本文關鍵詞：DNA損傷修復基因8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷酶OGG1調節(jié)斑馬魚胚胎腦、心臟發(fā)育的易損性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一節(jié)DNA損傷修復基因ogg1調節(jié)腦發(fā)育易損性研究腦發(fā)育過程易受到氧化應激而引起損傷,增加先天性腦發(fā)育異常的風險。針對氧化應激所致的損傷,機體主要有三種修復方式:1)直接修復;2)堿基切除修復;3)核苷酸切除,其中,DNA修復酶OGG1啟動高度保守的堿基切除修復通路是修復氧化性DNA損傷的最主要途徑。然而,OGG1基因在腦發(fā)育中的功能及其對神經(jīng)干細胞的調控機制仍未明確。本研究采用斑馬魚受精卵及發(fā)育至5天的幼魚為模型,對ogg1基因的表達情況進行可視化研究及基因調控功能分析。應用原位雜交方法,我們發(fā)現(xiàn)ogg1在出生后17小時-48小時的胚胎腦組織中高表達,尤其是在中腦區(qū)。應用嗎啉代技術,在受精卵單細胞期行ogg1基因敲除,導致胚胎腦部發(fā)育缺陷、腦室狹窄、神經(jīng)細胞排列紊亂、中-后腦邊界毀損以及平衡和運動能力異常等。這些功能障礙可通過補充外源ogg1 m RNA部分挽救。應用丫啶橙染色、Brdu免疫熒光染色等方法,發(fā)現(xiàn)參與ogg1缺失所致的腦缺陷的細胞和分子事件包括:1)凋亡增加;2)增殖減少;3)神經(jīng)軸突分布和延伸異常�；蛐酒治霭l(fā)現(xiàn),ogg1缺失導致細胞周期、凋亡、神經(jīng)發(fā)生等通路的基因表達發(fā)生顯著改變,構成了ogg1應答信號調控網(wǎng)絡。尤為重要的是,cmyb是ogg1缺失所致的DNA損傷應答的關鍵下游基因。綜上,ogg1在腦的發(fā)育中發(fā)揮著保護性作用,該發(fā)現(xiàn)有助于探討ogg1不足所致的腦發(fā)育易損性的病因學基礎,或可為神經(jīng)發(fā)育異常的治療提供新的策略。第二節(jié)DNA損傷修復基因ogg1保護心臟祖細胞功能的研究DNA損傷所致的基因組損傷可影響祖細胞分化,進而損害器官形成過程,導致先天性疾病的發(fā)生。我們發(fā)現(xiàn)堿基切除修復通路的關鍵酶Ogg1在斑馬魚16體節(jié)期至出生后60小時的心臟富集,但其在心臟發(fā)生過程的作用目前仍不明確。因此,我們利用斑馬魚模型揭示ogg1基因在胚胎心臟發(fā)育中的作用。原位雜交發(fā)現(xiàn)ogg1主要表達在斑馬魚胚胎(16體節(jié)期)前側板中胚層、原始心管、以及之后的心肌細胞中。應用嗎啉代技術敲減ogg1基因,應用Tg(myl7::Ds Red2-nuc)、Tg(nkx2.5::EYFP)、Tg(myl7::EGFP)轉基因魚系,系統(tǒng)觀察了心臟的形態(tài)、搏動節(jié)律、心肌細胞計數(shù),并運用Brdu免疫熒光染色和p53-/-(p53M214K)轉基因魚系分析增殖與凋亡,發(fā)現(xiàn):ogg1缺失,導致嚴重的心臟結構和功能損傷,包括:心臟長度縮短、心律不齊、心肌細胞以及nkx2.5+心臟祖細胞數(shù)量減少。Ogg1缺失所致的心臟祖細胞凋亡增加和增殖減少,可以部分解釋上述由ogg1缺失所致的心臟表型。基因芯片結果提示,ogg1缺失后,參與胚胎心管形態(tài)和心臟結構的基因表達顯著改變。值得關注的是,foxh1是ogg1在心臟發(fā)育過程中對DNA損傷應答的重要下游基因。因此,本研究也提示了ogg1基因在斑馬魚胚胎心臟祖細胞和心臟發(fā)育中的作用及機制,這些發(fā)現(xiàn)有助于對先天性心臟病發(fā)病機制的理解。
【關鍵詞】：DNA損傷修復 ogg1 斑馬魚 腦發(fā)育 心臟發(fā)育
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R114
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 第一節(jié) DNA損傷修復基因ogg1調節(jié)腦發(fā)育易損性研究8-33
• 前言8-10
• 材料與方法10-20
• 結果20-29
• 分析和討論29-32
• 小結32-33
• 第二節(jié) DNA損傷修復基因ogg1保護心臟祖細胞功能的研究33-47
• 前言33-34
• 材料與方法34-37
• 結果37-43
• 分析與討論43-46
• 小結46-47
• 參考文獻47-54
• 綜述54-68
• 綜述一54-63
• 參考文獻58-63
• 綜述二63-68
• 附錄一 主要縮略詞英中文對照（按字母順利排序）68-69
• 附錄二 主要創(chuàng)新點及其意義69-70
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況70-72
• 項目與專利72
• 獲獎情況72-73
• 致謝73

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1 劉巍峰;于珊珊;陳冠軍;李越中;;DNA損傷檢驗點與損傷修復及基因組穩(wěn)定性(英文)[J];遺傳學報;2006年05期

2 盧景琛;楊力芳;陶永光;孫侖泉;曹亞;;表皮生長因子受體在DNA損傷修復中的作用機制新進展[J];科學通報;2011年25期

3 何曉波;景亞青;李克秋;趙玉霞;楊彩紅;楊巧云;邱興華;李光;;持久性有機污染物暴露人群DNA損傷修復基因表達的研究[J];環(huán)境與健康雜志;2014年01期

