRNA的相對表達量 隨著染毒劑量的增加，StAR mRNA和P450scc mRNA表達量降低，中劑量組（100mg/kg）和高劑量組（1000mg/kg）與對照組比較，StAR和P450scc的表達量有顯著減少（P0.05）。 結(jié)論 1、DEHP可能影響青春期大鼠卵巢的發(fā)育。 2、高劑量DEHP暴露可能增加血清孕酮水平。 3、DEHP體內(nèi)暴露可能降低StAR mRNA和P450scc mRNA的轉(zhuǎn)錄水平。
【關(guān)鍵詞】：鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 StAR P450scc 孕酮
【學(xué)位授予單位】：武漢科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R114
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 目錄9-11
• 第1章 前言11-15
• 1.1 理化特性11-12
• 1.2 研究現(xiàn)狀12-13
• 1.3 研究目的13-15
• 第2章 材料、對象和方法15-25
• 2.1 材料15-18
• 2.1.1 主要儀器15-16
• 2.1.2 主要試劑16-17
• 2.1.3 試劑的配置17-18
• 2.2 實驗對象18
• 2.3 研究方法與步驟18-24
• 2.3.1 分組18-19
• 2.3.2 取材19
• 2.3.3 RT-PCR19-22
• 2.3.4 孕酮濃度測定22
• 2.3.5 血清中 DEHP 代謝產(chǎn)物 MEHP 的測定22-24
• 2.4 數(shù)據(jù)分析24-25
• 第3章 結(jié)果25-30
• 3.1 模型效果25
• 3.2 大鼠體重變化25-26
• 3.3 各組大鼠卵巢重量26-27
• 3.4 大鼠孕酮含量27
• 3.5 各劑量組大鼠 StAR、P450scc mRNA 的相對表達量27-30
• 第4章 討論30-34
• 4.1 模型效果30
• 4.2 DEHP 對大鼠體重和卵巢重量的影響30
• 4.3 DEHP 對激素分泌的影響30-32
• 4.4 DEHP 對 StAR 和 P450scc 基因表達水平的影響32
• 4.5 小結(jié)32-34
• 致謝34-35
• 參考文獻35-38
• 綜述38-48
• 參考文獻43-48
• 附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文48-49
• 附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項目49

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前9條

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  本文關(guān)鍵詞：DEHP對大鼠孕酮合成及StAR、P450scc基因表達影響的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：264844