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Pam3CSK4增強(qiáng)GM-CSF誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞對(duì)MRSA的殺菌功能及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-08 14:08
  目的:Pam3CSK4是人工合成TLR2(Toll-like receptor 2)配基,可以通過(guò)TLR2影響中性粒細(xì)胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN)功能,本課題應(yīng)用Pam3CSK4預(yù)處理GM-CSF誘導(dǎo)的小鼠骨髓中性粒細(xì)胞,探討預(yù)處理后的中性粒細(xì)胞對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)殺菌抑菌功能的影響,并初步探討其相關(guān)機(jī)制,為MRSA的免疫學(xué)防治提供新思路。方法:1、Pam3CSK4預(yù)處理GM-CSF誘導(dǎo)的中性粒細(xì)胞24h、48h后,流式檢測(cè)預(yù)處理后中性粒細(xì)胞對(duì)FITC標(biāo)記的熱滅活耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(heatkilled methicillin resistant staphylococcus aureus,HK-MRSA)、熱滅活大腸埃希菌(heat-killed Escherichia coli,HK-E.coli)的吞噬作用;用平板計(jì)數(shù)法檢測(cè)Pam3CSK4預(yù)處理24h、48h的中性粒細(xì)胞對(duì)MRSA、E.coli的殺菌或抑菌功能。2、Transw... 

【文章來(lái)源】:南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 引言
第2章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、試劑與設(shè)備
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及菌株
        2.1.2 主要的實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備
        2.1.4 主要的試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 小鼠骨髓細(xì)胞制備
        2.2.2 MRSA及FITC標(biāo)記的HK-MRSA的制備
        2.2.3 磁珠分選中性粒細(xì)胞
        2.2.4 GM-CSF誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)檢測(cè)
        2.2.5 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞吞噬功能檢測(cè)
        2.2.6 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞殺菌抑菌功能檢測(cè)
        2.2.7 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞趨化功能檢測(cè)
        2.2.8 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞脫顆粒檢測(cè)
        2.2.9 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)檢測(cè)
        2.2.10 Pam3CSK4預(yù)處理后中性粒細(xì)胞炎癥細(xì)胞因子檢測(cè)
        2.2.11 Pam3CSK4對(duì)中性粒細(xì)胞細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的影響
        2.2.12 Pam3CSK4對(duì)中性粒細(xì)胞信號(hào)通路調(diào)控的檢測(cè)
        2.2.13 MAPK,PI3K通路抑制劑對(duì)中性粒細(xì)胞吞噬及殺菌功能的抑制作用
        2.2.14 MAPK,PI3K通路抑制劑對(duì)中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)的抑制作用
        2.2.15 MAPK,PI3K通路抑制劑對(duì)中性粒細(xì)胞脫顆粒的抑制作用…
        2.2.16 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 結(jié)果
    3.1 GM-CSF誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞純度及形態(tài)測(cè)定
    3.2 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞吞噬功能的影響
    3.3 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞殺菌功能的影響
    3.4 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞趨化功能的影響
    3.5 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞脫顆粒的影響
    3.6 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā)的影響
    3.7 Pam3CSK4預(yù)處理對(duì)中性粒細(xì)胞細(xì)胞因子表達(dá)的影響
    3.8 Pam3CSK4預(yù)處理中性粒細(xì)胞對(duì)信號(hào)通路蛋白的影響
    3.9 信號(hào)通路抑制劑對(duì)Pam3CSK4介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞功能的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜 述 TLRs 調(diào)節(jié)中性粒細(xì)胞抗菌免疫功能研究現(xiàn)狀
    參考文獻(xiàn) (References)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]2015年CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)[J]. 胡付品,朱德妹,汪復(fù),蔣曉飛,徐英春,張小江,張朝霞,季萍,謝軼,康梅,王傳清,王愛(ài)敏,徐元宏,沈繼錄,孫自鏞,陳中舉,倪語(yǔ)星,孫景勇,褚云卓,田素飛,胡志東,李金,俞云松,林潔,單斌,杜艷,郭素芳,魏蓮花,吳玲,張泓,王春,胡云建,艾效曼,卓超,蘇丹虹,汪瑞忠,房華,俞碧霞,趙勇,龔萍.  中國(guó)感染與化療雜志. 2016(06)
[2]成年大面積燒傷死亡患者的細(xì)菌感染及耐藥情況分析[J]. 鄧呈亮,詹日興,劉洋,郭小偉,吳軍,彭毅志,羅高興.  中華燒傷雜志. 2016 (11)



本文編號(hào):3576693

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