研究背景與目的口腔癌是一種不斷增長的、嚴(yán)重威脅人類健康的全球惡性疾病。目前,臨床上口腔癌常規(guī)的治療方法主要有手術(shù)、放療、化療以及不同方法聯(lián)合治療。近年來,盡管在臨床診斷及治療方面都有了很大的進(jìn)展,但口腔癌患者的五年生存率仍處于較低水平。長春新堿（Vincristine,VCR）,一種微管蛋白聚合抑制劑,是口腔癌治療的基礎(chǔ)化療藥物之一。與大多數(shù)抗腫瘤藥物一樣,多藥耐藥是限制VCR在臨床應(yīng)用的主要因素。質(zhì)子泵抑制劑（Proton pump inhibitors,PPIs）,是通過降低胃壁細(xì)胞H+-K+-ATPase活性而抑制胃酸分泌的一類藥物,近年來其抗腫瘤活性受到研究者的廣泛關(guān)注,并且與化療藥物合用能夠增強(qiáng)治療效果,但其作用機(jī)制并不完全明確。PPIs安全性較好,本身具有抗腫瘤作用,在聯(lián)用中可減小化療藥物劑量,降低毒性,還有臨床實驗報道PPIs聯(lián)用鎮(zhèn)吐劑可減輕化療導(dǎo)致的胃腸道反應(yīng)。在本論文中,我們從細(xì)胞和動物兩個方面觀察研究了質(zhì)子泵抑制劑泮托拉唑（Pantoprazole,PPZ）與VCR合用對人口腔上皮癌KB/V耐藥細(xì)胞的增殖、凋亡、周期、侵襲轉(zhuǎn)移以及腫瘤組織生長的影響,并對其可能的作用... 

【文章來源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號說明
前言
    1. 腫瘤多藥耐藥性(MDR)
        1.1 P-gp與MDR
        1.2 細(xì)胞凋亡與MDR
        1.3 PI3K/Akt/mTOR信號通路與MDR
    2. 長春新堿在癌癥治療中的臨床應(yīng)用現(xiàn)狀
    3. 質(zhì)子泵抑制劑(PPIs)抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀
        3.1 PPIs簡介
        3.2 PPIs抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀
    4. 本課題的主要研究內(nèi)容
實驗材料
    1. 化合物
    2. 細(xì)胞株
    3. 實驗動物
    4. 試劑
    5. 試劑配制
    6. 儀器設(shè)備
實驗方法
    1. 細(xì)胞培養(yǎng)
    2. 細(xì)胞生長抑制試驗
    3. 克隆形成抑制試驗
    4. Hoechst 33342染色實驗
    5. Annexin V-FITC/PI雙染實驗
    6. 細(xì)胞周期檢測
    7. 劃痕實驗
    8. Transwell侵襲與遷移實驗
    9. 羅丹明123胞內(nèi)蓄積實驗
    10. 細(xì)胞外pH值檢測
    11. Western blotting實驗
    12. 裸鼠移植瘤生長抑制實驗
    13. 統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析
實驗結(jié)果
    1. PPZ對KB及KB/V細(xì)胞增殖的影響
    2. PPZ增強(qiáng)VCR對KB及KB/V細(xì)胞的細(xì)胞毒作用
        2.1 PPZ增強(qiáng)VCR對KB及KB/V細(xì)胞的體外生長抑制作用
        2.2. PPZ增強(qiáng)VCR對KB及KB/V細(xì)胞的克隆形成抑制作用
        2.3 PPZ與VCR合用對人正常細(xì)胞株的細(xì)胞毒作用
    3. PPZ增強(qiáng)VCR誘導(dǎo)KB/V細(xì)胞凋亡的作用
        3.1. Hoechst 33342染色法觀察細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化
        3.2. AnnexinV-FITC/PI雙染法定量檢測細(xì)胞凋亡率
        3.3. PPZ與VCR合用對細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)
    4. PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞周期分布的影響
        4.1. PPZ顯著增強(qiáng)了VCR誘導(dǎo)KB/V細(xì)胞發(fā)生G2/M期阻滯的作用
        4.2. PPZ與VCR合用對細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的調(diào)節(jié)
    5. PPZ與VCR合用抑制KB/V細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移
        5.1 劃痕實驗檢測PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞遷移的抑制作用
        5.2 Transwell實驗檢測PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞遷移、侵襲的抑制作用
        5.3 PPZ與VCR合用抑制KB/V細(xì)胞中MMP2和MMP9的表達(dá)
    6. PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞P-gp功能和表達(dá)的影響
        6.1. PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞內(nèi)P-gp外排功能的影響
        6.2. PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞中P-gp蛋白表達(dá)的影響
    7. PPZ對KB/V細(xì)胞無明顯抑酸作用
        7.1 PPZ對KB/V細(xì)胞胞外pH無明顯堿化作用
        7.2 PPZ對KB/V細(xì)胞中V-ATPase蛋白表達(dá)無明顯抑制作用
        7.3 V-ATPase抑制劑增強(qiáng)PPZ與VCR合用對KB/V細(xì)胞的協(xié)同生長抑制作用
    9. PPZ與VCR合用抑制KB/V細(xì)胞中的EGFR/MAPK和PI3K/Akt/ mTOR信號通路
        9.1 PPZ與VCR合用抑制KB/V細(xì)胞中的EGFR/MAPK信號通路
        9.2 PPZ與VCR合用抑制KB/V細(xì)胞中的PI3K/Akt/mTOR信號通路
    10. PPZ增強(qiáng)VCR對小鼠體內(nèi)KB/V細(xì)胞移植瘤的生長抑制作用
        10.1 PPZ增強(qiáng)VCR對KB/V細(xì)胞移植瘤的生長抑制作用
        10.2 PPZ和VCR合用對KB/V移植瘤凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)調(diào)節(jié)
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
學(xué)位論文評閱及答辯情況表



本文編號：3495086