本文關(guān)鍵詞：氧樂(lè)果接觸工人膽堿酯酶活性與端粒長(zhǎng)度變化及其影響因素

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【摘要】：目的了解氧樂(lè)果職業(yè)接觸工人膽堿酯酶活性和端粒長(zhǎng)度的變化,探討代謝酶以及端粒相關(guān)蛋白基因多態(tài)及mRNA表達(dá)的作用。對(duì)象與方法1.調(diào)查對(duì)象:選取某農(nóng)藥廠氧樂(lè)果車間接觸工齡38年的180名工人作為暴露組,選取某公司無(wú)毒物接觸的健康人群115人作為對(duì)照組。經(jīng)知情同意后收集研究對(duì)象的現(xiàn)場(chǎng)暴露資料、問(wèn)卷調(diào)查基本情況并采集生物標(biāo)本。2.研究方法:采用GBZ52-2002附錄B中《全血、紅細(xì)胞、血漿膽堿酯酶活性測(cè)定方法》測(cè)定全血、紅細(xì)胞以及血漿膽堿酯酶活性;熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)外周血端粒DNA相對(duì)長(zhǎng)度;應(yīng)用PCP-RFLP以及CRS-PCR-RFLP技術(shù)分析端粒結(jié)合蛋白基因、代謝酶基因多態(tài)性,端粒結(jié)合蛋白基因包括POT1、TRF1、TERT,代謝酶基因包括GSTT1、GSTM1、GSTP1、CYP2E1;實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)測(cè)定端粒結(jié)合蛋白POT1,TRF1,TRF2,TIN2,RAP1,TPP1mRNA表達(dá)含量。3.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:統(tǒng)計(jì)學(xué)分析在SPSS 21.0軟件上進(jìn)行。定性資料采用χ2檢驗(yàn);正態(tài)資料采用sx±進(jìn)行描述,組間比較用t檢驗(yàn)或方差分析;非正態(tài)資料采用M(P25,P75)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述,組間比較用秩和檢驗(yàn);單倍型軟件PHASE2.0.2分析雙體型對(duì)端粒長(zhǎng)度的影響;Spearman相關(guān)進(jìn)行非正態(tài)資料的相關(guān)性分析;多元線性回歸分析膽堿酯酶活性和端粒長(zhǎng)度的影響因素。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。結(jié)果1.膽堿酯酶活性和端粒長(zhǎng)度:暴露組全血、紅細(xì)胞和血漿膽堿酯酶活性均低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.001);暴露組端粒相對(duì)長(zhǎng)度為1.51(1.10,2.58),對(duì)照組端粒相對(duì)長(zhǎng)度為0.94(0.76,1.32),兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-7.864,P0.001),暴露組相對(duì)端粒長(zhǎng)度長(zhǎng)于對(duì)照組。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),端粒長(zhǎng)度與全血膽堿酯酶活性呈負(fù)相關(guān)(r=-0.182,P=0.002)。2.端粒結(jié)合蛋白mRNA表達(dá):暴露組POT1、RAP1、TIN2、TPP1、TRF2mRNA表達(dá)含量均低于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);POT1、TIN2mRNA表達(dá)量與端粒長(zhǎng)度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.145,P=0.031;r=-0.337,P0.001)。3.全血膽堿酯酶活性影響因素:單因素分析發(fā)現(xiàn),暴露組和對(duì)照組中性別、吸煙、飲酒對(duì)膽堿酯酶活性有影響(P0.05);多因素分析發(fā)現(xiàn),分組(b=-1.436,P0.001),性別(b=0.417,P0.001),飲酒(b=0.291,P=0.007),年齡(b=-0.010,P=0.019)對(duì)膽堿酯酶活性有影響。未發(fā)現(xiàn)工齡、代謝酶基因多態(tài)性對(duì)膽堿酯酶活性有影響(P0.05)。4.端粒長(zhǎng)度影響因素:單因素分析發(fā)現(xiàn),暴露組GSTP1 rs1695(GG+AG)型端粒長(zhǎng)度長(zhǎng)于AA型(Z=-2.273,P=0.023);對(duì)照組TRF1 rs3863242 GG型端粒長(zhǎng)度長(zhǎng)于(AA+AG)型(Z=-2.734,P=0.006),GSTM1缺失型長(zhǎng)于非缺失型(Z=-2.911,P=0.004);多因素分析發(fā)現(xiàn),分組(b=0.442,P0.001)、TRF1rs3863242(b=0.227,P=0.008)、TPP1mRNA(b=0.139,P0.001)、TRF1mRNA(b=0.109,P=0.005)、TIN2mRNA(b=-0.092,P=0.001)、TRF2 mRNA(b=0.027,P=0.011)是端粒長(zhǎng)度影響因素。結(jié)論1.氧樂(lè)果職業(yè)接觸可引起工人全血、紅細(xì)胞、血漿膽堿酯酶活性降低,主要影響因素包括性別、年齡、飲酒,未發(fā)現(xiàn)工齡和代謝酶基因多態(tài)性對(duì)其有影響。2.氧樂(lè)果職業(yè)接觸可能引起工人端粒長(zhǎng)度延長(zhǎng),主要影響因素包括TRF1rs3863242野生基因型和端粒結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)含量,其相關(guān)機(jī)制需要進(jìn)一步探討。
