本文關鍵詞：靶向載金納米棒高分子液態(tài)氟碳雙模態(tài)造影劑制備及體外尋靶與顯影實驗研究

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【摘要】：第一部分VCAM-1靶向光聲/超聲雙模態(tài)納米級分子探針的制備及其體外尋靶實驗目的制備一種炎癥靶向光聲/超聲雙模態(tài)的納米級分子探針,檢測該分子探針一般物理特性,并對其進行體外尋靶能力研究。方法采用雙乳化法分別制備包裹金納米棒(Gold nanorods)與液態(tài)氟碳(全氟己烷,PFH)的高分子聚合物(羧基端乳酸-羥基乙酸共聚物,PLGA)納米粒(GNPs)、單純包裹PFH的納米粒(NPs)和單純包裹金納米棒的納米粒(Au-NPs);采用碳二亞胺法制備與血管內皮細胞粘附因子(VCAM-1)單抗相連的靶向納米粒(VCAM-1-GNPs);光鏡、電鏡分別觀察檢測各三種納米粒的形態(tài)、粒徑和電位;采用流式細胞儀觀察GNPs與VCAM-1單抗連接情況;用激光輻照儀對VCAM-1-GNPs、NPs及Au-NPs進行輻照,并觀察三種納米粒的光致相變情況;用不同濃度腫瘤壞死因子(TNF-α)作用于人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)后,采用蛋白質印跡法(Western Blot)測量HUVECs膜上VCAM-1的表達情況;選擇VCAM-1最佳表達量的TNF-α濃度作用于人臍靜脈內皮細胞是為靶向組,未做任何處理作為非靶向組,分別觀察靶向組和非靶向兩組細胞分別與VCAM-1-GNPs的結合情況。結果VCAM-1-GNPs平均粒徑和電位分別為615.86±8.6nm,-17.90±3.04m V,各納米粒形態(tài)大小無差異;流式細胞儀檢測GNPs和VCAM-1單抗的連接率為99.87%;近紅外激光輻照后VCAM-1-GNPs發(fā)生相變,而NPs與Au-NPs未見相變;TNF-α各濃度組作用于細胞后表面均可見VCAM-1表達,其中10 ng/ml組與低濃度組比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05),與100 ng/ml組比較差異無統(tǒng)計學意義(p0.05);光鏡下靶向組VCAM-1-GNPs與HUVECs特異性結合,非靶向組則未見結合。結論成功制備VCAM-1靶向載金納米棒高分子液態(tài)氟碳光聲/超聲雙模態(tài)靶向納米級分子探針,大小一致,形態(tài)規(guī)則。VCAM-1-GNPs光致相變效果明顯,具有良好的靶向能力,為下一步體內外光聲/超聲雙模態(tài)顯像打下了實驗基礎。第二部分靶向載金納米棒高分子液態(tài)氟碳光聲/超聲雙模態(tài)造影劑體外顯影實驗研究目的觀察VCAM-1-GNPs體外雙模態(tài)(光聲/超聲)顯影效果。方法三種納米粒(VCA-1-MGNPs、NPs、Au-NPs)的制備方法同前;觀察VCAM-1-GNPs不同濃度體外光聲/超聲雙模態(tài)顯影效果;觀察GNPs、Au-NPs、NPs在激光輻照前后二維超聲和光聲顯像。結果VCAM-1-GNPs隨著載金納米棒高分子液態(tài)氟碳雙模態(tài)納米級造影劑濃度的增加,光聲信號也隨之增強;近紅外激光輻照前,VCAM-1-GNPs、Au-NPs、NPs二維超聲均為低回聲;輻照后,VCAM-1-GNPs超聲和光聲增強顯影,Au-NPs光聲增強顯影,超聲未見增強顯影未見變化,NPs二維超聲及光聲均未見增強顯影。結論VCAM-1-GNPs二維超聲和光聲顯影效果明顯,且隨著靶向載金納米棒高分子液態(tài)氟碳光聲/超聲雙模態(tài)造影劑隨著濃度的增加,超聲增強顯影效果越明顯,光聲信號越強。該靶向光聲/超聲雙模態(tài)納米級造影劑實現(xiàn)了體外光聲/超聲雙模態(tài)增強顯影,有潛力成為一種優(yōu)良靶向納米級分子探針,實現(xiàn)體內靶向顯像與治療。
【關鍵詞】：金納米棒 液氣相變 VCAM-1抗體 光聲成像 分子成像 光聲成像 金納米棒 液氣相變
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R943;R96
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照4-6
• 摘要6-9
• ABSTRACT9-14
• 前言14-18
• 參考文獻16-18
• 第一部分 VCAM-1 靶向光聲/超聲雙模態(tài)納米級分子探針的制備及其體外尋靶實驗18-30
• 1 材料與方法18-21
• 2 結果21-22
• 3 討論22-25
• 參考文獻25-27
• 附圖27-30
• 第二部分 靶向載金納米棒和液態(tài)氟碳納米造影劑體外顯影30-36
• 1 材料與方法30-32
• 2 結果32
• 3 討論32-33
• 參考文獻33-34
• 附圖34-36
• 全文總結36-38
• 文獻綜述38-43
• 參考文獻41-43
• 致謝43-44
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文、參研項目及學術交流情況44

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6 固宇e，

本文編號：833543