目的:二甲雙胍（metformin）作為臨床一線的治療Ⅱ型糖尿病的雙胍類口服降糖藥,除具有降糖和保護心血管作用外,還可通過抑制內(nèi)皮細胞（Endothelial cells,ECs）的增殖、遷移以及相關(guān)信號傳導通路,發(fā)揮抗血管生成作用。然而,其具體調(diào)控細節(jié)及作用機制還不清楚,有待進一步研究和闡釋。microR-21（miR-21）廣泛表達于多種組織,并且參與多種心血管疾病的發(fā)生發(fā)展。研究顯示,miR-21通過靶向抑制多種靶基因,進而參與調(diào)節(jié)內(nèi)皮細胞的增殖、遷移和凋亡等功能,在血管生成中扮演著重要的角色。最新研究揭示,二甲雙胍能夠誘導內(nèi)皮細胞中部分miRNA表達異常,其中二甲雙胍處理可導致miR-21表達顯著降低,提示是否存在二甲雙胍通過誘導miR-21下調(diào)表達參與對內(nèi)皮細胞抑制以及抗血管生成?因此,本文將從miRNA的視角研究二甲雙胍抗血管生成的分子調(diào)控機制,研究二甲雙胍處理過程中miR-21的上游影響因子和下游靶向調(diào)控因子及其可能調(diào)節(jié)的信號通路,進一步查明miR-21介導的對內(nèi)皮細胞的增殖、遷移能力以及對體外血管生成的影響,從而探討二甲雙胍誘導的miR-21信號通路在血管生成中的作用及... 

【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

二甲雙胍下調(diào)HUVECs中miR-21的表達

圖 2. 二甲雙胍通過下調(diào) miR-21 的表達調(diào)節(jié) HUVECs 的增殖和遷移（。A）miR-21mimics、inhibitors 及相應陰性對照對 HUVECs 中 miR-21 表達的影響。*與對照組比較，p<0.05；#與各自陰性對照比較，p<0.05。（B）二甲雙胍通過下調(diào) miR-21的表達調(diào)節(jié) HUVECs 的增殖。*與對照組比較，p<0.05；#與二甲雙胍組比較，p<0.05。（C、D）二甲雙胍通過下調(diào) miR-21 的表達調(diào)節(jié) HUVECs 的遷移能力。*與對照組比較，p<0.05；#與二甲雙胍組比較，p<0.05。Figure 2 ．metformin-mediated inhibition of HUVECs proliferation and migrationthrough regulating intracellular level of miR-21. (A)Effects of miR-21 mimics,inhibitors and NC on the expression of miR-21 in HUVECs.*P<0.05 compared tocontrol.#p<0.05 compared to respective NC. (B)metformin-mediated inhibition ofHUVECs proliferation through regulating intracellular level of miR-21.*P<0.05compared to control.#p<0.05 compared to metformin alone.(C,D)metformin-mediatedinhibition of HUVECs migration through regulating intracellular level of miR-21.

圖 3. PTEN 和 SMAD7 是 miR-21 的直接靶基因。（A）miR-21 與 PTEN,SMAD7基因 mRNA 3’-UTR 的結(jié)合位點。（B）PTEN mRNA 熒光素酶報告基因?qū)嶒�，與相應陰性對照組比較，p<0.05。（C）SMAD7 mRNA 熒光素酶報告基因?qū)嶒灐?與相應陰性對照組比較，p<0.05。Figure 3 PTEN and SMAD7 are direct targets of miR-21. (A)The region nucleotidesof PTEN and SMAD7 3’-UTR containing predicted target binding sites for miR-21.(B) luciferase assays of PTEN mRNA. (C)luciferase assays of SMAD7.*P<0.05compared to respective NC.4.miR-21 調(diào)控 HUVECs 中 PTEN,SMAD7 的表達利用 qRT-PCR 和 western blot 檢測 miR-21 對 HUVECs 中 PTEN和 SMAD7 mRNA 和蛋白表達的影響，結(jié)果如圖 4 所示，與空白對照

【參考文獻】：
期刊論文
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[3]冠心病患者血漿循環(huán)miR-126的表達及其對血管內(nèi)皮細胞的影響[J]. 鄭志偉,勞海燕,余細勇,陳紀言,林秋雄,麥麗萍,鐘詩龍.  中國病理生理雜志. 2011(12)



本文編號：3582312