心腦血管疾病是困擾人類健康的頭號公敵,據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),全球每年約有1750萬人死于心腦血管疾病,占所有死亡人數(shù)的1/3。艾美仕醫(yī)藥健康（IMS Health）研究機(jī)構(gòu)估計(jì),到2020年全球?qū)⒂?500萬人死于心腦血管疾病。而受困于心腦血管疾病的人群更是難以估計(jì)。神經(jīng)退行性疾病是心腦血管疾病的重要分支,其主要表現(xiàn)為大腦和脊髓神經(jīng)元隨著人體老化而逐漸死亡所產(chǎn)生的認(rèn)知以及運(yùn)動功能性障礙,目前的研究尚不能清楚解釋發(fā)病的原因和機(jī)理。目前發(fā)病率較高的三類神經(jīng)退行性疾病為：阿茲海默癥、帕金森癥和肌萎縮側(cè)索硬化癥,其病癥的初期表現(xiàn)分別為：短期記憶衰退、運(yùn)動遲緩和肌無力,發(fā)展到后期會出現(xiàn)：記憶障礙、小腦萎縮和肌肉萎縮,嚴(yán)重影響了人類健康和生活質(zhì)量。當(dāng)前對于神經(jīng)退行性疾病的研究還很有限,無法做的疾病治愈。市售藥物主要集中在兩類：擬神經(jīng)遞質(zhì)類藥物和神經(jīng)遞質(zhì)代謝酶抑制劑,具有作用靶點(diǎn)單一、毒副作用大、易產(chǎn)生耐藥性等缺點(diǎn)。因此,獲得低毒性的替代治療藥物一直是研究熱點(diǎn),也是本論文的研究重點(diǎn)之一。海洋藥物資源有著廣闊的開發(fā)前景,由于海洋特殊的理化環(huán)境,涌現(xiàn)了一大批結(jié)構(gòu)新穎,功能特殊,具有成藥前景的天然產(chǎn)物。殼寡糖是經(jīng)... 

