發(fā)酵類脂溶性藥物中殘留DNA檢測關(guān)鍵影響因素——溶劑的篩選與確定
發(fā)布時間:2023-05-13 19:00
目的:考察不同溶劑對發(fā)酵類脂溶性藥物中殘留DNA測定準(zhǔn)確性的影響并確定最佳溶劑。方法:以脂溶性藥物-環(huán)孢素為例,通過研究DNA檢測全過程中各步驟溶解因素對檢測結(jié)果的影響,從供試品溶液制備、供試品溶液與DNA試劑盒試劑相溶性及DNA溶液穩(wěn)定性3個方面入手,對不同種類的溶劑進(jìn)行考察和篩選,并根據(jù)熒光染色法的原理,采用Qubit?DNA檢測試劑盒對環(huán)孢素供試品溶液中殘留DNA進(jìn)行測定,探討溶劑選擇的適用性和合理性。此外,應(yīng)用篩選的溶劑對另一種脂溶性藥物——兩性霉素B中殘留DNA進(jìn)行了測定,進(jìn)一步驗證可靠性。結(jié)果:0.1 mol·L-1鹽酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)、0.1 mol·L-1醋酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)和0.1 mol·L-1檸檬酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)3種混合溶劑對脂溶性藥物均有較好溶解性并能與DNA試劑較好相溶;進(jìn)一步的DNA穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示,0.1 mol·L-1檸檬酸-N,N-二甲基甲酰胺(1∶4)對DNA結(jié)構(gòu)與性質(zhì)不產(chǎn)生影響,穩(wěn)定性最好。結(jié)論:采用0.1 m...
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 儀器與試藥
2 方法與結(jié)果
2.1 溶液的配制
2.1.1 0.1 mol·L-1檸檬酸-DMF(1∶4)溶劑
2.1.2 DNA系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液
2.1.3 供試品溶液
2.1.4加標(biāo)供試溶液
2.1.5 Qubit工作液
2.2 DNA測定法
2.2.1 儀器標(biāo)準(zhǔn)曲線校正
2.2.2溶液測定
2.3 專屬性
2.4 線性與范圍
2.5 精密度
2.6 檢測下限(LOD)
2.7 準(zhǔn)確度
2.8 樣品測定
3 討論
3.1 溶劑考察一般步驟及關(guān)鍵點
3.2 溶劑的篩選
3.3 溶劑對DNA穩(wěn)定性的影響
3.4 方法的驗證與應(yīng)用
4 小結(jié)
本文編號:3816321
【文章頁數(shù)】:8 頁
【文章目錄】:
1 儀器與試藥
2 方法與結(jié)果
2.1 溶液的配制
2.1.1 0.1 mol·L-1檸檬酸-DMF(1∶4)溶劑
2.1.2 DNA系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液
2.1.3 供試品溶液
2.1.4加標(biāo)供試溶液
2.1.5 Qubit工作液
2.2 DNA測定法
2.2.1 儀器標(biāo)準(zhǔn)曲線校正
2.2.2溶液測定
2.3 專屬性
2.4 線性與范圍
2.5 精密度
2.6 檢測下限(LOD)
2.7 準(zhǔn)確度
2.8 樣品測定
3 討論
3.1 溶劑考察一般步驟及關(guān)鍵點
3.2 溶劑的篩選
3.3 溶劑對DNA穩(wěn)定性的影響
3.4 方法的驗證與應(yīng)用
4 小結(jié)
本文編號:3816321
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/3816321.html
最近更新
教材專著