【摘要】：目的:探討N-乙酰半胱氨酸(NAC)對納米二氧化硅(SiO2)顆粒導致細胞中活性氧(ROS)水平升高的抑制作用,闡明納米SiO2顆粒致細胞毒性的機制。方法:選用粒徑為68nm的納米SiO2顆粒,以體外培養(yǎng)的人正常肝細胞(L-02)為模型,分為對照組和不同濃度(1、2、5、10mmol·L-1)NAC預處理組、不同濃度(10、20、50、100mg·L-1)納米SiO2顆粒暴露組和NAC預處理的納米SiO2顆粒暴露組。采用MTT法測定不同濃度NAC預處理后的細胞存活率以及不同濃度NAC預處理后暴露于納米SiO2顆粒的細胞存活率;倒置顯微鏡觀察NAC預處理后暴露于納米SiO2顆粒的細胞形態(tài);熒光酶標儀檢測NAC預處理后暴露于不同濃度納米SiO2顆粒的細胞中ROS水平。結(jié)果:NAC預處理組細胞存活率均高于對照組,在5mmol·L-1濃度時達到峰值,但與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);不同濃度NAC能使暴露于納米SiO2顆粒的細胞存活率升高,以5mmol·L-1 NAC的作用最明顯(P0.05);與納米SiO2顆粒暴露組比較,NAC預處理的納米SiO2顆粒暴露組細胞數(shù)目增多,細胞邊界較明顯;隨納米SiO2顆粒濃度的升高,細胞中ROS水平隨之升高,呈現(xiàn)劑量依賴效應,在50和100mg·L-1濃度時與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與相同濃度納米SiO2顆粒暴露組比較,NAC預處理的納米SiO2顆粒暴露組細胞中ROS水平降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:NAC在一定程度上能夠抑制納米SiO2顆粒所致的細胞存活率下降和細胞中ROS水平升高,細胞中ROS水平升高是納米SiO2顆粒導致人正常肝細胞毒性的作用機制之一。
[Abstract]:Aim: to investigate the inhibitory effect of N-acetylcysteine (NAC) on the level of reactive oxygen species (Ros) (ROS) in cells induced by nano-silica (SiO2) particles, and to elucidate the mechanism of cytotoxicity induced by nano-sized SiO2 particles. Methods: normal human hepatocytes (L-02) were randomly divided into three groups: control group and NAC pretreatment group with different concentrations (1 / 20, 50 mg / L, 100 mg / L) and NAC pretreatment group, respectively. The survival rate of cells pretreated with different concentrations of NAC and the survival rate of cells exposed to nano-SiO2 particles after pretreatment with different concentrations of NAC were measured by MTT method, and the morphology of cells exposed to nano-SiO2 particles after pretreatment with NAC was observed by inverted microscope. The level of ROS in cells exposed to different concentrations of SiO2 nanoparticles after pretreatment with NAC was detected by fluorescence enzyme labeling. Results the cell survival rate of the pretreatment group was higher than that of the control group, and reached the peak at the concentration of 5mmol L-1, but there was no significant difference compared with the control group (P0.05). Different concentrations of NAC could increase the cell survival rate of the cells exposed to the nanoparticles of SiO2. The effect of 5mmol L-1 NAC was the most obvious (P0.05); compared with the NAC-treated group, the number of cells increased and the cell boundary was more obvious in NAC-pretreated group, and the level of ROS in the cells increased with the increase of the concentration of SiO2 nanoparticles. There was a dose-dependent effect, there was significant difference between 50 and 100mg L-1 concentrations compared with the control group (P0.05); compared with the same concentration of nano-NAC-treated SiO2 particles exposure group, the ROS level in the cells of NAC-pretreatment group was significantly lower than that of the control group (P0.05). Conclusion to some extent, SiO2 can inhibit the decrease of cell survival rate and the increase of ROS level induced by nano-NAC particles. The increase of ROS level in cells is one of the mechanisms of the cytotoxicity induced by nano-NAC particles in human normal hepatocytes.
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院衛(wèi)生毒理與衛(wèi)生化學學系;首都醫(yī)科大學環(huán)境毒理學北京市重點實驗室;首都醫(yī)科大學附屬北京友誼醫(yī)院北京熱帶醫(yī)學研究所;
【基金】：國家自然科學基金資助課題(81172704)
【分類號】：R114

【參考文獻】

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本文編號：2148552