目的:研究制備可注射a FGF/磺化殼寡糖溫敏水凝膠并進(jìn)行評(píng)價(jià),建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系,并通過體外PC12神經(jīng)細(xì)胞缺氧損傷模型及大鼠坐骨神經(jīng)損傷模型研究其對(duì)神經(jīng)損傷的修復(fù)作用,同時(shí)通過急性毒性試驗(yàn),生物相容性試驗(yàn)進(jìn)行了初步安全性評(píng)價(jià),為可注射a FGF/磺化殼寡糖溫敏水凝膠的應(yīng)用提供依據(jù)。方法:（1）以氯磺酸為磺化試劑進(jìn)行殼寡糖的定點(diǎn)修飾;（2）采用泊洛沙姆為溫敏基質(zhì)制備a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠。掃描電鏡觀察其內(nèi)部圍觀結(jié)構(gòu);（3）雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定a FGF的含量,3T3細(xì)胞MTT法測(cè)定凝膠內(nèi)a FGF活性;（4）利用連二硫酸鈉（Na2S2O4）對(duì)PC12細(xì)胞進(jìn)行缺氧損傷,建立細(xì)胞損傷模型,研究a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠的神經(jīng)保護(hù)作用;（5）建立坐骨神經(jīng)損傷大鼠模型,測(cè)定機(jī)械縮足閾值和熱縮足潛伏期研究其對(duì)切斷的大鼠坐骨神經(jīng)的修復(fù)作用;（6）通過小鼠急性毒性試驗(yàn)、血液相容性試驗(yàn)和小鼠皮下注射的組織相容性試驗(yàn)進(jìn)行a FGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠的初步安全性評(píng)價(jià)。結(jié)果:（1）得到磺化殼寡糖,以紅外光譜、元素分析、核磁共振等方法對(duì)磺化殼寡糖的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析驗(yàn)證;（2）... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語
第一章 前言
    1.1 周圍神經(jīng)損傷修復(fù)的研究概況
    1.2 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子的研究概況
    1.3 新型智能生物材料的研究現(xiàn)狀
    1.4 本研究的立題依據(jù)及研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 立題依據(jù)
        1.4.2 研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線
第二章 殼寡糖的磺化修飾
    2.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 磺化殼寡糖的制備
        2.2.2 磺化殼寡糖理化性質(zhì)的檢測(cè)
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 磺化殼寡糖理化性質(zhì)的檢測(cè)
    2.4 小結(jié)與討論
第三章 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的制備
    3.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 aFGF磺化殼聚糖溫度敏感凝膠的制備
        3.2.2 不同比例的泊洛沙姆對(duì)水凝膠膠凝溫度的影響
        3.2.3 aFGF磺化殼聚糖溫敏凝膠評(píng)價(jià)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 凝膠性狀的鑒別
        3.3.2 不同比例的泊洛沙姆對(duì)水凝膠膠凝溫度的影響
        3.3.3 溫敏凝膠掃描電鏡圖譜
        3.3.4 溫敏凝膠溶蝕度與aFGF在溫敏凝膠中的釋放行為的考察
    3.4 小結(jié)與討論
第四章 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的質(zhì)量控制
    4.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 aFGF磺化殼寡糖溫敏凝膠的制備
        4.2.2 aFGF的鑒別
        4.2.3 aFGF含量方法
        4.2.4 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑中aFGF活性的測(cè)定
        4.2.5 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 aFGF的鑒別
        4.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立
        4.3.3 方法精密度的考察
        4.3.4 加樣回收率
        4.3.5 樣品中aFGF含量測(cè)定
        4.3.6 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑中aFGF活性的測(cè)定
        4.3.7 aFGF/磺化殼寡糖溫敏型凝膠劑穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.4 小結(jié)與討論
第五章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠對(duì)PC12細(xì)胞氧化損傷模型的保護(hù)作用研究
    5.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        5.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 MTT法檢測(cè)Na_2S_2O_4對(duì)PC12細(xì)胞存活率的影響
