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鋁致LTP損傷過程中NL1和谷氨酸受體的蛋白間相互作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-26 13:50

  本文選題:麥芽酚鋁 + 長時(shí)程增強(qiáng); 參考:《山西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:觀察亞慢性鋁暴露可能通過改變NL1與NX、NR1、NR2A、NR2B和m Glu R1蛋白間相互作用導(dǎo)致LTP改變,完善鋁致LTP改變的生物學(xué)機(jī)制。方法:動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究:(1)180只雄性SD大鼠,分別染毒1、2、3個(gè)月,共計(jì)3批,每一批60只,按體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組、生理鹽水對(duì)照組和1.62mg/kg Al(mal)3組、0.81mg/kg Al(mal)3組、0.41mg/kg Al(mal)3組3個(gè)麥芽酚鋁暴露組,每個(gè)劑量組12只,除空白對(duì)照組大鼠外隔天經(jīng)腹腔注射建立鋁染毒亞慢性模型;(2)電生理學(xué)方法檢測(cè)大鼠海馬CA1區(qū)在體海馬LTP幅值;(3)石墨爐原子吸收法測(cè)定大鼠海馬腦鋁水平;(4)免疫共沉淀法和Western-blot法測(cè)定與NL1結(jié)合的NX、NR1、NR2A、NR2B、m Glu R1蛋白表達(dá)量。結(jié)果:1、大鼠海馬腦鋁結(jié)果:對(duì)大鼠腦鋁水平進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,2個(gè)月和3個(gè)月組腦鋁內(nèi)暴露水平明顯上升(P0.05),與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg組、0.81mg/kg組和1.62mg/kg組腦鋁水平均明顯升高(P0.05),1.62mg/kg組腦鋁水平與0.41mg/kg組和0.81mg/kg組相比均顯著增加(P0.05)。2、鋁暴露對(duì)大鼠海馬在體LTP的影響:(1)LTP結(jié)果在鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析結(jié)果:結(jié)果顯示與空白對(duì)照組相比,生理鹽水對(duì)照組、0.41mg/kg組、0.81mg/kg組和1.62mg/kg組LTP均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組LTP幅值與0.41mg/kg組、0.81mg/kg組及生理鹽水對(duì)照組相比均顯著下降(P0.05)。(2)各個(gè)鋁暴露時(shí)間組LTP多因素重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果:對(duì)鋁暴露1個(gè)月組、2個(gè)月組和3個(gè)月組LTP在各暴露組結(jié)果分別進(jìn)行多因素重復(fù)測(cè)量方差分析,結(jié)果顯示與空白對(duì)照組相比,生理鹽水對(duì)照組、0.81mg/kg組和1.62mg/kg組LTP在3個(gè)鋁暴露時(shí)間組均明顯降低(P0.05)。3、大鼠海馬中NL1蛋白表達(dá)量測(cè)定:對(duì)大鼠海馬中NL1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NL1蛋白表達(dá)量均明顯降低(P0.05),但是1.62mg/kg、0.81mg/kg和0.41mg/kg組間兩兩比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別(P0.05)。4、與NL1抗體結(jié)合的NX蛋白表達(dá)量測(cè)定:對(duì)與NL1抗體結(jié)合的NX蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,2個(gè)月和3個(gè)月組NX蛋白結(jié)合量均明顯減少(P0.05);與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NX蛋白結(jié)合量均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組NX蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg組相比顯著下降(P0.05)。5、與NL1抗體結(jié)合的谷氨酸受體表達(dá)量測(cè)定:(1)NR1蛋白結(jié)合量測(cè)定:對(duì)與NL1抗體結(jié)合的NR1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,2個(gè)月組和3個(gè)月組NR1蛋白結(jié)合量均明顯減少(P0.05);與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NR1蛋白結(jié)合量均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組NR1蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P0.05)。(2)NR2A蛋白結(jié)合量測(cè)定:對(duì)與NL1抗體結(jié)合的NR2A蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,2個(gè)月和3個(gè)月組NR2A蛋白結(jié)合量均明顯減少(P0.05);與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NR2A蛋白結(jié)合量均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組NR2A蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P0.05)。(3)NR2B蛋白結(jié)合量測(cè)定:對(duì)與NL1抗體結(jié)合的NR2B蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,2個(gè)月組和3個(gè)月組NR2B蛋白結(jié)合量均明顯減少(P0.05);與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組NR2B蛋白結(jié)合量均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組NR2B蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P0.05)。(4)m Glu R1蛋白結(jié)合量測(cè)定:對(duì)與NL1抗體結(jié)合的m Glu R1蛋白表達(dá)量進(jìn)行鋁暴露時(shí)間與劑量的析因方差分析,結(jié)果顯示與鋁暴露1個(gè)月組相比,3個(gè)月組m Glu R1蛋白結(jié)合量明顯減少(P0.05);與空白對(duì)照組和生理鹽水對(duì)照組相比,0.41mg/kg、0.81mg/kg和1.62mg/kg組m Glu R1蛋白結(jié)合量均明顯降低(P0.05),1.62mg/kg組m Glu R1蛋白結(jié)合量與0.41mg/kg和0.81mg/kg組相比顯著下降(P0.05)。結(jié)論:1、亞慢性腹腔注射鋁暴露使大鼠海馬CA1區(qū)在體LTP降低,且LTP幅值隨著鋁暴露時(shí)間延長和劑量增大而降低。2、鋁暴露大鼠海馬中與NL1結(jié)合的NX減少,提示鋁可能通過破壞兩者正常連接而影響NL1正常生物學(xué)功能。3、鋁暴露大鼠海馬中與NL1結(jié)合的NMDAR和m Glu R減少,提示鋁可能破壞蛋白間相互作用。提示鋁可能通過NL1影響NMDAR與m Glu R相互調(diào)節(jié)作用。本課題為國家自然科學(xué)基金“神經(jīng)細(xì)胞程序性壞死和突觸可塑性改變?cè)诼殬I(yè)鋁暴露引起認(rèn)知功能障礙中的作用機(jī)制研究(編號(hào):81430078)”。
[Abstract]:Objective : To observe the effect of aluminum exposure on LTP in hippocampus of rats . The results showed that : ( 1 ) The level of brain aluminum in hippocampus CA1 of rats was significantly higher than that in control group ( P0.05 ) . The expression of NL1 protein in hippocampus of rats was significantly lower than that in control group ( P0.05 ) . The expression of Glu - R1 protein in the hippocampus of rats was significantly lower than that in the control group ( P0.05 ) . The results showed that the combination of NMDAR and mGlu R in hippocampus of rats exposed to aluminum exposure decreased significantly ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R114

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2070587

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