目的:研究制備可注射a FGF/磺化殼寡糖溫敏水凝膠并進行評價,建立其質量標準體系,并通過體外PC12神經細胞缺氧損傷模型及大鼠坐骨神經損傷模型研究其對神經損傷的修復作用,同時通過急性毒性試驗,生物相容性試驗進行了初步安全性評價,為可注射a FGF/磺化殼寡糖溫敏水凝膠的應用提供依據。方法:（1）以氯磺酸為磺化試劑進行殼寡糖的定點修飾;（2）采用泊洛沙姆為溫敏基質制備a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠。掃描電鏡觀察其內部圍觀結構;（3）雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定a FGF的含量,3T3細胞MTT法測定凝膠內a FGF活性;（4）利用連二硫酸鈉（Na2S2O4）對PC12細胞進行缺氧損傷,建立細胞損傷模型,研究a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠的神經保護作用;（5）建立坐骨神經損傷大鼠模型,測定機械縮足閾值和熱縮足潛伏期研究其對切斷的大鼠坐骨神經的修復作用;（6）通過小鼠急性毒性試驗、血液相容性試驗和小鼠皮下注射的組織相容性試驗進行a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠的初步安全性評價。結果:（1）得到磺化殼寡糖,以紅外光譜、元素分析、核磁共振等方法對磺化殼寡糖的結構進行分析驗證;（2）... 

