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納米氧化鋅致細胞凋亡的機制研究

發(fā)布時間:2017-08-08 00:03

  本文關(guān)鍵詞:納米氧化鋅致細胞凋亡的機制研究


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【摘要】:目的研究氧化應激在納米氧化鋅引起的人非小細胞肺癌細胞(H1299)細胞自噬和凋亡之間的作用。方法實驗分為實驗組和對照組,對照組給予正常的培養(yǎng)基而實驗組在培養(yǎng)基中分別給予2.5、10和25μg/ml(低,中,高劑量組)濃度的納米氧化鋅。向細胞中轉(zhuǎn)染綠色熒光蛋白-微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(GFP-LC3)質(zhì)粒,通過觀察綠色熒光斑點確定自噬的發(fā)生。Western blotting檢測LC3-Ⅱ來驗證綠色熒光斑點確定的細胞自噬。鈣黃綠素乙酰甲酯(calcein AM)和碘化丙啶(PI)染色來確定活細胞和晚期凋亡細胞。超氧化物陰離子熒光探針(DHE)染色檢測細胞內(nèi)活性氧(ROS)的聚集。應用動態(tài)光散射測定納米氧化鋅在培養(yǎng)基中的分散狀態(tài)。結(jié)果對照組細胞有少量的DHE被氧化成紅色,也出現(xiàn)了綠色熒光斑點的聚集,但沒有細胞被PI染成紅色。低劑量組被氧化的DHE開始增多,綠色熒光斑點開始增多,少量細胞被PI染成紅色;中、高劑量組中大量DHE被氧化,綠色熒光斑點顯著增多,大量細胞被PI染成紅色。實驗組納米氧化鋅在培養(yǎng)基中分散良好。結(jié)論納米氧化鋅在H1299細胞中引起了氧化應激,氧化應激誘發(fā)了細胞的自噬,細胞自噬功能的紊亂誘導了細胞的凋亡。
【作者單位】: 包頭醫(yī)學院研究生學院;
【關(guān)鍵詞】靶向運輸 納米粒子 氧化應激 凋亡 自噬
【基金】:國家自然基金(81160341)
【分類號】:R96
【正文快照】: 腫瘤和炎癥組織中的血管不完整,使得納米粒子和大分子物質(zhì)可向這些組織滲漏,而淋巴回流功能的受損又降低了其將納米粒子和大分子物質(zhì)清除出腫瘤和炎癥組織的可能性,使得納米粒子和大分子物質(zhì)在腫瘤和炎癥組織中滯留的現(xiàn)象稱之為增強的通透性和潴留作用(EPR)[1],即EPR效應。EPR

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本文編號:637305

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