本文關(guān)鍵詞：布洛芬降解菌抗藥基因檢測(cè)及機(jī)制初探

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【摘要】：[目的]實(shí)驗(yàn)室自污水處理廠分離獲得的布洛芬高效降解菌株,本試驗(yàn)旨在研究布洛芬降解菌株的耐藥性,篩選抗生素抗性基因,分析其抗性機(jī)理,為今后其在布洛芬降解研究中的應(yīng)用提供依據(jù)。[方法]試驗(yàn)采用平板篩選獲得菌株對(duì)四環(huán)素等八種常見(jiàn)抗生素的最大耐受濃度,并通過(guò)篩選菌株Fosmid文庫(kù)獲得抗性片段,最終通過(guò)PCR檢測(cè)獲得抗生素抗性基因并分析其作用機(jī)制。[結(jié)果]獲得試驗(yàn)菌株對(duì)四環(huán)素、卡那霉素等八種常見(jiàn)抗生素的最大耐受濃度并篩選獲得編碼紅霉素核糖體甲基化酶的基因ErmB。
【關(guān)鍵詞】：布洛芬 克雷伯氏菌 抗生素抗性基因(ARG) 耐藥機(jī)理
【學(xué)位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：Q93;R96
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 文獻(xiàn)綜述8-12
• 1. 布洛芬8-10
• 1.1 布洛芬8
• 1.2 布洛芬潛在危害8-9
• 1.3 布洛芬降解機(jī)制9-10
• 2 細(xì)菌耐藥性研究10-11
• 2.1 細(xì)菌耐藥性分類(lèi)11
• 2.2 細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生原因11
• 3 研究意義11-12
• 第一章 布洛芬高效降解菌株耐藥性標(biāo)記12-26
• 1.1 布洛芬降解菌株耐藥性初檢12-15
• 1.1.1 供試菌株12
• 1.1.2 試驗(yàn)儀器與試劑12
• 1.1.3 試劑及配制方法12-13
• 1.1.4 試驗(yàn)方法13-14
• 1.1.5 結(jié)果與分析14-15
• 1.2 布洛芬高效降解菌I-2 Fomsid文庫(kù)耐藥性篩選15-23
• 1.2.1 菌種15
• 1.2.2 試驗(yàn)儀器與試劑15
• 1.2.3 培養(yǎng)基制備15
• 1.2.4 試驗(yàn)方法15-23
• 1.3 布洛芬高效耐藥菌株耐藥性標(biāo)記結(jié)果23-26
• 第二章 布洛芬高效降解菌抗生素抗性基因篩選26-34
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料26
• 2.2 試驗(yàn)儀器與試劑26-27
• 2.2.1 試驗(yàn)儀器26
• 2.2.2 試劑26
• 2.2.3 試劑配制方法26-27
• 2.3 試驗(yàn)方法27-30
• 2.3.1 菌落PCR檢測(cè)27-28
• 2.3.2 基因組PCR檢測(cè)28-29
• 2.3.3 PCR檢測(cè)29-30
• 2.4 結(jié)果與分析30-34
• 2.4.1 菌落PCR30
• 2.4.2 文庫(kù)大腸桿菌總DNA提取結(jié)果30-31
• 2.4.3 PCR抗藥性檢測(cè)結(jié)果31-32
• 2.4.4 總結(jié)32-34
• 第三章 布洛芬高效降解菌耐藥基因ErmB的檢測(cè)34-44
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料34
• 3.2 試驗(yàn)儀器與試劑34
• 3.2.1 試驗(yàn)儀器34
• 3.2.2 主要試劑34
• 3.3 試驗(yàn)方法34-40
• 3.3.1 I-2 菌株DNA及質(zhì)粒載體DNA的提取34-36
• 3.3.2 ErmB基因酶切位點(diǎn)添加36-37
• 3.3.3 pET-28a及PCR產(chǎn)物DNA的回收（天根膠回收試劑盒）37
• 3.3.4 質(zhì)粒pET-28a和PCR產(chǎn)物DNA雙酶切37-38
• 3.3.5 質(zhì)粒pET-28a和外源DNA的連接反應(yīng)38
• 3.3.6 感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化38-39
• 3.3.7 重組質(zhì)粒鑒定及轉(zhuǎn)化39-40
• 3.4 試驗(yàn)結(jié)果40-44
• 3.4.1 I-2 菌株總DNA及質(zhì)粒載體DNA提取結(jié)果40-41
• 3.4.2 ErmB酶切位點(diǎn)添加41
• 3.4.3 轉(zhuǎn)化菌株鑒定41-42
• 3.4.4 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化結(jié)果42-44
• 第四章 試驗(yàn)總結(jié)44-46
• 4.1 布洛芬降解菌株抗性基因篩選結(jié)果44-45
• 4.2 紅霉素抗性基因ErmB抗性機(jī)理45-46
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 致謝50-52
• 個(gè)人簡(jiǎn)介52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 程潔;張玲玲;黃曉婷;張燦;王師;胡景杰;包振民;;櫛孔扇貝Fosmid文庫(kù)的構(gòu)建及基因組結(jié)構(gòu)特征分析[J];中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年01期

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本文編號(hào)：777601