目的:多發(fā)性骨髓瘤（Multiple Myeloma,MM）是一組以骨髓中克隆性漿細(xì)胞異常擴(kuò)增為特點(diǎn)的血液系統(tǒng)常見的惡性疾病,其發(fā)病率在血液系統(tǒng)腫瘤當(dāng)中占據(jù)第二位。MM存在一系列嚴(yán)重的并發(fā)癥,嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。迄今為止,MM仍不可治愈,故尋找新的治療方式、提高患者治療后的生存質(zhì)量十分重要。目前,MM迎來了免疫治療時代,而靶向治療正是免疫治療的重要組成部分。理想的靶點(diǎn)是在惡性漿細(xì)胞上高表達(dá)的膜抗原,而在正常細(xì)胞及組織不表達(dá)（或者低表達(dá)）。發(fā)現(xiàn)理想的靶點(diǎn),設(shè)計靶向藥物,同時募集并活化免疫細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng),可能是MM治療的新方向。由此可見,尋找新的靶點(diǎn)對于MM的治療至關(guān)重要。本課題主要研究內(nèi)容包括:（1）探索多發(fā)性骨髓瘤治療的新靶點(diǎn)（2）探討新靶點(diǎn)是否具有臨床判斷預(yù)后的價值（3）設(shè)計靶向親和該靶點(diǎn)的肽類候選物研究方法:1、生物信息學(xué)分析利用大樣本公共數(shù)據(jù)庫GEO（GEO,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo）中的包含正常漿細(xì)胞對照的MM數(shù)據(jù)集作為分析對象。篩選MM患者高表達(dá)而正常漿細(xì)胞低表達(dá)的差異基因;篩選在MM發(fā)病中起關(guān)鍵作用的基因。2、臨床驗(yàn)證靶點(diǎn)mRN...

【文章來源】： 中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

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【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分:基于公共大樣本數(shù)據(jù)挖掘分析篩選多發(fā)性骨髓瘤關(guān)鍵基因HLA-E
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 細(xì)胞來源
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 利用公共數(shù)據(jù)庫尋找多發(fā)性骨髓瘤高表達(dá)的差異基因
            2.2.2 驗(yàn)證關(guān)鍵基因mRNA在臨床患者中的表達(dá)情況
            2.2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 篩選多發(fā)性骨髓瘤高表達(dá)差異基因
        3.2 構(gòu)建蛋白相互作用網(wǎng)
        3.3 確認(rèn)關(guān)鍵集簇
        3.4 篩選核心基因
        3.5 確認(rèn)HLA-E作為多發(fā)性骨髓瘤的關(guān)鍵靶點(diǎn)
        3.6 關(guān)鍵集簇及核心基因在多發(fā)性骨髓瘤發(fā)病中的作用
        3.7 驗(yàn)證HLA-E在臨床患者中mRNA的表達(dá)情況
    4 討論
第二部分:HLA-E在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 材料與試劑
            2.1.1 標(biāo)本來源
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 患者的納入標(biāo)準(zhǔn)
            2.2.2 多發(fā)性骨髓瘤分期標(biāo)準(zhǔn)
            2.2.3 臨床資料收集
            2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)
            2.2.5 免疫組織化學(xué)染色
            2.2.6 免疫組化結(jié)果評分
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 流式細(xì)胞術(shù)檢測HLA-E在骨髓瘤患者中的表達(dá)及臨床參數(shù)分析
            3.1.1 患者的一般情況
            3.1.2 流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)HLA-E在骨髓瘤患者中高表達(dá)
            3.1.3 HLA-E在晚期及高危骨髓瘤中高表達(dá)
        3.2 免疫組化檢測HLA-E在骨髓瘤中的表達(dá)情況及臨床參數(shù)分析
            3.2.1 患者一般情況
            3.2.2 HLA-E在骨髓瘤及非惡性漿細(xì)胞病中的差異表達(dá)
            3.2.3 HLA-E在多發(fā)性骨髓瘤晚期患者中高表達(dá)
            3.2.4 HLA-E高表達(dá)是多發(fā)性骨髓瘤預(yù)后不良因素
            3.2.5 建立含有HLA-E表達(dá)情況的分期體系
    4 討論
第三部分:靶向HLA-E親和肽的設(shè)計及功能驗(yàn)證
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 細(xì)胞來源
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 MOE設(shè)計靶向親和肽
            2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
            2.2.3 合成多肽
            2.2.4 流式細(xì)胞術(shù)
            2.2.5 構(gòu)建高表達(dá)HLA-E的骨髓瘤細(xì)胞系
            2.2.6 細(xì)胞免疫熒光染色
            2.2.7 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 利用MOE設(shè)計靶向HLA-E的親和肽
        3.2 構(gòu)建靶向親和HLA-E的肽庫
        3.3 驗(yàn)證多肽與高表達(dá)HLA-E細(xì)胞系的親合性
            3.3.1 合成帶有熒光標(biāo)記的親和肽
            3.3.2 流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)肽與HLA-E的親和性
            3.3.3 免疫熒光證實(shí)P3與骨髓瘤細(xì)胞系HLA-E的親和性
        3.4 驗(yàn)證多肽與高表達(dá)HLA-E患者骨髓瘤細(xì)胞的親合性
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3544441