目的:小分子化合物N2E（N-（2-乙氧基苯基）-N’-羥基辛二酰胺）是SAHA的同源異羥肟酸衍生物,對(duì)HDAC的抑制作用較SAHA強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)將應(yīng)用于治療肝纖維化的相關(guān)研究,評(píng)價(jià)N2E的治療肝纖維化作用效果,闡明其可能的作用機(jī)制,為今后的藥物研究打下一定的實(shí)驗(yàn)和理論基礎(chǔ)。方法:1.N2E抗動(dòng)物肝纖維化模型實(shí)驗(yàn):C57小鼠70只,隨機(jī)均分7組,即陰性對(duì)照組、肝纖維化模型組、N2E三個(gè)劑量治療組（10mg/kg、20 mg/kg、40mg/kg）、陽(yáng)性藥物對(duì)照組SAHA（40mg/kg）以及陽(yáng)性藥物對(duì)照組水飛薊賓（40mg/kg）。除陰性對(duì)照組外,其它組小鼠腹腔注射20%CCl₄,每周2次,持續(xù)6周,同時(shí)治療組隔天同體積灌胃給藥,直至6周實(shí)驗(yàn)結(jié)束停止給藥。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24h,收集血樣,檢測(cè)其血清ALT、AST的活力;收集肝臟標(biāo)本,檢測(cè)肝組織的羥脯氨酸水平以及通過(guò)組織病理觀察、天狼星紅染色觀察肝纖維化的情況;通過(guò)免疫組化檢測(cè)肝纖維化進(jìn)程。2.流式細(xì)胞儀檢測(cè)N2E對(duì)細(xì)胞周期和凋亡的影響;Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)N2E誘導(dǎo)LX-2細(xì)胞凋亡的作用;再通過(guò)線粒... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：76 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

TGF-β1信號(hào)通路

圖 1-1 N2E 對(duì)肝損傷的保護(hù)作用(HE 染色×200)1.3.2 天狼星紅染色肝組織，觀察 N2E 對(duì)小鼠肝纖維化模型膠原纖維的作用天狼星紅苦味酸染色法通過(guò)膠原纖維聚集及蛋白排列異常纏繞螺旋的特點(diǎn)，在用于觀察肝纖維化發(fā)生與演變進(jìn)程中起到重要作用。在光學(xué)顯微鏡下，可以根據(jù)顯示出膠原纖維(顯紅色)來(lái)判斷肝纖維化的程度。結(jié)果顯示，模型組(CCl4)纖維化嚴(yán)重的，N2E 組纖維化明顯減輕，見(jiàn)圖 1-2.A。Image J 軟件以及 GraphpadPrism6 對(duì)其天狼星紅染色后膠原纖維含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，與正常組比較，N2E組的膠原纖維含量已經(jīng)接近正常水平，具有良好的抗纖維化作用，見(jiàn)圖 1-2.B。

18圖 1-2 N2E 抗肝臟纖維化作用(天狼星紅染色)（圖 A 為天狼星紅染色結(jié)果×200，B 為 N2E 對(duì)肝臟膠原纖維含量的影響，*p<0.01，***p<0.0001，vs.CCl4。)1.3.3 檢測(cè)血清 ALT、AST 活力，觀察 N2E 對(duì)小鼠肝纖維化模型的肝功能保護(hù)作用ALT 與 AST 是檢測(cè)肝功能的指標(biāo)，以血清轉(zhuǎn)氨酶的含量作為檢測(cè)指標(biāo)，肝臟功能以及肝損傷的情況能夠通過(guò)其簡(jiǎn)單且直觀地提示，其中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)是最常用的敏感指標(biāo)，1%的肝細(xì)胞發(fā)生壞死時(shí)，血清 ALT 水平即可升高一倍。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 1，與空白組（25.1U/L）比較，模型組小鼠的模型組血清 ALT(262.2U/L)活力升高且具有顯著性差異（p＜0.001），與模型組相比，N2E 三個(gè)劑量組和陽(yáng)性藥物對(duì)照組血清的 ALT 活力降低均具有顯著性差異(p＜0.001），而 N2E

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Histone Deacetylase 3 Inhibitor Suppresses Hepatitis C Virus Replication by Regulating Apo-A1 and LEAP-1 Expression[J]. Yuan Zhou,Qian Wang,Qi Yang,Jielin Tang,Chonghui Xu,Dongwei Gai,Xinwen Chen,Jizheng Chen.  Virologica Sinica. 2018(05)
[2]PDGF-BB對(duì)大鼠肝星狀細(xì)胞T6增殖及細(xì)胞外基質(zhì)的影響[J]. 曹媛,陳杰,夏延哲,許晨舒,陳孝.  今日藥學(xué). 2013(04)
[3]中國(guó)肝臟病學(xué)現(xiàn)狀及發(fā)展方向[J]. 賈繼東,魏來(lái),莊輝.  中國(guó)病毒病雜志. 2011(01)
[4]血小板衍生生長(zhǎng)因子及其受體在肝纖維化患者肝組織中的表達(dá)及意義[J]. 袁農(nóng),王萍,王憲智,王茁.  中華肝臟病雜志. 2002(01)



本文編號(hào)：3500609