發(fā)布時間：2017-07-27 09:04

  本文關(guān)鍵詞：辛伐他汀經(jīng)p38 MAPKMAPK信號通路調(diào)控BMSCs中晚期成骨分化的研究

  更多相關(guān)文章： 辛伐他汀 BMSCs 成骨分化 骨鈣素 磷酸化p

【摘要】：目的探討在成骨誘導環(huán)境下,辛伐他汀對BMSCs成骨分化中晚期的作用和對p 38 MAPK信號通路的影響。方法取20只雌性SD大鼠雙側(cè)股骨和脛骨骨髓,全骨髓培養(yǎng)法分離培養(yǎng)BMSCs并傳代,取第2代細胞進行實驗。實驗分為5組,對照組(CM組):完全培養(yǎng)基培養(yǎng);辛伐他汀組(SIM組):含終濃度為1×10-7 mol/L辛伐他汀的完全培養(yǎng)基培養(yǎng);成骨誘導培養(yǎng)基組(OM組):含10 mmol/Lβ甘油磷酸鈉和50μg/m L抗壞血酸的成骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng);辛伐他汀和成骨誘導培養(yǎng)基組(OM+SIM組):含終濃度為1×10-7 mol/L辛伐他汀成骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng);阻斷劑組(OM+SIM+SB組):先用p 38 MAPK信號通路阻斷劑SB 203580干預30 min后,再采用含終濃度為1×10-7 mol/L辛伐他汀成骨誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)。MTT法檢測CM組和SIM組細胞活性;ELISA法檢測OM組及OM+SIM組培養(yǎng)7、14 d細胞ALP含量。應用實時定量PCR和Western blot方法檢測OM組和OM+SIM組第21、28天開始成骨誘導培養(yǎng)1、12、24 h后,骨鈣素(osteocalcin,OCN)蛋白和m RNA表達水平,從而確定辛伐他汀作用最佳時間點,隨后檢測該時間點OM組、OM+SIM組和OM+SIM+SB組p 38、磷酸化p 38(phospho-p 38,p-p 38)蛋白表達,計算p-p 38/p 38。結(jié)果 MTT檢測示各時間點,SIM組與CM組吸光度(A)值比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),提示辛伐他汀對BMSCs活性和增殖能力無明顯影響。與OM組相比,OM+SIM組7、14 d ALP含量均明顯增高,且兩組組內(nèi)7 d ALP含量均高于14 d,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05)。實時定量PCR及Western blot檢測示,第21、28天開始成骨誘導培養(yǎng)后,各組OCN m RNA及蛋白在12 h時表達量高于其他時間點(P0.05),且OM+SIM組明顯高于OM組(P0.05);確定辛伐他汀誘導成骨干預的最佳起效時間為12 h。阻斷劑干預后,12 h時OM+SIM+SB組p-p 38/p 38明顯低于其他兩組(P0.05),OM+SIM組高于OM組(P0.05)。結(jié)論辛伐他汀的最佳起效時間為給藥后12 h,其可以提高BMSCs成骨分化中晚期OCN蛋白、m RNA和p-p 38蛋白表達量。
【作者單位】： 華北理工大學;
【關(guān)鍵詞】： 辛伐他汀 BMSCs 成骨分化 骨鈣素 磷酸化p
【基金】：河北省自然科學基金(H 2013209255) 河北省高等學�？茖W研究計劃(QN 20131007)~~
【分類號】：R96
【正文快照】： 研究表明,他汀類藥物具有促進骨形成作用,其作用機制大致可以分為4個方面:促進成骨細胞分化、抑制成骨細胞凋亡、抑制破骨細胞形成以及與維生素D聯(lián)合作用。1994年,Han等[1]首次發(fā)現(xiàn)了絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPKs)家族的重要組成部分——p 38

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 田發(fā)明;張柳;孟亞強;張英澤;;辛伐他汀促進大鼠BMSCs分化為成骨細胞[J];基礎醫(yī)學與臨床;2010年08期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐道華;;小檗堿對骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)的影響及作用機制[A];中華醫(yī)學會第六次全國骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病學術(shù)會議暨中華醫(yī)學會骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病分會成立十周年論文匯編[C];2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 田發(fā)明;辛伐他汀對大鼠骨質(zhì)疏松性骨折及BMSCs成骨分化的影響[D];河北醫(yī)科大學;2011年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 沈鋒;構(gòu)建BMSCs-慶大霉素—藻酸鈣三維緩釋微球的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

，

本文編號：580620