目的探討不同活化程度的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞與炎性介質(zhì)之間的關(guān)系及可能的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,建立高效穩(wěn)定的BV2小膠質(zhì)細(xì)胞激活模型。方法體外常規(guī)培養(yǎng)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞,CCK-8法繪制細(xì)胞生長曲線;采用不同濃度的脂多糖（LPS）（0.25、0.5、1、2、4μg/mL）誘導(dǎo)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞24 h,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化;應(yīng)用CCK-8法和Griess法分別檢測細(xì)胞活性和一氧化氮（NO）水平;應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法（Western blot）和實時熒光定量PCR（qRT-PCR）分別檢測Toll樣受體4（TLR4）、髓樣分化因子88（MyD88）蛋白和mRNA的表達(dá)。同時選取濃度為1μg/mL的LPS誘導(dǎo)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞24 h,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）濃度。結(jié)果 CCK-8法和Griess法結(jié)果顯示:BV2小膠質(zhì)細(xì)胞傳代培養(yǎng)后第2～3天處于對數(shù)生長期;LPS能明顯降低BV2小膠質(zhì)細(xì)胞存活率及提高NO釋放量（均P<0.05）,且在實驗劑量范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系。Western blot和qRT-... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2020,49(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

BV2小膠質(zhì)細(xì)胞生長曲線

靜息狀態(tài)BV2細(xì)胞形態(tài)(×100)

激活狀態(tài)BV2細(xì)胞形態(tài)(×100)


本文編號：3555916