發(fā)布時間：2021-11-17 09:14

　　目的:小分子化合物N2E（N-（2-乙氧基苯基）-N’-羥基辛二酰胺）是SAHA的同源異羥肟酸衍生物,對HDAC的抑制作用較SAHA強。本實驗將應(yīng)用于治療肝纖維化的相關(guān)研究,評價N2E的治療肝纖維化作用效果,闡明其可能的作用機制,為今后的藥物研究打下一定的實驗和理論基礎(chǔ)。方法:1.N2E抗動物肝纖維化模型實驗:C57小鼠70只,隨機均分7組,即陰性對照組、肝纖維化模型組、N2E三個劑量治療組（10mg/kg、20 mg/kg、40mg/kg）、陽性藥物對照組SAHA（40mg/kg）以及陽性藥物對照組水飛薊賓（40mg/kg）。除陰性對照組外,其它組小鼠腹腔注射20%CCl₄,每周2次,持續(xù)6周,同時治療組隔天同體積灌胃給藥,直至6周實驗結(jié)束停止給藥。實驗結(jié)束后24h,收集血樣,檢測其血清ALT、AST的活力;收集肝臟標本,檢測肝組織的羥脯氨酸水平以及通過組織病理觀察、天狼星紅染色觀察肝纖維化的情況;通過免疫組化檢測肝纖維化進程。2.流式細胞儀檢測N2E對細胞周期和凋亡的影響;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測N2E誘導(dǎo)LX-2細胞凋亡的作用;再通過線粒... 

【文章來源】：廣東藥科大學廣東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

TGF-β1信號通路

圖 1-1 N2E 對肝損傷的保護作用(HE 染色×200)1.3.2 天狼星紅染色肝組織，觀察 N2E 對小鼠肝纖維化模型膠原纖維的作用天狼星紅苦味酸染色法通過膠原纖維聚集及蛋白排列異常纏繞螺旋的特點，在用于觀察肝纖維化發(fā)生與演變進程中起到重要作用。在光學顯微鏡下，可以根據(jù)顯示出膠原纖維(顯紅色)來判斷肝纖維化的程度。結(jié)果顯示，模型組(CCl4)纖維化嚴重的，N2E 組纖維化明顯減輕，見圖 1-2.A。Image J 軟件以及 GraphpadPrism6 對其天狼星紅染色后膠原纖維含量進行統(tǒng)計學處理，與正常組比較，N2E組的膠原纖維含量已經(jīng)接近正常水平，具有良好的抗纖維化作用，見圖 1-2.B。

18圖 1-2 N2E 抗肝臟纖維化作用(天狼星紅染色)（圖 A 為天狼星紅染色結(jié)果×200，B 為 N2E 對肝臟膠原纖維含量的影響，*p<0.01，***p<0.0001，vs.CCl4。)1.3.3 檢測血清 ALT、AST 活力，觀察 N2E 對小鼠肝纖維化模型的肝功能保護作用ALT 與 AST 是檢測肝功能的指標，以血清轉(zhuǎn)氨酶的含量作為檢測指標，肝臟功能以及肝損傷的情況能夠通過其簡單且直觀地提示，其中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是最常用的敏感指標，1%的肝細胞發(fā)生壞死時，血清 ALT 水平即可升高一倍。實驗結(jié)果如表 1，與空白組（25.1U/L）比較，模型組小鼠的模型組血清 ALT(262.2U/L)活力升高且具有顯著性差異（p＜0.001），與模型組相比，N2E 三個劑量組和陽性藥物對照組血清的 ALT 活力降低均具有顯著性差異(p＜0.001），而 N2E

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3500609