目的急性呼吸窘迫綜合癥（Acute Respiratory Distress Syndrome,ARDS）和急性肺損傷（Acute Lung Injury,ALI）是一種常發(fā)生在重癥病人身上的急性呼吸系統(tǒng)疾病,死亡率較高。ARDS/ALI發(fā)病及調(diào)控機(jī)制復(fù)雜,救治比較困難,臨床上多采用機(jī)械通氣、促進(jìn)炎癥消失等手段遏制ARDS/ALI發(fā)展進(jìn)程。近年來隨著分子生物學(xué)研究技術(shù)的進(jìn)步以及對(duì)ARDS/ALI發(fā)病機(jī)制的深入研究,應(yīng)用生物靶向治療和基因治療逐漸成為可能。Abro1（Abraxas Brother1）是去泛素化酶BRISC復(fù)合體的重要組成成分,參與DNA損傷、免疫應(yīng)答及染色體復(fù)制等生物學(xué)過程的調(diào)控。本論文通過研究Abro1在急性肺損傷過程中的作用,揭示其參與急性肺損傷發(fā)病的分子機(jī)制,為急性肺損傷的防治提供潛在的藥物靶點(diǎn)。方法分別取生理狀態(tài)下野生小鼠和Abro1敲除小鼠尾靜脈血,檢測外周血象;采用復(fù)合酶消化法和流式細(xì)胞術(shù)分析肺臟組織中免疫細(xì)胞的比例和數(shù)目;采用肺部氣溶膠給藥系統(tǒng)建立E.coli和LPS誘導(dǎo)的急性肺損傷模型并檢測小鼠存活狀態(tài);應(yīng)用HE染色觀察肺組織病理改變;采用計(jì)數(shù)微球計(jì)數(shù)支... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 導(dǎo)論
    1.1 研究背景
    1.2 文獻(xiàn)綜述
        1.2.1 ABRO1的結(jié)構(gòu)
        1.2.2 ABRO1的功能
        1.2.3 急性肺損傷／急性呼吸窘迫綜合癥(ALI/ARDS)
    1.3 研究方法
        1.3.1 文獻(xiàn)分析法
        1.3.2 實(shí)驗(yàn)研究
        1.3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析法
    1.4 研究內(nèi)容
第二章 ABRO1~(-/-)小鼠生理狀態(tài)免疫分析
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 主要儀器設(shè)備
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 主要試劑配制
        2.2.2 外周血象分析
        2.2.3 支氣管肺泡灌洗液
        2.2.4 BCA測定蛋白含量
        2.2.5 小鼠肺組織免疫細(xì)胞分離與純化
        2.2.6 小鼠肺部免疫細(xì)胞流式分析
        2.2.7 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 敲除Abro1不影響外周血象
        2.3.2 敲除Abro1不改變肺泡灌洗液和肺組織免疫細(xì)胞的組成
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 Abro1敲除小鼠抵抗E.coli誘導(dǎo)的急性肺損傷及機(jī)制研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要儀器設(shè)備
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 急性肺損傷動(dòng)物模型的建立
        3.2.2 肺臟組織HE染色
        3.2.3 肺臟組織蛋白提取
        3.2.4 Westernblot檢測
        3.2.5 支氣管肺泡灌洗液
        3.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測
        3.2.7 肺臟組織MPO檢測
        3.2.8 細(xì)胞因子檢測
        3.2.9 Real-timePCR檢測小鼠肺臟中炎癥因子mRNA表達(dá)
        3.2.10 肺臟組織SOD檢測
        3.2.11 肺臟組織總抗氧化能力檢測
        3.2.12 肺臟組織濕干比重檢測
        3.2.13 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 建立E.coli誘發(fā)的急性肺損傷模型
        3.3.2 敲除Abro1提高小鼠存活率,減輕肺組織損傷
        3.3.3 E.coli刺激肺組織中Abro1的表達(dá)先上升后下降
        3.3.4 敲除Abro1不影響肺的抗氧化能力
        3.3.5 敲除Abro1不改變肺泡壁的通透性
        3.3.6 敲除Abro1降低PMN的募集,不影響其功能
        3.3.7 敲除Abro1降低血清中炎癥因子的釋放
        3.3.8 敲除Abro1降低BALF中炎癥因子、趨化因子的釋放
        3.3.9 敲除Abro1降低LPS引起的肺部損傷
        3.3.10 敲除Abro1降低LPS引起的炎癥因子釋放
        3.3.11 敲除Abro1降低炎癥小體的活化
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第四章 結(jié)論與展望
    4.1 結(jié)論
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3732629