納米氧化鋅致細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究
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更多相關(guān)文章: 靶向運(yùn)輸 納米粒子 氧化應(yīng)激 凋亡 自噬
【摘要】:目的研究氧化應(yīng)激在納米氧化鋅引起的人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞(H1299)細(xì)胞自噬和凋亡之間的作用。方法實(shí)驗(yàn)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,對(duì)照組給予正常的培養(yǎng)基而實(shí)驗(yàn)組在培養(yǎng)基中分別給予2.5、10和25μg/ml(低,中,高劑量組)濃度的納米氧化鋅。向細(xì)胞中轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白-微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(GFP-LC3)質(zhì)粒,通過(guò)觀察綠色熒光斑點(diǎn)確定自噬的發(fā)生。Western blotting檢測(cè)LC3-Ⅱ來(lái)驗(yàn)證綠色熒光斑點(diǎn)確定的細(xì)胞自噬。鈣黃綠素乙酰甲酯(calcein AM)和碘化丙啶(PI)染色來(lái)確定活細(xì)胞和晚期凋亡細(xì)胞。超氧化物陰離子熒光探針(DHE)染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的聚集。應(yīng)用動(dòng)態(tài)光散射測(cè)定納米氧化鋅在培養(yǎng)基中的分散狀態(tài)。結(jié)果對(duì)照組細(xì)胞有少量的DHE被氧化成紅色,也出現(xiàn)了綠色熒光斑點(diǎn)的聚集,但沒(méi)有細(xì)胞被PI染成紅色。低劑量組被氧化的DHE開始增多,綠色熒光斑點(diǎn)開始增多,少量細(xì)胞被PI染成紅色;中、高劑量組中大量DHE被氧化,綠色熒光斑點(diǎn)顯著增多,大量細(xì)胞被PI染成紅色。實(shí)驗(yàn)組納米氧化鋅在培養(yǎng)基中分散良好。結(jié)論納米氧化鋅在H1299細(xì)胞中引起了氧化應(yīng)激,氧化應(yīng)激誘發(fā)了細(xì)胞的自噬,細(xì)胞自噬功能的紊亂誘導(dǎo)了細(xì)胞的凋亡。
【作者單位】: 包頭醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 靶向運(yùn)輸 納米粒子 氧化應(yīng)激 凋亡 自噬
【基金】:國(guó)家自然基金(81160341)
【分類號(hào)】:R96
【正文快照】: 腫瘤和炎癥組織中的血管不完整,使得納米粒子和大分子物質(zhì)可向這些組織滲漏,而淋巴回流功能的受損又降低了其將納米粒子和大分子物質(zhì)清除出腫瘤和炎癥組織的可能性,使得納米粒子和大分子物質(zhì)在腫瘤和炎癥組織中滯留的現(xiàn)象稱之為增強(qiáng)的通透性和潴留作用(EPR)[1],即EPR效應(yīng)。EPR
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,本文編號(hào):637305
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