本研究旨在探討依達(dá)拉奉（edaravone,ED）在腦缺血再灌注損傷中發(fā)揮神經(jīng)元保護(hù)作用與Nrf2信號(hào)分子間的關(guān)系。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)利用腦內(nèi)腦中動(dòng)脈閉塞（middle cerebral artery occlusion model,MCAO）建立SD大鼠腦缺血再灌注損傷模型,體外實(shí)驗(yàn)采用過氧化氫（H₂O₂）損傷PC12細(xì)胞建立氧化應(yīng)激模型。通過TTC染色、HE染色、Nissl染色來檢測(cè)大腦的病理狀態(tài)。測(cè)定活性氧（reactive oxygen species, ROS）、丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性,來反映氧化應(yīng)激水平。此外,通過Hoechst 33342染色和線粒體膜電位（mitochondrial membrane potential, MTP）測(cè)定,探究細(xì)胞水平的損傷。采用免疫組織化學(xué)和蛋白質(zhì)印記測(cè)定Nrf2的表達(dá)。構(gòu)建Nrf2敲除的PC12細(xì)胞系,證實(shí)Nrf2信號(hào)分子抑制氧化應(yīng)激損傷的作用。結(jié)果提示,經(jīng)依達(dá)拉奉給藥后,在動(dòng)物體內(nèi)水平,TTC染色... 

【文章來源】：中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試劑與儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)
    1.3 MCAO模型的建立
    1.4 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分
    1.5 HE染色
    1.6 Nissl染色
    1.7 細(xì)胞模型的建立與觀察
    1.8 細(xì)胞存活率檢測(cè)
    1.9 Hoechst33342染色
    1.10 線粒體跨膜電位檢測(cè)
    1.11 氧化應(yīng)激水平檢測(cè)
    1.12 免疫組織化學(xué)檢測(cè)核因子-E2相關(guān)因子2的表達(dá)
    1.13 Nrf2基因敲除PC2細(xì)胞的構(gòu)建
    1.14 Western 印跡檢測(cè)Nrf2蛋白質(zhì)表達(dá)
    1.15 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 依達(dá)拉奉降低神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分及減少腦梗死體積
    2.2 依達(dá)拉奉改善腦缺血再灌注誘導(dǎo)的腦組織病理
    2.3 依達(dá)拉奉減低腦缺血再灌注誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷
    2.4 依達(dá)拉奉降低H2O2誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷
    2.5 依達(dá)拉奉能提高H2O2誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的線粒體跨膜電位
    2.6 依達(dá)拉奉通過增加Nrf2的表達(dá)來降低氧化應(yīng)激損傷
    2.7 Nrf2基因敲除PC12細(xì)胞和空載體PC12細(xì)胞中SOD、CAT的活性
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]線粒體中的NF-κB調(diào)節(jié)脂多糖誘導(dǎo)損傷后PC12細(xì)胞的凋亡（英文）[J]. Ying SONG,Zhuo-chao WU,Wei DING,Yun BEI,Zhi-yun LIN.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2018(06)



本文編號(hào)：3541927