本文關(guān)鍵詞：反義核酸對(duì)宮頸癌細(xì)胞作用的研究

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【摘要】：背景:癌癥早期的發(fā)生發(fā)展及癌細(xì)胞的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移和預(yù)后都與血管生成有密切關(guān)系。新生血管為腫瘤提供營養(yǎng),促進(jìn)腫瘤生長,是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的前提條件。血管內(nèi)皮生長因子C(VEGF-C)是目前所知道的作用最強(qiáng)的促進(jìn)血管生成因子,參與血管生成的多個(gè)環(huán)節(jié)。且具有生成淋巴管的功能。反義藥物作為一類新型生物技術(shù)來源藥物,在抗癌治療中顯示了良好的前景,針對(duì)VEGF-C的靶向治療有可能成為治療宮頸癌的新方法,本文以VEGF-C為靶標(biāo)設(shè)計(jì)一段反義核酸,針對(duì)其對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)的作用進(jìn)行研究。目的:研究VEGF-C反義核酸及其與紫杉醇聯(lián)合應(yīng)用對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖、遷移的影響及其初步探討其作用機(jī)制。方法:體外培養(yǎng)人宮頸癌細(xì)胞(Hela),分為對(duì)照組(Control)、反義寡核苷酸組(ASODN)、隨機(jī)序列組(Random)、紫杉醇組(Taxol)、反義寡核苷酸聯(lián)合紫杉醇組(ASODN+Taxol)、隨機(jī)序列聯(lián)合紫杉醇組(Random+Taxol)。采用MTT法檢測(cè)各組Hela細(xì)胞的生長增殖,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組Hela細(xì)胞的遷移程度。RT-PCR檢測(cè)各組mRNA的表達(dá),ELISA檢測(cè)Hela細(xì)胞上清中VEGF-C的分泌。結(jié)果:(1)ASODN組具有明顯的抑制Hela細(xì)胞增殖作用。在48h時(shí)增殖抑制率達(dá)到39.1%。無論是24h或是在48h時(shí),與Control組相比,Random組均無顯著性差異。ASODN+Taxol組對(duì)Hela細(xì)胞的增殖抑制率高于Taxol組,且具有顯著性差異。說明ASODN對(duì)Hela細(xì)胞具有增殖抑制作用,與紫杉醇聯(lián)合應(yīng)用后具有協(xié)同作用。(2)ASODN組能夠顯著抑制Hela細(xì)胞遷移。而隨機(jī)序列組與對(duì)照組相比無顯著性差異。紫杉醇組對(duì)Hela細(xì)胞的遷移抑制作用高于反義核酸組。與紫杉醇組相比,反義核酸聯(lián)合紫杉醇組隊(duì)Hela細(xì)胞的增值抑制作用有一定程度的升高。隨機(jī)序列聯(lián)合紫杉醇組則無明顯差異。說明反義核酸對(duì)Hela細(xì)胞有遷移抑制作用,與紫杉醇聯(lián)合應(yīng)用后能夠增加對(duì)Hela細(xì)胞的遷移抑制作用。(3)與對(duì)照組相比,ASODN組mRNA表達(dá)的比值明顯下降,反義核酸聯(lián)合紫杉醇組mRNA表達(dá)的比值明顯下降。隨機(jī)序列組、紫杉醇組以及隨機(jī)序列聯(lián)合紫杉醇組無明顯變化。說明反義核酸能夠抑制Hela細(xì)胞中mRNA的表達(dá)。(4)與對(duì)照組相比,反義核酸組的VEGF-C含量明顯降低,反義核酸聯(lián)合紫杉醇組的VEGF-C含量顯著下降。說明VEGF-C反義核酸能夠顯著下調(diào)hela細(xì)胞中VEGF-C的表達(dá)。結(jié)論:反義核酸能夠通過下調(diào)mRNA及蛋白的表達(dá)抑制hela細(xì)胞的增殖及遷移作用,且與紫杉醇聯(lián)用后有一定程度的增強(qiáng)作用。
【關(guān)鍵詞】：VEGF-C 宮頸癌 反義核酸 血管生成
【學(xué)位授予單位】：北京理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96;R91
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 縮略詞9-12
• 第一章 緒論12-27
• 1.1 宮頸癌概述12-15
• 1.1.1 宮頸癌的基因?qū)W研究12-15
• 1.2 VEGF-C概述15-21
• 1.2.1 VEGF-C的結(jié)構(gòu)與功能15-16
• 1.2.2 VEGF-C在腫瘤各個(gè)階段發(fā)揮的作用16-18
• 1.2.3 VEGF-C在宮頸癌中的研究現(xiàn)狀18-19
• 1.2.4 □ VEGF-C與宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移的關(guān)系19-20
• 1.2.5 □ VEGF-C與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系20
• 1.2.6 □ VEGF-C與抗腫瘤治療前景20-21
• 1.3 反義核酸概述21-26
• 1.3.1 反義核酸藥物的作用機(jī)制21
• 1.3.2□ 反義核酸藥物的特異抗癌活性□21-22
• 1.3.3 反義核酸藥物的種類22-23
• 1.3.4 反義核酸藥物藥效學(xué)的其它問題23
• 1.3.5 反義核酸藥物藥代動(dòng)力學(xué)23-24
• 1.3.6 反義核酸藥物毒副作用特征24
• 1.3.7 反義核酸藥物在腫瘤治療中地位24-25
• 1.3.8□ 反義核酸藥物的前景25-26
• 1.4 本研究的切入點(diǎn)及意義26-27
• 第二章 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容27-35
• 2.1 實(shí)驗(yàn)器材27-29
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)藥物27
• 2.1.2 Hela細(xì)胞27
• 2.1.3 實(shí)驗(yàn)藥品及試劑27
• 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器27-28
• 2.1.5 實(shí)驗(yàn)材料28-29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法29-34
• 2.2.1 溶液的配置29
• 2.2.2 Hela細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)29-30
• 2.2.3、脂質(zhì)體-核酸轉(zhuǎn)染復(fù)合物30
• 2.2.4、MTT檢測(cè)反義核酸對(duì)細(xì)胞增殖的影響30-31
• 2.2.5、劃痕法檢測(cè)反義核酸對(duì)細(xì)胞遷移的影響31
• 2.2.6、RNA提取31-32
• 2.2.7、DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）32-33
• 2.2.8 ELISA檢測(cè)hela細(xì)胞上清VEGF-C表達(dá)的影響33-34
• 2.3 數(shù)據(jù)處理34-35
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-45
• 3.1 反義核酸對(duì)Hela細(xì)胞的增殖的影響35-37
• 3.2 反義核酸對(duì)Hela細(xì)胞遷移的影響37-39
• 3.3 反義核酸對(duì)VEGF-C mRNA表達(dá)的影響39-44
• 3.4 檢測(cè)反義核酸對(duì)hela細(xì)胞上清中的VEGF-C含量的影響44-45
• 第四章 討論45-47
• 結(jié)論47-48
• 本文創(chuàng)新點(diǎn)48
• 展望與設(shè)想48-49
• 參考文獻(xiàn)49-55
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文與研究成果清單55-56
• 致謝56

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 李梅;毛福榮;曹學(xué)全;張蕾;陳奎生;;VEGF-C在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)及臨床意義[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2007年02期

2 劉冬菊,婁閣;VEGF-C及受體VEGFR-3在宮頸癌中的表達(dá)及臨床意義[J];實(shí)用婦產(chǎn)科雜志;2005年08期

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本文編號(hào)：562781