如今,惡性腫瘤作為危害人類(lèi)健康的主要問(wèn)題之一,受到醫(yī)學(xué)界和科學(xué)界的廣泛關(guān)注。目前臨床上治療腫瘤的手段大致分為三類(lèi):化學(xué)治療、放射治療以及外科手術(shù)治療,其中的化學(xué)治療常常成為患者首選,如今應(yīng)用于臨床的化療藥物雖然種類(lèi)越來(lái)越多,但大多因耐藥性、選擇性差、毒副作用大、作用靶點(diǎn)多、個(gè)體差異等缺點(diǎn)而無(wú)法實(shí)現(xiàn)預(yù)期治療效果。面對(duì)這些問(wèn)題,許多新的治療方案應(yīng)運(yùn)而生。近年來(lái)發(fā)現(xiàn),核酸適體運(yùn)載小分子藥物能夠特異識(shí)別并結(jié)合腫瘤細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)的特殊標(biāo)志物,進(jìn)而響應(yīng)性遞釋藥物分子,具有制備便捷、生物相容性良好、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn),因此本論文以核酸適配體為核心,結(jié)合化學(xué)療法、光動(dòng)力療法與基因療法搭建了三個(gè)載藥控釋平臺(tái),具體方法與結(jié)果如下:（一）構(gòu)建ATP-p H雙響應(yīng)控釋體系1AW4cD-gc34@DNM并進(jìn)行體內(nèi)體外抗腫瘤活性研究利用ATP核酸適體1AW4cD和pH響應(yīng)基序gc34設(shè)計(jì)了一種兼具ATP-p H雙響應(yīng)的核酸序列,通過(guò)退火形成預(yù)期結(jié)構(gòu),利用其中的G-C堿基對(duì)來(lái)裝載抗腫瘤化療藥物DNM。研究結(jié)果表明,所設(shè)計(jì)的核酸載體可在核酸酶及血清環(huán)境下穩(wěn)定存在;可有效負(fù)載DNM;并且在模擬腫瘤環(huán)境和真實(shí)肝癌細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中... 

【文章來(lái)源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

腫瘤微環(huán)境pH分布

顆粒-aptamer-腺苷-SiO2介孔納米粒子”的ATP響應(yīng)型金顆粒封堵的介孔二氧化硅控釋體系。ATP出現(xiàn)后，能夠與aptamer強(qiáng)結(jié)合，使腺苷與aptamer的連接斷開(kāi)，金顆粒的封堵隨之被打開(kāi)，進(jìn)而釋放出包載的客體分子。SeungSooOh等人[21]利用一段ATP響應(yīng)的核酸片段設(shè)計(jì)了一種形狀可變的納米結(jié)構(gòu)用于結(jié)合誘導(dǎo)型的響應(yīng)釋放。顧臻等人[22,23]利用如圖1-2的作用機(jī)制，引入ATP響應(yīng)型核酸適體，利用適體中含有的G-C堿基對(duì)載入抗腫瘤藥阿霉素，再以脂質(zhì)體為載體遞運(yùn)這一裝載阿霉素的ATP適體至腫瘤細(xì)胞中，響應(yīng)性釋放阿霉素實(shí)現(xiàn)抗腫瘤效果。圖1-2ATP觸發(fā)Dox釋放系統(tǒng)原理圖Figure1-2TheschematicoftheATP-triggeredDoxreleasesystem（圖片來(lái)源：MoRan,JiangTianyue,DiSantoRocco,TaiWanyi,GuZhen.ATP-triggeredanticancerdrugdelivery.[J].Naturecommunications,2014,(5):3364.Figure1b）1.2.3腫瘤微環(huán)境內(nèi)的特異過(guò)表達(dá)標(biāo)志物腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及預(yù)后是一系列復(fù)雜的過(guò)程，腫瘤細(xì)胞與其微環(huán)境間的信息交流涉及很多因子及基因的調(diào)控作用，如圖1-3所示，例如，在細(xì)胞間質(zhì)與上皮進(jìn)行能量轉(zhuǎn)換過(guò)程，其基底膜被破壞，一些生長(zhǎng)因子和蛋白酶便會(huì)因此過(guò)多分泌，以激活間質(zhì)環(huán)境，如基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）能夠通過(guò)自分泌和旁分泌的方式降解細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的許多組分，促進(jìn)ECM特異性遷襲；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）可以幫助腫瘤血管生長(zhǎng)。原本處于動(dòng)態(tài)平衡中的ECM由于癌細(xì)胞的出現(xiàn)發(fā)生微環(huán)境混亂，為滿(mǎn)足生長(zhǎng)需要，腫瘤細(xì)胞為自身生長(zhǎng)需要使內(nèi)部的某些蛋白因子如VEGF等特異性高表達(dá)[24,25]，這會(huì)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞內(nèi)的DNA或信使RNA（mRNA）轉(zhuǎn)錄水平隨之升高，最終促進(jìn)腫瘤生成新生血管、

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文4激活基質(zhì)炎癥細(xì)胞和腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（TAF），TAF分泌更多的生長(zhǎng)因子和蛋白酶，影響蛋白酶及抑制劑的表達(dá)，在級(jí)聯(lián)中擴(kuò)增這些信號(hào)，從而促進(jìn)惡性腫瘤生長(zhǎng)的活化和基質(zhì)的重建[26]。圖1-3腫瘤細(xì)胞與其微環(huán)境的信息交流Figure1-3Informationexchangebetweentumorcellsandtheirmicroenvironment（圖片來(lái)源：宋柯,潘昊,韓嘉藝,陳立江.納米載藥系統(tǒng)靶向腫瘤微環(huán)境治療策略[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2018,49(04):392-400.圖1）在腫瘤血管的生成中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的作用不可忽視[27]。VEGF家族包括5個(gè)成員，即VEGF-A（即通常認(rèn)為的VEGF）、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D及胎盤(pán)生長(zhǎng)因子[28]。它們均為二聚體糖蛋白，二聚體三維空間結(jié)構(gòu)以二硫鍵維持，8個(gè)半胱氨酸殘基完全保守且相間排列，其結(jié)構(gòu)與類(lèi)血小板生長(zhǎng)因子蛋白區(qū)域極其類(lèi)似。作為公認(rèn)的最強(qiáng)血管促生長(zhǎng)因子之一，VEGF可利用旁分泌途徑結(jié)合血管內(nèi)皮細(xì)胞膜的VEGF受體（VEGFR），觸發(fā)級(jí)聯(lián)反應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，引起血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，使內(nèi)皮細(xì)胞快速增殖，促進(jìn)血管生成，淋巴管增生，同時(shí)增加血管的通透性[29]。在腦腫瘤、肺癌、肝癌、大腸癌和胃癌等多種癌組織中出現(xiàn)較高水平的表達(dá)[30,31]，因此將VEGF作為癌癥治療的新型靶標(biāo)，為腫瘤生物治療提供又一可行方案。目前已開(kāi)發(fā)出多種抑制VEGF生物學(xué)作用的方法，包括：利用抗體與VEGFR結(jié)合使VEGF信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路阻斷[30]；將可溶性VEGF、抗VEGF抗體、VEGF-Trap[32]與體內(nèi)的VEGF結(jié)合，使VEGF無(wú)法發(fā)揮作用；利用干擾技術(shù)沉默基因的表達(dá)以及反義寡核苷酸技術(shù)[33]等等。已有研究表明，VEGF的


本文編號(hào)：3488738