本文關(guān)鍵詞：金納米殼修飾磁性溫敏脂質(zhì)體的制備及初步應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 磁性溫敏脂質(zhì)體 金納米殼 射頻控釋 MR/X-ray成像

【摘要】：為改善腫瘤化療藥物缺乏靶向性、毒副作用大的缺點(diǎn),課題選用具有良好生物安全性的脂質(zhì)體作為藥物載體,結(jié)合磁性納米材料及金納米材料的特性,構(gòu)建了金納米殼修飾的磁性溫敏脂質(zhì)體(DOX-TSMLs-AuNSs-PEG)給藥系統(tǒng),并對(duì)其治療及診斷能力進(jìn)行了研究,主要內(nèi)容包括:1、DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的制備及表征。實(shí)驗(yàn)采用化學(xué)共沉淀法制備水溶性、小粒徑磁性納米粒子(MNPs)并對(duì)其進(jìn)行表征;以逆向蒸發(fā)法制備包裹MNPs及模型藥物鹽酸阿霉素(DOX?HCl)的磁性溫敏脂質(zhì)體(DOX-TSMLs),然后在DOX-TSMLs的表面包裹金納米殼(AuNSs)并使用SH-PEG2000對(duì)其進(jìn)行修飾,最終構(gòu)建出目標(biāo)給藥系統(tǒng)DOX-TSMLs-AuNSs-PEG。采用共沉淀法制備的MNPs表現(xiàn)出良好的水溶性、分散性及超順磁性,為粒徑在12~15 nm的球形納米粒子。脂質(zhì)體進(jìn)行處方優(yōu)化后最終制備出的DOX-TSMLs-AuNSs-PEG粒徑大小為208.3±1.3 nm,呈現(xiàn)較均一的球狀形態(tài),MNPs包裹在脂質(zhì)體的內(nèi)部,AuNSs包覆在脂質(zhì)體的外表面,DOX包封率為51.4±0.6%,Fe濃度為7.5 mM,具有較強(qiáng)的磁響應(yīng)性。DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在射頻RF作用下具有較好的產(chǎn)熱性能,體外藥物釋放結(jié)果顯示,DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在生理狀態(tài)下具有良好的穩(wěn)定性,射頻(RF)作用10 min后,其累計(jì)釋放量即可達(dá)到近65%,表現(xiàn)出顯著的射頻控釋性能。體外磁共振成像(MRI)和X射線(X-ray)成像結(jié)果顯示,DOX-TSMLs-AuNSs-PEG可使T2場(chǎng)MRI信號(hào)顯著降低,CT信號(hào)顯著增強(qiáng),具有較好的體外雙成像能力。2、DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體外抗腫瘤活性研究。以人肝癌細(xì)胞HepG2為細(xì)胞模型,對(duì)DOX-TSMLs-AuNSs-PEG進(jìn)行細(xì)胞學(xué)研究,結(jié)果顯示脂質(zhì)體藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)具有較高的安全性,對(duì)HepG2細(xì)胞幾乎無毒性作用;DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在2 h內(nèi)即可轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞,當(dāng)給予外加磁場(chǎng)時(shí),脂質(zhì)體能夠更顯著的在細(xì)胞內(nèi)分布,RF作用下藥物快速釋放到達(dá)細(xì)胞核產(chǎn)生殺傷作用,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。外加磁場(chǎng)、RF熱療與DOX化療作用相結(jié)合對(duì)HepG2細(xì)胞的增殖產(chǎn)生顯著的抑制作用。3、DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體內(nèi)抗腫瘤活性研究。以S180荷瘤小鼠為動(dòng)物模型,考察了DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在小鼠體內(nèi)的藥物代謝動(dòng)力學(xué),組織分布特征及對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)抑制的藥效學(xué)作用。藥物代謝動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示,DOX包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部之后其在小鼠體內(nèi)停留的時(shí)間延長(zhǎng),消除速度減慢,具有一定的緩釋效果;組織分布結(jié)果顯示DOX-TSMLs-AuNSs-PEG可有效降低DOX在心臟及腎臟中的分布,增加在腫瘤部位的聚集,外加磁場(chǎng)作用下其在腫瘤部位的分布更為明顯,顯示出良好的磁靶向性;藥效學(xué)結(jié)果表明,DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在外加磁場(chǎng)與射頻RF作用下能夠顯著抑制腫瘤的生長(zhǎng)速度,并對(duì)小鼠正常組織器官無明顯損傷,有效地降低了單用DOX時(shí)的心、腎毒性,提高了藥物的治療指數(shù)。體內(nèi)MR和X-ray成像結(jié)果顯示,DOX-TSMLs-AuNSs-PEG具有良好的MR/X-ray成像性能,有望應(yīng)用于腫瘤的診斷。綜合以上研究結(jié)果,本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建出一種安全有效可控釋的腫瘤靶向治療與診斷一體的給藥系統(tǒng)。為探索新型抗腫瘤給藥系統(tǒng)提供了參考。
【關(guān)鍵詞】：磁性溫敏脂質(zhì)體 金納米殼 射頻控釋 MR/X-ray成像
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R943;R965
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-17
• 英文縮略詞表17-18
• 第一章 前言18-21
• 第二章 金納米殼修飾的磁性溫敏脂質(zhì)體的制備21-55
• 1 實(shí)驗(yàn)材料21-22
• 1.1 儀器21
• 1.2 試劑21-22
• 2 實(shí)驗(yàn)方法22-31
• 2.1 鐵（Fe）含量測(cè)定方法的建立22-23
