大鼠肝微粒體中睪酮及其代謝產(chǎn)物6β-羥基睪酮的高效液相色譜檢測方法的改進(jìn)
發(fā)布時間:2017-08-28 23:08
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【摘要】:建立快速、準(zhǔn)確、靈敏的高效液相色譜法,對大鼠肝微粒體中的探針?biāo)幬锊G酮及其代謝產(chǎn)物6β-羥基睪酮進(jìn)行準(zhǔn)確定量分析,用于體外評價大鼠肝微粒體CYP3A酶的活性.對色譜條件進(jìn)行優(yōu)化,采用Durashell C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol/L Na2HPO4水溶液(p H 9.26)-乙腈-甲醇(58∶32∶10,體積比)為流動相,流速1.0 m L/min,檢測波長245 nm,柱溫30℃,進(jìn)樣量10μL.大鼠肝微粒體與睪酮標(biāo)準(zhǔn)品在37℃進(jìn)行溫孵,用固相萃取小柱對溫孵產(chǎn)物進(jìn)行萃取,用甲醇-水(體積比1妣1)復(fù)溶上機分析.6β-羥基睪酮和睪酮分別在0.05~10 mg/L和0.2~20 mg/L內(nèi)線性關(guān)系良好(r0.999 5),檢出限分別為0.003 4和0.034 mg/L(S/N≥3),定量限分別為0.011和0.114 mg/L(S/N≥10),加標(biāo)回收率分別為100.1%和99.2%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為1.75%和1.13%.該方法符合生物樣品測定標(biāo)準(zhǔn).適合體外測定6β-羥基睪酮和睪酮含量,進(jìn)而用于評價藥物對肝微粒體CYP3A酶活性的影響.
【作者單位】: 河北大學(xué)化學(xué)與環(huán)境科學(xué)學(xué)院;河北大學(xué)藥學(xué)院;河北大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心;
【關(guān)鍵詞】: 大鼠肝微粒體 睪酮 β-羥基睪酮 高效液相色譜法
【基金】:河北省自然科學(xué)基金項目(H2013201203) 河北大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)科專項資金建設(shè)資助項目(2014A1003)
【分類號】:R965;O657.72
【正文快照】: 細(xì)胞色素P450[1]混合功能氧化酶系統(tǒng)(CYP450)是最大的藥物代謝酶蛋白超家族,它的CYP3A亞族是最重要的功能成分,不僅含量占CYP450總量的30%[2]左右,該酶還在許多內(nèi)源性和外源性化合物的代謝中起著重要作用[3].CYP3 A酶的活性可被一些藥物抑制或誘導(dǎo),其活性的改變,關(guān)系著藥物在
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
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,本文編號:749987
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