目的探討替普瑞酮（GGA）對百草枯（PQ）誘導(dǎo)的SH-SY5Y氧化應(yīng)激模型細(xì)胞中TAR DNA/RNA結(jié)合蛋白43（TDP43）蛋白異常聚集的影響及其相關(guān)機(jī)制。方法將SH-SY5Y細(xì)胞分為無任何處理組（A組）,以100μmol/L的GGA處理SH-SY5Y細(xì)胞24 h組（B組）,分別以0、20、50、100μmol/L的GGA處理氧化應(yīng)激模型細(xì)胞24 h組（C～F組）。分別用MTT比色法、流式細(xì)胞儀與免疫印跡法（Western blot）檢測各組SH-SY5Y細(xì)胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表達(dá)水平、P62蛋白表達(dá)水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值。為觀察GGA對TDP43蛋白表達(dá)水平影響是否通過自噬發(fā)揮作用,將SH-SY5Y細(xì)胞分為無任何處理組（A組）,分別以0、50、50μmol/L的GGA處理氧化應(yīng)激模型細(xì)胞24 h組（G～I(xiàn)組）,其中I組用5 mmol/L的3-MA阻斷自噬,利用Western blot檢測各組SH-SY5Y細(xì)胞TDP43蛋白表達(dá)水平和LC3BⅡ/Ⅰ比值。結(jié)果 A～F組SH-SY5Y細(xì)胞的存活率、凋亡率、TDP43蛋白表達(dá)水平、P62蛋白表達(dá)水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比... 

【文章來源】：精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)雜志. 2020,35(03)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞模型的制備及細(xì)胞免疫熒光化學(xué)染色檢測細(xì)胞內(nèi)TDP43
    1.3 MTT比色法檢測SH-SY5Y細(xì)胞存活率
    1.4 流式細(xì)胞儀檢測SH-SY5Y細(xì)胞凋亡情況
    1.5 免疫印跡法(Western blot)檢測細(xì)胞中P62、TDP43蛋白表達(dá)水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值
    1.6 Western blot檢測3-MA阻斷自噬后細(xì)胞中TDP43蛋白表達(dá)水平
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 細(xì)胞免疫熒光化學(xué)染色檢測細(xì)胞模型內(nèi)TDP43表達(dá)情況
    2.2 各組SH-SY5Y細(xì)胞存活率和凋亡率比較
    2.3 各組SH-SY5Y細(xì)胞中TDP43、P62蛋白表達(dá)水平及LC3BⅡ/Ⅰ比值比較
    2.4 3-MA阻斷自噬后各組細(xì)胞中TDP43 蛋白與LC3BⅡ/Ⅰ比值情況
3 討 論



本文編號：3632637