• 2.1.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的確定22-23
• 2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立23
• 2.1.3 準(zhǔn)確度23
• 2.1.4 精密度23
• 2.1.5 脂質(zhì)體中鐵含量的測(cè)定23
• 2.2 阿霉素（DOX）含量紫外可見分光光度測(cè)定方法的建立23-24
• 2.2.1 DOX檢測(cè)波長(zhǎng)的確定23-24
• 2.2.2 專屬性24
• 2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立24
• 2.2.4 準(zhǔn)確度24
• 2.2.5 精密度24
• 2.3 阿霉素（DOX）含量HPLC測(cè)定方法的建立24-26
• 2.3.1 DOX檢測(cè)波長(zhǎng)的確定24-25
• 2.3.2 色譜條件25
• 2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立25
• 2.3.4 準(zhǔn)確度25
• 2.3.5 精密度25-26
• 2.4 包封率的測(cè)定26
• 2.4.1 超濾法26
• 2.4.2 葡聚糖凝膠柱法26
• 2.4.3 透析法26
• 2.5 磁性納米粒子的制備26-27
• 2.6 磁性納米粒子的表征27
• 2.6.1 分散性與磁響應(yīng)性27
• 2.6.2 傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）27
• 2.6.3 X射線衍射（XRD）27
• 2.6.4 透射電鏡（TEM）及EDS元素分析27
• 2.7 磁性溫敏脂質(zhì)體的制備27-28
• 2.8 磁性溫敏脂質(zhì)體的處方篩選28
• 2.8.1 磷脂與膽固醇的比例28
• 2.8.2 孵育溫度28
• 2.8.3 孵育時(shí)間28
• 2.8.4 探超時(shí)間28
• 2.8.5 藥脂比28
• 2.8.6 MNPs的量28
• 2.9 磁性溫敏脂質(zhì)體表面金納米殼的制備28-29
• 2.9.1 HAuCl4與Vc量的選擇29
• 2.9.2 脂質(zhì)體中金含量的測(cè)定29
• 2.10 脂質(zhì)體的性質(zhì)考察29-31
• 2.10.1 穩(wěn)定性29
• 2.10.2 粒徑分布29
• 2.10.3 透射電鏡（TEM）及EDS元素分析29-30
• 2.10.4 X射線衍射（XRD）30
• 2.10.5 紫外可見全波長(zhǎng)掃描（UV-Vis）30
• 2.10.6 發(fā)熱性能30
• 2.10.7 磁學(xué)性質(zhì)30
• 2.10.8 體外釋藥行為考察30
• 2.10.9 MRI與X-ray成像能力30-31
• 3 結(jié)果與討論31-53
• 3.1 鐵（Fe）含量的測(cè)定方法31-33
• 3.1.1 鄰二氮菲-鐵配合物的檢測(cè)波長(zhǎng)31-32
• 3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線32
• 3.1.3 準(zhǔn)確度32
• 3.1.4 精密度32-33
• 3.2 阿霉素（DOX）含量紫外可見分光光度測(cè)定方法33-35
• 3.2.1 DOX的測(cè)定波長(zhǎng)33
• 3.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線33-34
• 3.2.3 準(zhǔn)確度34
• 3.2.4 精密度34-35
• 3.3 阿霉素（DOX）含量HPLC測(cè)定方法35-37
• 3.3.1 DOX的檢測(cè)波長(zhǎng)35
• 3.3.2 專屬性35-36
• 3.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線36
• 3.3.4 準(zhǔn)確度36-37
• 3.3.5 精密度37
• 3.4 包封率的測(cè)定方法37-38
• 3.4.1 超濾法37-38
• 3.4.2 葡聚糖凝膠柱法38
• 3.4.3 透析法38
• 3.5 磁性納米粒子的表征38-41
• 3.5.1 分散性與磁響應(yīng)性38-39
• 3.5.2 傅里葉變換紅外光譜（FT-IR）39-40
• 3.5.3 X射線衍射（XRD）40
• 3.5.4 透射電鏡（TEM）及EDS元素分析40-41
• 3.6 磁性溫敏脂質(zhì)體的處方篩選41-45
• 3.6.1 磷脂與膽固醇的比例41-42
• 3.6.2 孵育溫度42
• 3.6.3 孵育時(shí)間42-43
• 3.6.4 探超時(shí)間43
• 3.6.5 藥脂比43
• 3.6.6 MNPs的量43-44
• 3.6.7 磁性溫敏脂質(zhì)體的最優(yōu)處方44
• 3.6.8 HAuCl_4與Vc量的選擇44-45
• 3.7 脂質(zhì)體的性質(zhì)45-53
• 3.7.1 穩(wěn)定性45
• 3.7.2 粒徑分布45-46
• 3.7.3 透射電鏡（TEM）及EDS元素分析46-47
• 3.7.4 X射線衍射（XRD）47-48
• 3.7.5 紫外可見全波長(zhǎng)掃描（UV-Vis）48
• 3.7.6 發(fā)熱性能48-49
• 3.7.7 磁學(xué)性質(zhì)49-50
• 3.7.8 體外釋藥行為50-52
• 3.7.9 MRI與X-ray成像能力52-53
• 4 本章小結(jié)53-55
• 第三章 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體外抗腫瘤活性研究55-70
• 1 儀器與試劑55-57
• 1.1 儀器55
• 1.2 試劑55-56
• 1.3 主要溶液的配制56-57
• 1.3.1 PBS緩沖液56
• 1.3.2 完全培養(yǎng)基56
• 1.3.3 細(xì)胞凍存液56
• 1.3.4 50%的三氯乙酸56
• 1.3.5 1%的乙酸56
• 1.3.6 4%的SRB56
• 1.3.7 10 mmol/L Tris堿56-57
• 1.3.8 4%多聚甲醛固定液57
• 1.3.9 DAPI染液57
• 2 實(shí)驗(yàn)方法57-61
• 2.1 人肝癌細(xì)胞HepG2的培養(yǎng)57-58
• 2.1.1 細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備57
• 2.1.2 細(xì)胞復(fù)蘇57
• 2.1.3 細(xì)胞傳代57
