熒光探針技術(shù)在生命科學學領(lǐng)域的應(yīng)用自上世紀發(fā)展迅速。與傳統(tǒng)檢測方法的成本高、操作復(fù)雜等不足之處相比較,熒光探針技術(shù)憑借高靈敏、低成本、易操作且具有實時檢測等諸多特點,被廣泛應(yīng)用在分析科學等多領(lǐng)域的分子、離子檢測和定量分析之中,尤其在靶向給藥、藥效檢測,人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)平衡的監(jiān)測以及定量定性分析方面具有良好的應(yīng)用前景。生物硫醇是一類含巰基的氨基酸,例如半胱氨酸（Cys）、谷胱甘肽（GSH）、同型半胱氨酸（Hcy）,參與細胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成過程,維持生命活動氧化還原的穩(wěn)定狀態(tài),是生物體酶發(fā)揮作用以及后續(xù)生理活動的一類重要信號分子。研究表明,它們對心血管舒張、神經(jīng)遞質(zhì)傳導等一系列生理活動起著積極的作用。許多常見的疾病與人體內(nèi)生物硫醇含量的異常關(guān)系密切,如半胱氨酸（Cys）的缺乏易導致發(fā)育遲緩、毛發(fā)脫色、肝臟損傷等;谷胱甘肽（GSH）避免機體受氧化應(yīng)激損傷,其濃度與白血病等具有相關(guān)性;同型半胱氨酸（Hcy）濃度過高則是阿爾茲海默癥、心血管疾病和骨質(zhì)疏松產(chǎn)生的前置因素。因此,關(guān)于生物體內(nèi)生物硫醇的檢測對于一些疾病的病理機制研究、早期診斷和治療具有重要作用。小分子生物硫醇易被氧化、化學結(jié)構(gòu)較為相似導致其... 

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 熒光探針的研究背景
    1.2 熒光探針的結(jié)構(gòu)與設(shè)計原理
        1.2.1 探針的母核類型
        1.2.2 探針的信號傳遞機制
        1.2.3 生物熒光探針的常見靶向位點
    1.3 生物熒光探針的響應(yīng)開關(guān)研究
    1.4 硫醇類探針研究進展
    1.5 花菁類探針研究進展
        1.5.1 花菁類探針的特點
        1.5.2 半花菁類探針的研究進展
    1.6 本課題的提出
    參考文獻
第二章 以鄰氯苯甲酸為響應(yīng)開關(guān)的半花菁熒光探針設(shè)計、合成及其檢測CYS性能研究
    2.1 引言
    2.2 探針P1的設(shè)計
    2.3 儀器與試劑
        2.3.1 主要實驗儀器
        2.3.2 主要試劑
    2.4 探針1的合成與結(jié)構(gòu)表征
        2.4.1 探針1的合成路線
        2.4.2 探針P1的合成步驟和結(jié)構(gòu)表征
        2.4.3 機制研究
    2.5 光譜測試條件
        2.5.1 儀器使用
        2.5.2 檢測過程
        2.5.3 檢測限計算
        2.5.4 MTT毒性試驗
        2.5.5 細胞培養(yǎng)及細胞成像
    2.6 結(jié)果與討論
        2.6.1 探針的光學性能
        2.6.2 熒光發(fā)射與加入Cys后的時效關(guān)系
        2.6.3 熒光發(fā)射與Cys的濃度關(guān)系
        2.6.4 離子干擾與選擇性,pH影響
        2.6.5 細胞MTT毒性及細胞熒光成像
    2.7 本章小結(jié)
    參考文獻
第三章 以嘧啶巰基醚為響應(yīng)開關(guān)的半花菁熒光探針設(shè)計、合成及其檢測生物硫醇的性能研究
    3.1 引言
    3.2 設(shè)計思路
    3.3 儀器與試劑
        3.3.1 實驗儀器
        3.3.2 主要試劑
    3.4 目標化合物的合成及表征
        3.4.1 化合物的合成路線
        3.4.2 探針P2-P6的合成步驟和結(jié)構(gòu)表征
        3.4.3 機制研究
    3.5 光譜測試條件
        3.5.1 探針母液、緩沖液和離子儲備液的配置
        3.5.2 測試過程
        3.5.3 細胞培養(yǎng)和MTT毒性試驗
        3.5.4 細胞的熒光成像
    3.6 結(jié)果與討論
        3.6.1 光學性能
        3.6.2 熒光發(fā)射與加入Cys/Hcy的時效關(guān)系
        3.6.3 熒光發(fā)射與Cys/Hcy濃度的關(guān)系
        3.6.4 pH的影響
        3.6.5 離子干擾和離子選擇
        3.6.6 細胞MTT毒性試驗及細胞熒光成像
    3.7 本章小結(jié)
    參考文獻
第四章 以乙酸酯鍵為響應(yīng)開關(guān)的半花菁熒光探針設(shè)計、合成及其檢測生物硫醇的初步研究
    4.1 引言
    4.2 探針的響應(yīng)機制
    4.3 儀器與儀器
        4.3.1 主要實驗儀器
        4.3.2 主要試劑
    4.4 目標化合物的合成過程
    4.5 探針的CYS響應(yīng)作用及響應(yīng)機制初步探討
    4.6 結(jié)論
附錄
攻讀研究生期間的科研情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]生物小分子巰基化合物熒光探針研究進展[J]. 祝新月,王建西,張海霞.  分析測試技術(shù)與儀器. 2017(03)
[2]半花菁熒光染料光穩(wěn)定性的量子化學計算[J]. 于鵬美,莊亞麗,畢力,秦傳香,陳國強.  紡織學報. 2016(06)



本文編號：3654099