【文章來源】：暨南大學廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語
第一章 前言
    1.1 周圍神經損傷修復的研究概況
    1.2 成纖維細胞生長因子的研究概況
    1.3 新型智能生物材料的研究現(xiàn)狀
    1.4 本研究的立題依據及研究內容
        1.4.1 立題依據
        1.4.2 研究內容及技術路線
第二章 殼寡糖的磺化修飾
    2.1 實驗儀器與材料
        2.1.1 實驗儀器
        2.1.2 實驗材料
    2.2 實驗方法
        2.2.1 磺化殼寡糖的制備
        2.2.2 磺化殼寡糖理化性質的檢測
    2.3 實驗結果
        2.3.1 磺化殼寡糖理化性質的檢測
    2.4 小結與討論
第三章 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的制備
    3.1 實驗儀器與材料
        3.1.1 實驗儀器
        3.1.2 實驗材料
    3.2 實驗部分
        3.2.1 aFGF磺化殼聚糖溫度敏感凝膠的制備
        3.2.2 不同比例的泊洛沙姆對水凝膠膠凝溫度的影響
        3.2.3 aFGF磺化殼聚糖溫敏凝膠評價
    3.3 實驗結果
        3.3.1 凝膠性狀的鑒別
        3.3.2 不同比例的泊洛沙姆對水凝膠膠凝溫度的影響
        3.3.3 溫敏凝膠掃描電鏡圖譜
        3.3.4 溫敏凝膠溶蝕度與aFGF在溫敏凝膠中的釋放行為的考察
    3.4 小結與討論
第四章 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的質量控制
    4.1 實驗儀器與材料
        4.1.1 實驗儀器
        4.1.2 實驗材料
    4.2 實驗方法
        4.2.1 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的制備
        4.2.2 aFGF的鑒別
        4.2.3 aFGF含量方法
        4.2.4 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑中aFGF活性的測定
        4.2.5 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑穩(wěn)定性實驗
    4.3 實驗結果
        4.3.1 aFGF的鑒別
        4.3.2 標準曲線的建立
        4.3.3 方法精密度的考察
        4.3.4 加樣回收率
        4.3.5 樣品中aFGF含量測定
        4.3.6 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑中aFGF活性的測定
        4.3.7 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑穩(wěn)定性實驗結果
    4.4 小結與討論
第五章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠對PC12細胞氧化損傷模型的保護作用研究
    5.1 實驗儀器與材料
        5.1.1 實驗儀器
        5.1.2 實驗材料
    5.2 實驗方法
        5.2.1 MTT法檢測Na_2S_2O_4對PC12細胞存活率的影響
        5.2.2 檢測不同濃度Na_2S_2O_4對PC12細胞中LDH釋放量的影響
        5.2.3 不同濃度的aFGF溶液對氧化損傷PC12細胞的LDH的釋放的影響
        5.2.4 不同濃度的磺化殼寡糖對PC12細胞存活率的影響
        5.2.5 不同濃度的磺化殼寡糖對氧化損傷PC12細胞的LDH的釋放的影響
        5.2.6 aFGF聯(lián)合不同濃度的磺化殼寡糖對氧化損傷PC12細胞的LDH的釋放的影響
    5.3 實驗結果
        5.3.1 MTT法檢測不同濃度Na_2S_2O_4對PC12細胞存活率的影響
        5.3.2 不同濃度的Na_2S_2O_4對PC12細胞LDH釋放量的影響
        5.3.3 不同濃度的aFGF對缺氧損傷PC12細胞LDH釋放量的影響
        5.3.4 單獨使用磺化殼寡糖對PC12細胞存活率的影響
        5.3.5 不同濃度的磺化殼寡糖對Na_2S_2O_4氧化損傷PC12細胞的LDH的釋放的影響
        5.3.6 aFGF聯(lián)合不同比例的磺化殼寡糖對氧化損傷PC12細胞的LDH的釋放的影響
    5.4 小結與討論
第六章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠對坐骨神經損傷大鼠模型的治療作用研究
    6.1 實驗儀器與實驗材料
        6.1.1 實驗儀器
        6.1.2 實驗動物
    6.2 實驗方法
        6.2.1 坐骨神經損傷修復實驗
    6.3 實驗結果
        6.3.1 aFGF溫敏凝膠劑對坐骨神經損傷的修復實驗
        6.3.2 坐骨神經愈合程度的觀察
    6.4 小結與討論
第七章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠初步安全性評價
    7.1 實驗儀器與材料
        7.1.1 實驗儀器
    7.2 實驗方法
        7.2.1 急性毒性試驗方法
        7.2.2 生物相容性試驗
        7.2.3 溶血率試驗
    7.3 實驗結果
        7.3.1 aFGF溫敏凝膠劑的急性毒性試驗
        7.3.2 生物相容性試驗
        7.3.3 溶血率試驗
    7.4 小結與討論
第八章 結論與展望
    8.1 全文總結
    8.2 展望
參考文獻
附錄
個人簡歷、參研項目及論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]多糖及多糖衍生物/泊洛沙姆溫敏水凝膠的制備及其性能研究[J]. 胡亦清,賴欣宜,羅嘉浩,龍茜,曾春蓮,傅超萍,馮子樂,曲海洪,章戴榮,康賢通,張黎明,楊立群.  中山大學學報(自然科學版). 2015(06)
[2]Repairing peripheral nerve injury using tissue engineering techniques[J]. Ernest W.Wang,Jun Zhang,Jason H.Huang.  Neural Regeneration Research. 2015(09)
[3]血管內皮生長因子聯(lián)合堿性成纖維細胞生長因子對大鼠后肢動脈硬化閉塞血管再生機制的研究[J]. 楊婷,王凱峰,孫瑤,劉彥輝,王瀚銳,范東旭,金松,竇鵬揮,劉彥東.  中國普外基礎與臨床雜志. 2015(08)
[4]自體神經外膜小間隙吻合修復周圍神經斷裂的臨床研究[J]. 羅飛.  中國現(xiàn)代藥物應用. 2015(16)
[5]新型殼聚糖基溫敏凝膠膜引導骨再生性能的體外實驗研究[J]. 梁杰,崔軍,許勝,周倜,徐偉成,徐欣.  上�？谇会t(yī)學. 2015(04)
[6]殼寡糖及其衍生物的抗氧化活性[J]. 鐘佳,劉進輝,肖定福,李文平.  動物醫(yī)學進展. 2015(07)
[7]合成可生物降解神經導管修復損傷周圍神經:生物相容性良好[J]. 張孫富,王斌.  中國組織工程研究. 2015(25)
[8]堿性成纖維細胞生長因子促進神經損傷修復的研究進展[J]. 張超,項麗娜,陳德培,呂鑫鑫,趙宜桐,王璐瑤,肖健,張宏宇.  中國生物工程雜志. 2015(06)
[9]組織工程材料在周圍神經損傷修復中應用的研究進展[J]. 陶學強,祁全.  中國矯形外科雜志. 2015(04)
[10]頦神經、頰神經及鼻腭神經損傷的原因及防治[J]. 鄧天閣,周宏志,胡開進,秦瑞峰.  中國實用口腔科雜志. 2014(09)

博士論文
[1]肝素化殼聚糖/大豆蛋白質復合材料的制備及其抗凝血功能研究[D]. 王小梅.武漢大學 2011

碩士論文
[1]CBD-bFGF對小鼠放射性肺損傷的作用及其機制研究[D]. 黃振.蘇州大學 2015
[2]腺病毒介導的BDNF基因對脊髓中BDNF基因表達的影響[D]. 郭爾斐.河北醫(yī)科大學 2009
[3]改構體aFGF對帕金森病大鼠神經元損傷的保護[D]. 肖春茍.暨南大學 2005
[4]生物酶降解殼聚糖及其應用研究[D]. 王奎蘭.廣東工業(yè)大學 2004



本文編號：3482206