發(fā)布時(shí)間：2022-09-27 17:01

　　目的:建立細(xì)胞色素P450酶3A4（CYP3A4）、1A2（CYP1A2）及2E1（CYP2E1）的快速免疫印跡（Western blot）檢測(cè)方法。方法:培養(yǎng)Hep G2細(xì)胞并提取總蛋白,飼養(yǎng)大鼠并制備肝組織勻漿液、S9以及微粒體,以4種標(biāo)本為對(duì)象分別以不同的封閉時(shí)間、抗體孵育時(shí)間和分離膠類型等常規(guī)Western blot條件設(shè)置A、B、C、D、E及F組用以考察CYP3A4的最佳檢測(cè)條件;使用Western blot快速孵育儀,分別以不同的Western blot封閉和抗體孵育時(shí)間條件設(shè)置A、B、C和D、E、F及G、H、I組分別用以考察CYP3A4、CYP1A2及CYP2E1的最佳檢測(cè)條件。結(jié)果:常規(guī)Western blot不同條件下,對(duì)CYP3A4的檢測(cè)中C組檢測(cè)靈敏度在Hep G2、肝微粒體樣品檢測(cè)中高于A、B、D、E及F組（P ＜0.05）,在組織勻漿、S9樣品檢測(cè)中C組檢測(cè)靈敏度高于A、B、E組（P ＜0.05）;在使用Western blot快速孵育儀孵育條件下,對(duì)CYP3A4的檢測(cè)C組靈敏度在Hep G2、肝組織勻漿及S9樣品檢測(cè)中高于A、B組（P ＜0.05）,在肝微粒... 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及細(xì)胞
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要儀器
    1.2 方法
        1.2.1 Hep G2細(xì)胞樣品總蛋白的制備
        1.2.2 大鼠肝組織勻漿蛋白、S9及微粒體的制備
        1.2.3 蛋白濃度測(cè)定
        1.2.4 Western blot檢測(cè)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 CYP3A4搖床封閉孵育檢測(cè)條件優(yōu)化
    2.2 CYP3A4、1A2及2E1 Western blot快速孵育儀孵育檢測(cè)條件的優(yōu)化
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]細(xì)胞色素P450酶1A2、2D6與多巴胺D2受體基因多態(tài)性對(duì)奧氮平治療精神分裂癥PANSS減分率的影響[J]. 方芳,方海紅,宋明芬,閆盼,施劍飛.  中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2020(13)
[2]細(xì)胞色素P450酶催化的烷烴選擇性羥化[J]. 王曦翎,陳杰,馬娜娜,叢志奇.  化學(xué)學(xué)報(bào). 2020(06)
[3]細(xì)胞色素P450氧化還原酶缺陷癥研究進(jìn)展[J]. 白華磊,朱岷.  兒科藥學(xué)雜志. 2020(03)
[4]免疫印跡法檢測(cè)HIV抗體條帶常見模式分析及在隨訪中的價(jià)值[J]. 王萬(wàn)海,孟真,楊若男,高楠,王慶芳,張磊,王梅芬,明亮.  檢驗(yàn)醫(yī)學(xué). 2020(02)
[5]大鼠肝微粒體CYP450酶對(duì)花旗澤仁主要活性成分代謝影響研究[J]. 呂忠民,趙聰,張宇馳,陳思琦,李佳欣,冉易霖,葛鵬玲.  遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(12)
[6]羊耳菊提取物對(duì)大鼠和人肝微粒體CYP450酶的體外抑制作用[J]. 潘潔,秦蘭,楊淑婷,鞏仔鵬,李勇軍,陸苑.  貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019(11)
[7]不同參數(shù)對(duì)蛋白免疫印跡法結(jié)果的影響[J]. 盧進(jìn),周東東,楊永清,尹磊淼.  生物技術(shù). 2019(04)
[8]細(xì)胞色素氧化酶基因CYP1A2多態(tài)性與新疆漢族和維吾爾族人群冠心病的相關(guān)性[J]. 鄒金國(guó),馬依彤,謝翔.  心臟雜志. 2019(04)
[9]環(huán)孢素代謝相關(guān)酶基因多態(tài)性對(duì)其藥動(dòng)學(xué)及藥效學(xué)的影響[J]. 劉蘊(yùn)星,束慶,姚瑤,王紅,陳智勇,葛衛(wèi)紅.  中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志. 2019(10)
[10]肝細(xì)胞癌中CYP3A43表達(dá)及其預(yù)后價(jià)值[J]. 李建輝,何璐,韋義紅,湯玲,譚廣謀,曲辰,洪健.  國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào). 2018 (24)



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