本文關(guān)鍵詞：海綿附生放線菌抗結(jié)核分枝桿菌活性物質(zhì)的篩選及分離

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【摘要】：目的從海綿共附生的放線菌代謝物質(zhì)中篩選出具有抗結(jié)核分枝桿菌活性的新型物質(zhì)。方法采用平板稀釋法從南海海域采集的海綿中分離共附生放線菌菌株,使用微孔板稀釋法評(píng)估放線菌代謝物抗結(jié)核分枝桿菌H37Rv能力。根據(jù)分子量和極性,使用高效液相色譜(HPLC)對(duì)初篩具有較高抑菌活性的菌株培養(yǎng)上清進(jìn)行分離,并分別從分離各組分中進(jìn)一步篩選、鑒定具有抑制結(jié)核桿菌生長(zhǎng)作用的活性物質(zhì)。提取該菌株的基因組DNA,采用通用引物對(duì)其16S rRNA行PCR擴(kuò)增,并對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序比對(duì)。結(jié)果分離出的416株放線菌中,6株具有抗結(jié)核分枝桿菌功能,其中編號(hào)為NH128菌株的培養(yǎng)上清中含有抑制H37Rv生長(zhǎng)的活性物質(zhì)且作用較為明顯;對(duì)其進(jìn)行分離后的組分F3具有較高的抑菌活性;進(jìn)一步通過(guò)HPLC和微孔板稀釋法鑒定出,F3的亞組分S3含有高抑菌活性的物質(zhì),其MIC50約為3μg/m L。對(duì)NH128 16S rRNA序列比對(duì)結(jié)果顯示,其與Aclinomycetales(R03 AY944262)同源性為99%。結(jié)論南海海域海綿附生放線菌能夠產(chǎn)生較高的抗結(jié)核分枝桿菌活性物質(zhì);NH128菌株可能為放線菌菌屬Aclinomycetales(R03 AY944262)的變種。
【作者單位】： 山東大學(xué)第二醫(yī)院檢驗(yàn)科;山東大學(xué)第二醫(yī)院影像科;
【關(guān)鍵詞】： 海綿 放線菌屬 共附生 抗結(jié)核分枝桿菌 高效液相色譜
【分類(lèi)號(hào)】：R915
【正文快照】： 目前全球有將近1/3的人感染過(guò)結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis),且以800~1 000萬(wàn)/年的速度增加。每年有近300萬(wàn)人死于結(jié)核病。我國(guó)活動(dòng)性肺結(jié)核人數(shù)高居世界第二位,是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家。近年來(lái),伴隨著多重耐藥結(jié)核桿菌(multidrug-resist-ant tuberculosis,M DR-TB)的出現(xiàn)、AIDS流

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本文編號(hào)：543772