【文章來源】：中國海洋大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：145 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
    1. 神經(jīng)退行性疾病的分類及特點(diǎn)
        1.1 阿茲海默癥的簡介及可能的發(fā)病機(jī)制
        1.2 肌肉萎縮側(cè)索硬化癥的簡介及可能的發(fā)病機(jī)制
        1.3 帕金森癥的簡介及可能的發(fā)病機(jī)制
        1.4 亨廷頓癥的簡介及可能發(fā)病機(jī)制
    2. 神經(jīng)退行性疾病研究現(xiàn)狀
        2.1 神經(jīng)退行性疾病之間的聯(lián)系
            2.1.1 遺傳學(xué)上的相關(guān)性
            2.1.2 蛋白水平的相關(guān)性
                2.1.2.1 功能蛋白的積聚
                2.1.2.2 蛋白降解的途徑
            2.1.3 病理表現(xiàn)的相關(guān)性
                2.1.3.1 線粒體功能障礙
                2.1.3.2 軸突運(yùn)輸障礙
                2.1.3.3 細(xì)胞的程序化死亡
        2.2 神經(jīng)退行性疾病的研究方法
            2.2.1 常見的細(xì)胞模型
            2.2.2 常見的動物模型
            2.2.3 致病假說
        2.3 神經(jīng)退行性疾病的治療藥物及潛在治療方案
    3. 殼寡糖簡介
    4. 蝦青素簡介
    5. 糖胺聚糖與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的關(guān)系
    6. 課題研究方法、目的及意義
    參考文獻(xiàn)
第一章 PC12細(xì)胞分化培養(yǎng)及細(xì)胞損傷模型的建立
    1. 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)步驟
        2.1 PC-12細(xì)胞的體外培養(yǎng)
        2.2 NGF誘導(dǎo)細(xì)胞分化
        2.3 NGF誘導(dǎo)濃度篩選
        2.4 細(xì)胞周期測定
        2.5 Western blot檢測
        2.6 免疫熒光共聚焦檢測
        2.7 體外神經(jīng)細(xì)胞損傷模型的建立
        2.8 數(shù)據(jù)處理
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.1 NGF分化誘導(dǎo)濃度的選擇
            3.1.1 不同濃度NGF的分化誘導(dǎo)率
            3.1.2 不同濃度NGF對PC12神經(jīng)突起的影響
            3.1.3 不同濃度NGF對PC12細(xì)胞活力的影響
        3.2 細(xì)胞周期
        3.3 周期相關(guān)蛋白的表達(dá)變化
        3.4 PC12交感神經(jīng)元活性檢測
        3.5 體外細(xì)胞模型的建立
        3.6 細(xì)胞模型穩(wěn)定性
    4. 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第二章 殼寡糖及其修飾物對神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用
    1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 PC12細(xì)胞體外培養(yǎng)
        2.2 樣品細(xì)胞毒性測定
        2.3 樣品對谷氨酸誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的保護(hù)
        2.4 LDH、ROS、MMP指標(biāo)測定
        2.5 Caspase 3,9酶活力檢測
        2.6 Western blot檢測
        2.7 免疫熒光共聚焦檢測
        2.8 數(shù)據(jù)處理
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.1 樣品細(xì)胞毒性測定
        3.2 樣品對谷氨酸誘導(dǎo)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用
        3.3 LDH、ROS、MMP測定
        3.4 全乙�；瘹す烟菍τ谏窠�(jīng)細(xì)胞凋亡的影響
    4 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第三章 蝦青素的神經(jīng)保護(hù)作用研究
    1. 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 PC12細(xì)胞的體外培養(yǎng)
        2.2 蝦青素細(xì)胞毒性測試
        2.3 蝦青素對谷氨酸誘導(dǎo)PC12凋亡的保護(hù)作用
        2.4 LDH和ROS的測定
        2.5 SOD,GR,GPX的測定
        2.6 細(xì)胞凋亡檢測
        2.7 MMP測定
        2.8 Western blot檢測
        2.9 Ca(2+)熒光共聚焦測試和NF-κB免疫熒光測試
        2.10 數(shù)據(jù)處理
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.1 蝦青素細(xì)胞毒性測定
        3.2 蝦青素對于谷氨酸神經(jīng)細(xì)胞損傷的抑制作用
        3.3 蝦青素對谷氨酸損傷PC12細(xì)胞LDH和ROS釋放的影響
        3.4 蝦青素對谷氨酸損傷PC12細(xì)胞SOD,GR,GPx酶活性的影響
        3.5 蝦青素對線粒體膜電位的影響
        3.6 蝦青素對神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響
        3.7 蝦青素對Ca~(2+)內(nèi)流的影響
        3.8 細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的檢測
        3.9 蝦青素對NF-κB和MAPK信號通路的影響
    4. 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第四章 海洋來源生物堿結(jié)構(gòu)類似物神經(jīng)保護(hù)活性篩選
    1. 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 PC12細(xì)胞的體外培養(yǎng)
        2.2 海洋生物堿類似物細(xì)胞毒性測試
        2.3 海洋生物堿類似物對谷氨酸誘導(dǎo)PC12凋亡的保護(hù)作用
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        3.1 Neolamellarin A類似物的神經(jīng)細(xì)胞毒和保護(hù)活性
        3.2 Naamidine A類似物的神經(jīng)細(xì)胞毒和保護(hù)活性
    4. 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
第五章 糖胺聚糖在PC12分化過程中的含量和組成變化
    1. 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)步驟
        2.1 PC12分化培養(yǎng)
        2.2 FGF因子結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        2.3 分化PC12細(xì)胞糖胺聚糖的提取
        2.4 硝酸纖維素薄膜電泳
        2.5 HPLC、HPLC-MS分析提取的糖胺聚糖單糖組成和含量
            2.5.1 樣品的水解
            2.5.2 PMP衍生化反應(yīng)
            2.5.3 色譜條件
            2.5.4 質(zhì)譜條件
    3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.1 FGF因子結(jié)合實(shí)驗(yàn)
        3.2 糖胺聚糖電泳實(shí)驗(yàn)
        3.3 糖胺聚糖的液相色譜分析
    4. 本章小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
致謝
個人簡歷
發(fā)表和參與發(fā)表的文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Proteoglycans: Road Signs for Neurite Outgrowth[J]. Justin A.Beller,Diane M.Snow.  Neural Regeneration Research. 2014(04)
[2]干細(xì)胞治療神經(jīng)退行性疾病的前景與問題[J]. 熊杰,寧麗娜,王再領(lǐng),石學(xué)敏.  中國組織工程研究. 2013(19)
[3]帕金森病體外細(xì)胞模型[J]. 李婷婷,梁迎春.  醫(yī)學(xué)綜述. 2013(06)
[4]氯化銅過度負(fù)荷對星形膠質(zhì)細(xì)胞的氧化損傷機(jī)制[J]. 胡皓璐,王曉平,趙艷玲.  中華臨床醫(yī)師雜志(電子版). 2011(11)
[5]阿爾茨海默病的神經(jīng)免疫炎癥發(fā)病機(jī)制及其治療研究進(jìn)展[J]. 馬英,曹云鵬.  中國老年學(xué)雜志. 2010(21)
[6]阿爾茨海默病治療藥物的研究進(jìn)展[J]. 郭靜靜,廖紅.  中國藥科大學(xué)學(xué)報. 2010(05)
[7]石杉堿甲對阿爾茨海默病細(xì)胞模型的防護(hù)作用[J]. 程永杰,李紅杰,孫肖爽,余莉,暢美季,徐曉燕.  中國老年學(xué)雜志. 2010(17)
[8]殼寡糖與Aβ-Cu復(fù)合物相互作用的研究方法[J]. 徐魏,戴雪伶,黃漢昌,耿潔敏,姜招峰.  北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2009(04)
[9]20（S）-O-喜樹堿肉桂酸酯衍生物的合成及其抗腫瘤活性研究[J]. 段華鑫,張殊佳,周鵬.  有機(jī)化學(xué). 2009(05)
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博士論文
[1]多巴胺受體激動劑在帕金森模型中的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制研究[D]. 李超.山東大學(xué) 2010

碩士論文
[1]NRAGE通過TrkA/MEK/ERK和AKT信號通路抑制NGF誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞分化[D]. 馮振華.南京師范大學(xué) 2007



本文編號：3510966