4 范忠義;徐小潔;杜楠;葉棋濃;;調控DNA損傷修復基因的微小RNA[J];生物技術通訊;2011年03期

5 趙欣楠;魏敏杰;趙琳;;DNA損傷修復調控因子與腫瘤耐藥的研究進展[J];現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學;2013年11期

6 徐廣潤,張?zhí)K明;DNA損傷修復與缺血神經(jīng)元死亡[J];國外醫(yī)學.神經(jīng)病學神經(jīng)外科學分冊;2001年03期

7 朱守民;DNA損傷修復基因與遺傳易感性[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學;2003年01期

8 鄭長青;季守平;章?lián)P培;;DNA損傷修復與腫瘤烷化劑化療[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;2009年01期

9 沈杰;儲冀汝;賈元威;劉曉平;;干擾survivin表達減少腫瘤細胞對紫外線誘導DNA損傷的修復作用[J];中國臨床藥理學與治療學;2014年05期

10 林莉;劉曉晴;宋三泰;;DNA損傷修復與鉑類耐藥研究進展[J];中國腫瘤;2006年01期

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1 王思力;趙輝;鄒堯;韓忠朝;;DNA損傷修復基因多態(tài)性與兒童急性淋巴細胞白血病的研究[A];中華醫(yī)學會第八次全國血液學學術會議論文匯編[C];2004年

2 賴延東;陳麗萍;唐石伏;林育純;李道傳;肖勇梅;王慶;張波;魏青;陳雯;;PP2A調控組蛋白H2AX介導的DNA損傷修復[A];中國毒理學會第五次全國學術大會論文集[C];2009年

3 段建明;張宗玉;童坦君;;過氧化氫對DNA損傷修復相關基因與細胞衰老的誘導作用[A];中國生物化學與分子生物學會第八屆會員代表大會暨全國學術會議論文摘要集[C];2001年

4 孫慧;黃東雅;;腦梗死/再灌注后線粒體氧化DNA損傷修復的特點[A];第十一屆全國神經(jīng)病學學術會議論文匯編[C];2008年

5 于宏杰;付朝偉;徐飚;石國政;;DNA損傷修復基因MGMT在腫瘤發(fā)生與預后中的作用[A];華東地區(qū)第十次流行病學學術會議暨華東地區(qū)流行病學學術會議20周年慶典論文集[C];2010年

6 杜曉剛;華加寧;陳清鳳;魯?shù)聫?許正平;曾群力;;工頻磁場對人晶狀體上皮細胞DNA損傷修復的影響及噪聲磁場干預[A];第二屆中國醫(yī)學細胞生物學學術大會暨細胞生物學教學改革會議論文集[C];2008年

7 曹流;;DNA損傷修復反應與細胞穩(wěn)態(tài)在腫瘤及衰老發(fā)生發(fā)展中的作用[A];第二屆模式生物與人類健康研討會會議論文集[C];2012年

8 曹流;陳譽華;鄧初夏;;DNA損傷修復反應的陰陽平衡與細胞穩(wěn)態(tài)在衰老及腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用[A];“細胞活動 生命活力”——中國細胞生物學學會全體會員代表大會暨第十二次學術大會論文摘要集[C];2011年

9 陳麗萍;賴延東;朱小年;肖勇梅;張波;王慶;陳雯;;PP2A B56亞基調控DNA損傷修復的作用研究[A];全國生化/工業(yè)與衛(wèi)生毒理學學術會議論文集[C];2010年

10 潘志文;付志璇;曹文明;宋倩;徐笑紅;;DNA損傷修復基因XPA、XPC、XPD和ERCC1單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌易感性的相關性研究[A];中國腫瘤內科進展 中國腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

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2 劉曉琳;DNA損傷修復相關基因MDC1和YAP1在卵巢癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機制研究[D];山東大學;2015年

3 張靜;DNA損傷修復基因多態(tài)與苯作業(yè)工人遺傳損傷易感性關系的研究[D];新疆醫(yī)科大學;2012年

4 王營營;Ts65Dn小鼠造血干細胞對輻射誘導DNA損傷修復障礙研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2014年

5 蘇洪英;DNA損傷修復基因XPD、XRCC1單核苷酸多態(tài)與肝細胞癌遺傳易感性關系的研究[D];中國醫(yī)科大學;2008年

6 吳文婷;DNA損傷修復基因多態(tài)性與肺癌的遺傳易感性及藥物基因組學研究[D];復旦大學;2010年

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2 袁德曉;DNA損傷修復在輻射適應性反應中的作用及其分子機制研究[D];復旦大學;2009年

3 樊龍剛;基于雙熒光素酶報告基因檢測環(huán)境致癌物DNA損傷修復作用[D];河北醫(yī)科大學;2013年

4 李明娟;DNA損傷修復相關蛋白基因表達與輻射劑量關系研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

5 秦夏;P53在輻射致DNA損傷反應中的染色質重塑功能研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2011年

6 王超;氧化應激性DNA損傷精子體外受精后早期胚胎發(fā)育以及細胞周期檢查點的研究[D];汕頭大學;2011年

7 陶佳海;核編碼蛋白參與線粒體定位及DNA損傷修復的作用研究[D];中國科學院北京基因組研究所;2013年

8 曹麗麗;高、低劑量率γ線照射對哺乳類細胞生長存活及DNA損傷修復的影響[D];蘇州大學;2011年

9 邵艷敏;APE對大鼠局灶性腦缺血后遠隔部位DNA損傷修復的影響[D];中南大學;2013年

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本文編號：262261