絲狀真菌可以產(chǎn)生結(jié)構(gòu)多樣的次級代謝產(chǎn)物,是天然藥物的重要來源。但由于很多次級代謝產(chǎn)物的合成途徑及機(jī)制并不清楚,且某些具有特定生物活性的次代產(chǎn)物產(chǎn)量低而難以實現(xiàn)高水平工業(yè)化生產(chǎn),因此如何提高絲狀真菌次級代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量和活性成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。棘白菌素類藥物是目前用于治療由念珠菌等真菌引起的入侵性感染最有效的藥物,由某些特定的絲狀真菌合成。目前已經(jīng)上市的棘白菌素類藥物包括卡泊芬凈、米卡芬凈和阿尼芬凈。棘白菌素類藥物價格昂貴,使其在臨床上的廣泛應(yīng)用受到很大的限制。因此深入研究棘白菌素類抗生素的生物合成機(jī)制,從而提高棘白菌素類的產(chǎn)量和活性,降低其使用成本,對有效控制相關(guān)真菌感染性疾病尤為重要。棘白菌素B是由絲狀真菌Aspergilluspachycristatus產(chǎn)生的環(huán)狀酯肽類次級代謝產(chǎn)物,是合成阿尼芬凈的前體物質(zhì)。負(fù)責(zé)合成棘白菌素B的非核糖體多肽合成酶(NRPS)基因簇中還包括可催化其多個組成氨基酸發(fā)生羥基化修飾的羥化酶,其中參與棘白菌素B環(huán)狀六肽中脯氨酸和4-甲基脯氨酸羥基化的羥化酶尚未被鑒定和表征。本論文對棘白菌素B合成途徑中的一個關(guān)鍵脯氨酸羥化酶(HtyE)進(jìn)行探究。通過體內(nèi)與體外相結(jié)...

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－３棘白菌素Ｂ合成基因簇??

丨？？《■—＞？？？■?ｒ?ｉｍ§－，《？■？■￣＞?ｉ？?？?＾??圖１－１?ｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎＢ？生物合成基因簇??Ｆｉｇ．?１－１?Ｐｎｅｕｍｏｃａｎｄｉｎｓ?ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｇｅｎｅ?ｃｌｕｓｔｅｒ?ｉｎ?Ｇｌａｒｅａ?ｌｏｚｏｙｅｎｓｉｓ?（Ｃｈｅｎ?ｅ....

圖１－４棘白菌素Ｂ的合成過程??Ｆｉｇ．?１－４?Ｔｈｅ?ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆ?ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ?Ｂ．??１．３．３?？－二／Ｆｅ２＋

ＮＲＰＳ?ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ??圖１－３棘白菌素Ｂ合成基因簇??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｃｌｕｓｔｅｒ?ｏｆ?ｅｃｈｉｎｏｃａｎｄｉｎ?Ｂ．??１．３．２棘白菌素Ｂ的合成過程??在棘白菌素Ｂ的合成過程中，首先雙烯亞油酸側(cè)鏈在ｅＣｃ／７編碼的ＡＭＰ－連??....

圖１－５不同來源的脯氨酸／酰羥化酶的進(jìn)化樹分析??Ｆｉｇ．?１－５?Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｅｎｚｙｍｅｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｏｕｒｃｅｓ?ｉｎ?ｎａｔｕｒｅ?ｔｈａｔ??

了可以羥基化脯氨酸外，還可以甲基脯氨酸、哌啶酸、Ｄ－脯氨酸等與腩氨酸結(jié)構(gòu)??類似的氨基酸為底物（Ｓｈｉｂａｓａｋｉ?ｅｔ?ａｌ．?１９９９ｂ）。??如下圖１－５所示，對目前文獻(xiàn)報道的腩氨酸羥化酶和脯氨酰羥化酶進(jìn)行簡??單的進(jìn)化樹分析。氨基酸序列比對結(jié)果顯示真菌來源的脯氨酸羥化酶與....

圖１－７?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系統(tǒng)的分類??Ｆｉｇ．?１－７?Ｔｈｅ?ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ?ｓｙｓｔｅｍｓ?（Ｗｒｉｇｈｔ?ｅｔ?ａｌ．?２０１６）．??

?１．３．３．２真菌脯氨酸羥化酶的研究進(jìn)展??脯氨酸羥化酶的作用機(jī)制如圖１－６所示，每個腩氨酸羥化酶分子可以結(jié)合一??個Ｆｅ２＋，當(dāng)脯氨酸靠近時，結(jié)合在活性中心的水分子離開，氧氣分子占據(jù)原來水??分子的位置，同時脫去一分子的Ｃ０２，?Ｆｅ２＋被氧化為高價鐵離子Ｆｅ４＋，脯氨酸五?....

本文編號：4006343