目的研究利用生物相容性的磷脂-陽離子聚合物（LENP）混合型納米載體共同遞送吉西他濱（Gem）和髓細(xì)胞白血病基因1（MCL-1）小干擾RNA（siRNA）（siMCL-1）,制備治療胰腺癌的納米藥物L(fēng)ENPGem-siMCL-1。方法用復(fù)乳法合成LENP-Gem-siMCL-1核心,Gem包裹在親水性核心,表面正電荷通過靜電吸附siRNA;核心外面的磷脂層通過超聲薄膜法進行自組裝。納米粒度及Zeta電位分析儀測量納米顆粒的粒徑分布和表面電位;透射電鏡觀察納米顆粒的內(nèi)部結(jié)構(gòu);高效液相色譜測量納米載體對Gem的包封率;激光共聚焦顯微鏡觀察胰腺癌細(xì)胞PANC-1對LENP-羧基熒光素（FAM）-siMCL-1的攝取,Western印跡法檢測PANC-1細(xì)胞中MCL-1蛋白表達(dá)水平。以LENP-Gem-siMCL-1（Gem終濃度為32μmol·L-1）與胰腺癌PANC-1和BxPC-3細(xì)胞培養(yǎng)48 h,MTT法測定細(xì)胞存活率。結(jié)果制備的納米藥物L(fēng)ENP-GemsiMCL-1為結(jié)構(gòu)和大小分布均勻的球形粒子,具有典型的核殼結(jié)構(gòu),粒徑約200 nm,表面電位為-22.6 mV。Gem的包封率達(dá)到2... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2020,34(08)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞、試劑和儀器
    1.2 LENP-Gem-si RNA的制備
    1.3 納米粒度和Zeta電位分析儀測量納米顆粒的粒徑分布和表面電位
    1.4 透射電鏡觀察納米顆粒的內(nèi)部結(jié)構(gòu)
    1.5 高效液相色譜（HPLC）測定LENP對Gem的包封率
    1.6 共聚焦顯微鏡檢測LENP對si RNA的輸運作用
    1.7 Western印跡法檢測PANC-1細(xì)胞MCL-1蛋白表達(dá)
    1.8 MTT法測定PANC-1和Bx PC-3癌細(xì)胞存活率
    1.9 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 納米顆粒粒徑分布、Zeta電位、電鏡結(jié)構(gòu)和包封率的表征
    2.2 LENP對si RNA的輸運作用
    2.3 LENP-si MCL-1抑制胰腺癌細(xì)胞MCL-1蛋白表達(dá)
    2.4 LENP-Gem-si MCL-1明顯抑制胰腺癌細(xì)胞存活
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