由于顱內小血管病變或大血管狹窄導致長期大腦慢性缺血,進而引起腦白質進行性損傷和認知功能障礙是造成血管性癡呆的常見原因。目前,臨床治療以預防引起血管病變的危險因素為主,除此之外并無有效的治療藥物,因此急需尋找新的具有針對性的藥物靶點和治療手段或策略。實驗室的前期研究發(fā)現(xiàn)長期慢性缺血會導致腦白質區(qū)少突膠質細胞死亡和髓鞘脫失,并且自身髓鞘再生也十分有限。谷氨酸能神經元是腦內重要的興奮性神經元,谷氨酸可作用于少突膠質前體細胞,并在發(fā)育過程中影響髓鞘形成。本文將解析皮層谷氨酸能神經元調控腦白質區(qū)的少突膠質前體細胞的通路作用,并通過精準調控方法,研究其對慢性缺血后腦白質區(qū)的少突膠質前體細胞增殖及髓鞘再生的作用及機制。首先,本文利用逆軸突示蹤染料追蹤缺血損傷較為嚴重的腦白質胼胝體區(qū)域的神經投射,發(fā)現(xiàn)其存在大量來自運動皮層和感覺皮層的谷氨酸能神經元的神經投射。在慢性腦缺血早期,利用光遺傳學手段特異性激活表達光敏感通道ChR2的感覺(或運動)皮層的谷氨酸能神經元可以明顯促進肼胝體少突膠質前體細胞的增殖,減少缺血后少突膠質前體細胞的丟失。但同時也發(fā)現(xiàn),光遺傳學激活運動皮層會誘發(fā)驚厥,而激活感覺皮層未引起驚...

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．腦白質胼胝體區(qū)存在皮層谷氨酸能神經元的投射??．ｘｎｒｍｒｒ．

素進行逆向示蹤，實驗結果發(fā)現(xiàn)運動皮層和感覺皮層顯示有大量被綠色熒光標記??的神經元，提示其與胼胝體存在直接的神經投射關系，并且這些被逆向追蹤到的神??經元在感覺皮層的分布更為富集（圖２Ａｈ我們用谷氨酸能神經元特異性蛋白??ＣａＭＫＩＩａ染色與追蹤到的神經元進行共定位分析，結果發(fā)現(xiàn)....

圖５．光遺傳學激活感覺皮層神經元不影響粘紙試驗中的小鼠的感覺功能??

經元對其感覺功能的影響，我們在ｒＵＣＣＡＯ術前、術后７天以及給予７天藍光刺??激結束時，用枯紙試驗（Ｔｈｅ?ａｄｈｅｓｉｖｅ?ｒｅｍｏｖａｌ?ｔｅｓｔ）測定了小鼠被刺激側對側的??前爪對枯紙的感知時間（Ｔｈｅｃｏｎｔａｃｔｔｉｍｅ，圖５Ａ）?［３８】。我們將術前測定的枯紙感??知....

圖６．光遺傳學激活感覺皮層谷氨酸能神經元不影響慢性缺血后ＳＶＺ區(qū)少突膠質??

ＢｒｄＵ＋／ＮＧ２＋共標的增殖少突膠質前體細胞個數(shù)顯著增加（尸＜０．０５），而給予藍光??激活感覺皮層谷氨酸能神經元并未對ＳＶＺ區(qū)少突膠質前體細胞增殖有明顯影響??（圖６）。結果提示給予藍光激活感覺皮層谷氨酸能神經元促進少突膠質細胞增殖??的作用主要發(fā)生于胼胝體區(qū)域，而非ＳＶＺ區(qū)....

圖８．光遺傳學激活感覺皮層抑制性神經元不影響慢性缺血后少突肢質前體細胞??增殖??

活感覺皮層抑制性神經元，觀察其對少突膠質前體細胞增殖的作用。結果發(fā)現(xiàn)激活??感覺皮層抑制性神經元后并不能逆轉慢性缺血引起的少突膠質前體細胞的丟失??（圖８Ａ，?８Ｂ）。進一步還考察了?ＢｒｄＵ＋／ＮＧ２＋雙陽性的處于增殖階段的少突膠質前??體細胞數(shù)目，結果顯示激活感覺皮層抑制性神....

本文編號：3891139