背景:硬脂酰輔酶A去飽和酶（SCD1）是調(diào)節(jié)脂肪酸不飽和度的關(guān)鍵酶。腫瘤細(xì)胞中,SCD1可作為維持增殖和存活的中心調(diào)節(jié)器。很多研究證實,SCD1抑制在腫瘤細(xì)胞中具有普遍的抗增殖作用,如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胃癌及腸癌等�，F(xiàn)有的研究普遍認(rèn)為,SCD1主要通過調(diào)節(jié)SFA/MUFA比值影響腫瘤增殖,而我們的最新研究顯示,SCD1抑制通過促進神經(jīng)酰胺從頭合成從而使腸癌細(xì)胞發(fā)生凋亡。在前期研究的基礎(chǔ)上,本課題將進一步探究SCD1抑制與神經(jīng)酰胺從頭合成之間的調(diào)控關(guān)系。課題從RNAseq檢測入手,發(fā)現(xiàn)SCD1抑制后,腸癌細(xì)胞中差異基因最大程度地富集在NF-κB信號通路上,提示我們SCD1抑制的作用靶點與NF-κB密切相關(guān)。因此,我們提出假說:SCD1抑制通過NF-κB信號通路影響神經(jīng)酰胺的從頭合成,從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡。方法:采用人結(jié)腸癌和卵巢癌細(xì)胞作為工具細(xì)胞,應(yīng)用RNA seq對SCD1抑制劑給藥前后的細(xì)胞進行測序,并分析差異基因表達。分別應(yīng)用SCD1基因敲低和小分子抑制劑進行調(diào)控,HPLC/MS2檢測細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)酰胺和游離脂肪酸的含量變化,CCK8、Real-time PCR、Western ... 

【文章來源】：廈門大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１?ＳＣＤｌ催化飽和脂肪酰輔酶Ａ形成雙鍵產(chǎn)生棕櫚油酰輔酶Ａ和油??酰輔酶Ａ??

圖１．２?ＳＣＤ?１調(diào)節(jié)脂質(zhì)合成??

也是癌細(xì)胞中主要的脂肪生成代謝的關(guān)鍵因素。更重要的是，這些生化變??化是腫瘤形成的先決條件，如細(xì)胞增殖率高，存活率高，侵襲性高，導(dǎo)致腫瘤形??成和轉(zhuǎn)移（圖１．３）?［２９］。關(guān)于癌癥代謝的早期研究表明癌細(xì)胞對ＳＦＡ和ＭＵＦＡ??都有特殊的要求，因此推測在細(xì)胞復(fù)制過程中脂肪酸合成和去飽和途徑的酶活性??會被及時激活。支持這一假設(shè)的最初證據(jù)雖然是間接的，但卻發(fā)現(xiàn)激活細(xì)胞周期??的激素和細(xì)胞因子，如ＴＧＦ－ｐ，ＰＤＧＦ，ＥＧＦ和胰島素等可刺激細(xì)胞中ＳＣＤ１的??５??


本文編號：3554184