目的:血管活性腸肽（Vasoactive intestinal peptide,VIP）作為一種腦腸肽,與神經(jīng)肽垂體腺苷酸環(huán)化酶激活多肽（Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP）具有高度同源性;對神經(jīng)退行性疾病,如阿爾茨海默癥等的治療具有潛在的應用價值。VIP可通過非特異性的跨膜作用穿越血腦屏障（Blood–brain barrier,BBB）,但是其在體內(nèi)較短的半衰期和較低的穿越生物屏障的效率阻止其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的應用。TAT由11個氨基酸殘基組成,是一種具有有效提高生物屏障穿越作用的穿膜肽（Cell penetrating peptide）。本文利用基因工程原理及技術(shù)構(gòu)建能有效穿越BBB的重組蛋白質(zhì)VIP-TAT（M/L）,利用蛋白內(nèi)含肽介導蛋白純化相關(guān)技術(shù)實現(xiàn)其制備;通過建立神經(jīng)細胞凋亡模型,檢測重組多肽VIP-TAT（M/L）的抗凋亡能力;并進一步對其抗神經(jīng)細胞凋亡機制進行探索。方法:通過設計編碼VIP-TAT（M/L）的基因,克隆到表達載體pKYB,構(gòu)建重組表達載體p KYB-VIP-TAT（M/L）... 

【文章來源】：暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

PTD的功能Fig.1-1ThefunctionofPTD

癥免疫治療等研究領(lǐng)域均具有良好的應用前景。.3 蛋白內(nèi)含肽介導純化.3.1 蛋白內(nèi)含肽簡介蛋白內(nèi)含肽(intein)是 20 世紀 90 年代發(fā)現(xiàn)的一種新的蛋白功能元件[68,69]。它存在于前體蛋白質(zhì)的多肽鏈內(nèi)部一段氨基酸序列。在轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓鞍踪|(zhì)時，通過非酶促的轉(zhuǎn)應即通過自身催化作用將其兩端(N 端和 C 端)的蛋白外顯肽(extein)連接，而自身則從蛋白質(zhì)中脫落下來，此過程不需要任何能量、輔助因子和酶，該過程主要涉及到化學重排，蛋白質(zhì)自剪切過程完全由蛋白質(zhì)內(nèi)含子的氨基酸介導，與內(nèi)含子的氨基酸序列量以及位置有關(guān)[70]。自從 1990 年從啤酒酵母(S.cerevisiae)中發(fā)現(xiàn)了第 1 個蛋白內(nèi)含肽，陸續(xù)在古細菌、單細胞真核生物、真細菌中相繼發(fā)現(xiàn)了大約 120 種的蛋白內(nèi)含肽。內(nèi)含肽結(jié)構(gòu)(見 Fig.1-2)。

暨南大學碩士學位論文會完全被封阻。 (2) 通過剪切位點 C 末端的半胱氨酸或絲分枝酯鍵中間體。剪切連接處下游半胱氨酸的巰基或絲氨酸剪切處的前面的羰基碳原子，導致 N 端 extein轉(zhuǎn)移到 C 端 ex結(jié)構(gòu)的形成是可逆的。 (3) InteinC 末端剪切處的天冬酰胺分枝酯鍵中間體斷裂, 產(chǎn)生帶有 C 末端琥珀酰亞胺環(huán)的 intein。倒數(shù)第二個氨基酸組氨酸對于鄰近天冬酰胺的環(huán)化有輔基酸時，會影響 C 末端的切割反應。 (4) 琥珀酰亞胺環(huán)水解N 或 S－N �；嘏�，產(chǎn)生穩(wěn)定自然的肽鍵[71]。

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]血管活性腸肽調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細胞功能減少轉(zhuǎn)基因AD小鼠老年斑沉積的實驗研究[D]. 宋敏.第三軍醫(yī)大學 2007

碩士論文
[1]B族G蛋白偶聯(lián)受體PAC1二聚化及其N端HSDCIF基序?qū)ζ涠刍挠绊慬D]. 郭曉令.暨南大學 2013
[2]重組多肽VIP-TAT的制備及其抗東莨菪堿誘導的記憶缺失作用的研究[D]. 曾智星.暨南大學 2013



本文編號：3578031