【關(guān)鍵詞】：氧樂(lè)果 膽堿酯酶 端粒長(zhǎng)度 基因多態(tài)性 端粒結(jié)合蛋白
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R99
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-14
• 中英文縮略詞表14-15
• 1. 前言15-18
• 2. 材料與方法18-29
• 2.1 材料18-20
• 2.1.1 檢測(cè)報(bào)告18
• 2.1.2 調(diào)查對(duì)象18-19
• 2.1.3 主要儀器19
• 2.1.4 主要試劑19
• 2.1.5 主要試劑的配制19-20
• 2.2 研究方法20-27
• 2.2.1 本次研究的技術(shù)路線20-21
• 2.2.2 膽堿酯酶活性的測(cè)定21
• 2.2.3 DNA提取及濃度和純度的測(cè)定21-22
• 2.2.4 RNA提取及純度和濃度測(cè)定22-23
• 2.2.5 端粒相對(duì)長(zhǎng)度的測(cè)定23-24
• 2.2.6 基因多態(tài)性的檢測(cè)24-25
• 2.2.7 逆轉(zhuǎn)錄（reverse transcription，，RT）25-27
• 2.2.8 基因表達(dá)檢測(cè)（SYBR Green I染料法）27
• 2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析27-29
• 3. 結(jié)果29-56
• 3.1 職業(yè)衛(wèi)生檢測(cè)報(bào)告29
• 3.2 人口學(xué)基本特征29-30
• 3.3 膽堿酯酶活性測(cè)定結(jié)果30-31
• 3.4 性別、年齡、吸煙和飲酒對(duì)全血膽堿酯酶活性的影響31
• 3.5 工齡對(duì)全血膽堿酯酶活性的影響31-32
• 3.6 外周血白細(xì)胞DNA端粒長(zhǎng)度的測(cè)定結(jié)果32-33
• 3.7 年齡、性別、吸煙和飲酒對(duì)端粒長(zhǎng)度的影響33-35
• 3.8 工齡對(duì)端粒長(zhǎng)度的影響35
• 3.9 端粒長(zhǎng)度和膽堿酯酶活性相關(guān)性分析35-36
• 3.10 各多態(tài)位點(diǎn)基因型的鑒定36-41
• 3.11 研究對(duì)象中基因多態(tài)的分布及遺傳平衡情況41-43
• 3.12 代謝酶基因多態(tài)性對(duì)全血膽堿酯酶活性的影響43-44
• 3.13 基因多態(tài)性對(duì)端粒長(zhǎng)度的影響44-46
• 3.14 基因單倍型和雙體型分析及對(duì)端粒長(zhǎng)度的影響46-49
• 3.14.1 POT1基因多態(tài)性與單倍型頻率46-47
• 3.14.2 POT1基因雙體型與端粒長(zhǎng)度的關(guān)系47-48
• 3.14.3 CYP2E1基因多態(tài)性與單倍型頻率48
• 3.14.4 CYP2E1基因雙體型與端粒長(zhǎng)度的關(guān)系48-49
• 3.15 暴露組和對(duì)照組端粒結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)量的情況49-52
• 3.16 端粒結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)量與端粒長(zhǎng)度的相關(guān)性分析52
• 3.17 多元線性回歸分析全血膽堿酯酶活性的影響因素52-54
• 3.18 多元線性回歸分析端粒長(zhǎng)度的影響因素54-56
• 4. 討論56-63
• 4.1 氧樂(lè)果暴露與膽堿酯酶活性、端粒長(zhǎng)度的關(guān)系56-57
• 4.2 人群基本特征與膽堿酯酶活性、端粒長(zhǎng)度的關(guān)系57-58
• 4.3 端粒結(jié)合蛋白基因多態(tài)性與端粒長(zhǎng)度的關(guān)系58-59
• 4.4 代謝酶基因多態(tài)性與膽堿酯酶活性、端粒長(zhǎng)度關(guān)系59-61
• 4.5 端粒結(jié)合蛋白mRNA表達(dá)及其與端粒長(zhǎng)度的關(guān)系61-62
• 4.6 本研究的展望62-63
• 5. 結(jié)論63-64
• 參考文獻(xiàn)64-69
• 綜述69-83
• 參考文獻(xiàn)79-83
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果83-84
• 致謝84

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