目的研究微小RNA-124(miR-124)對阿霉素誘導的心肌毒性的影響以及潛在機制。方法建立阿霉素誘導的C57BL/6小鼠和乳小鼠心肌細胞氧化應激損傷模型,采用Western blot檢測Src同源2結構域轉化蛋白1(p66Shc)蛋白表達水平。轉染miR-124 mimic、inhibitor后觀察阿霉素處理心肌細胞活性氧(ROS)水平,比色法檢測總超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,Western blot檢測Caspase-3和p66Shc的蛋白表達,使用熒光素酶報告基因方法驗證miR-124與p66Shc蛋白之間的結合作用。結果阿霉素引起心肌p66Shc蛋白表達升高(P<0.05)。過表達miR-124可減輕阿霉素引起的心肌細胞氧化應激損傷,表現(xiàn)為ROS和MDA含量減少、SOD活性升高、Caspase-3和p66Shc的蛋白表達降低(P<0.05)。miR-124與p66Shc存在直接的結合作用。結論 miR-124通過抑制p66Shc蛋白表達而對阿霉素誘導的心肌氧化應激損傷起保護作用。

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【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料
        1.動物
        2.主要試劑
    二、方法
        1.阿霉素處理小鼠心肌氧化應激損傷模型的建立
        2.細胞培養(yǎng)及實驗分組
        3.細胞內ROS含量檢測
        4.MDA含量、SOD活性檢測
        5.Western blot檢測蛋白表達
        6.熒光素酶檢測
    三、統(tǒng)計學處理
結 果
    一、不同阿霉素給藥次數(shù)對小鼠心肌組織中p66Shc蛋白表達的影響
    二、不同濃度的阿霉素處理后對小鼠心肌細胞中p66Shc蛋白表達的影響
    三、干涉miR-124的表達可有效影響阿霉素所致的心肌細胞氧化應激損傷
    四、干涉miR-124的表達對阿霉素處理后心肌細胞內p66Shc表達的影響
    五、p66Shc是miR-124的直接作用靶點
討 論



本文編號：4049757