• 2.1.4 細(xì)胞凍存57-58
• 2.2 空白脂質(zhì)體對(duì)HepG2存活率的影響58
• 2.3 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體外細(xì)胞攝取58-59
• 2.4 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在HepG2內(nèi)藥物的釋放59
• 2.5 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2存活率的影響59-60
• 2.6 外加磁場(chǎng)與RF作用下DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2存活率的影響60
• 2.7 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2凋亡狀況的影響60-61
• 2.7.1 熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡60
• 2.7.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡60-61
• 3 結(jié)果與討論61-69
• 3.1 空白脂質(zhì)體對(duì)HepG2存活率的影響61-62
• 3.2 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體外細(xì)胞攝取62-63
• 3.3 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在HepG2內(nèi)藥物的釋放63-64
• 3.4 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2存活率的影響64-65
• 3.5 外加磁場(chǎng)與RF作用下DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2存活率的影響65-66
• 3.6 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)HepG2凋亡狀況的影響66-69
• 3.6.1 熒光顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞凋亡66-67
• 3.6.2 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡67-69
• 4 本章小結(jié)69-70
• 第四章 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體內(nèi)抗腫瘤活性研究70-90
• 1 實(shí)驗(yàn)材料70-71
• 1.1 儀器70
• 1.2 試劑70-71
• 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物71
• 2 實(shí)驗(yàn)方法71-75
• 2.1 荷瘤小鼠模型的建立71
• 2.2 DOX含量測(cè)定方法的建立71-73
• 2.2.1 色譜條件71
• 2.2.2 生物樣品預(yù)處理方法71-72
• 2.2.2.1 血漿樣品預(yù)處理方法71-72
• 2.2.2.2 組織樣品預(yù)處理方法72
• 2.2.3 方法專屬性考察72
• 2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立72
• 2.2.5 回收率72-73
• 2.2.6 精密度73
• 2.3 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究73-74
• 2.4 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在小鼠體內(nèi)的組織分布研究74
• 2.5 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)抑制的藥效學(xué)研究74-75
• 2.5.1 腫瘤生長(zhǎng)抑制的藥效學(xué)考察74
• 2.5.2 HE染色病理切片74-75
• 2.6 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體內(nèi)成像能力考察75
• 2.6.1 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的MRI成像75
• 2.6.2 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的X-ray成像75
• 3 結(jié)果與討論75-88
• 3.1 藥物含量測(cè)定75-80
• 3.1.1 專屬性75-78
• 3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線78
• 3.1.3 回收率78-79
• 3.1.4 精密度79-80
• 3.2 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究80-82
• 3.3 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG在小鼠體內(nèi)的組織分布82-84
• 3.4 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG對(duì)小鼠腫瘤生長(zhǎng)抑制的藥效學(xué)研究84-88
• 3.4.1 腫瘤生長(zhǎng)抑制的藥效學(xué)考察84-86
• 3.4.2 HE染色病理切片86-88
• 3.5 DOX-TSMLs-AuNSs-PEG的體內(nèi)成像能力88
• 4 本章小結(jié)88-90
• 第五章 全文總結(jié)90-92
• 參考文獻(xiàn)92-98
• 個(gè)人簡(jiǎn)介98-99
• 致謝99

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 ;新信息(九條)[J];材料導(dǎo)報(bào);1992年05期

2 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 趙鵬;非局部壓電納米梁和殼中波的傳播分析[D];北京交通大學(xué);2016年

2 張潘潘;金納米殼修飾磁性溫敏脂質(zhì)體的制備及初步應(yīng)用[D];鄭州大學(xué);2016年

3 謝n，

本文編號(hào)：958125