        5.2.2 檢測(cè)不同濃度Na_2S_2O_4對(duì)PC12細(xì)胞中LDH釋放量的影響
        5.2.3 不同濃度的aFGF溶液對(duì)氧化損傷PC12細(xì)胞的LDH的釋放的影響
        5.2.4 不同濃度的磺化殼寡糖對(duì)PC12細(xì)胞存活率的影響
        5.2.5 不同濃度的磺化殼寡糖對(duì)氧化損傷PC12細(xì)胞的LDH的釋放的影響
        5.2.6 aFGF聯(lián)合不同濃度的磺化殼寡糖對(duì)氧化損傷PC12細(xì)胞的LDH的釋放的影響
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 MTT法檢測(cè)不同濃度Na_2S_2O_4對(duì)PC12細(xì)胞存活率的影響
        5.3.2 不同濃度的Na_2S_2O_4對(duì)PC12細(xì)胞LDH釋放量的影響
        5.3.3 不同濃度的aFGF對(duì)缺氧損傷PC12細(xì)胞LDH釋放量的影響
        5.3.4 單獨(dú)使用磺化殼寡糖對(duì)PC12細(xì)胞存活率的影響
        5.3.5 不同濃度的磺化殼寡糖對(duì)Na_2S_2O_4氧化損傷PC12細(xì)胞的LDH的釋放的影響
        5.3.6 aFGF聯(lián)合不同比例的磺化殼寡糖對(duì)氧化損傷PC12細(xì)胞的LDH的釋放的影響
    5.4 小結(jié)與討論
第六章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠對(duì)坐骨神經(jīng)損傷大鼠模型的治療作用研究
    6.1 實(shí)驗(yàn)儀器與實(shí)驗(yàn)材料
        6.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        6.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    6.2 實(shí)驗(yàn)方法
        6.2.1 坐骨神經(jīng)損傷修復(fù)實(shí)驗(yàn)
    6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        6.3.1 aFGF溫敏凝膠劑對(duì)坐骨神經(jīng)損傷的修復(fù)實(shí)驗(yàn)
        6.3.2 坐骨神經(jīng)愈合程度的觀察
    6.4 小結(jié)與討論
第七章 aFGF磺化殼寡糖溫敏水凝膠初步安全性評(píng)價(jià)
    7.1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料
        7.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
    7.2 實(shí)驗(yàn)方法
        7.2.1 急性毒性試驗(yàn)方法
        7.2.2 生物相容性試驗(yàn)
        7.2.3 溶血率試驗(yàn)
    7.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        7.3.1 aFGF溫敏凝膠劑的急性毒性試驗(yàn)
        7.3.2 生物相容性試驗(yàn)
        7.3.3 溶血率試驗(yàn)
    7.4 小結(jié)與討論
第八章 結(jié)論與展望
    8.1 全文總結(jié)
    8.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷、參研項(xiàng)目及論文發(fā)表情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]多糖及多糖衍生物/泊洛沙姆溫敏水凝膠的制備及其性能研究[J]. 胡亦清,賴欣宜,羅嘉浩,龍茜,曾春蓮,傅超萍,馮子樂,曲海洪,章戴榮,康賢通,張黎明,楊立群.  中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2015(06)
[2]Repairing peripheral nerve injury using tissue engineering techniques[J]. Ernest W.Wang,Jun Zhang,Jason H.Huang.  Neural Regeneration Research. 2015(09)
[3]血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子聯(lián)合堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)大鼠后肢動(dòng)脈硬化閉塞血管再生機(jī)制的研究[J]. 楊婷,王凱峰,孫瑤,劉彥輝,王瀚銳,范東旭,金松,竇鵬揮,劉彥東.  中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2015(08)
[4]自體神經(jīng)外膜小間隙吻合修復(fù)周圍神經(jīng)斷裂的臨床研究[J]. 羅飛.  中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用. 2015(16)
[5]新型殼聚糖基溫敏凝膠膜引導(dǎo)骨再生性能的體外實(shí)驗(yàn)研究[J]. 梁杰,崔軍,許勝,周倜,徐偉成,徐欣.  上�？谇会t(yī)學(xué). 2015(04)
[6]殼寡糖及其衍生物的抗氧化活性[J]. 鐘佳,劉進(jìn)輝,肖定福,李文平.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(07)
[7]合成可生物降解神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)損傷周圍神經(jīng):生物相容性良好[J]. 張孫富,王斌.  中國組織工程研究. 2015(25)
[8]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)神經(jīng)損傷修復(fù)的研究進(jìn)展[J]. 張超,項(xiàng)麗娜,陳德培,呂鑫鑫,趙宜桐,王璐瑤,肖健,張宏宇.  中國生物工程雜志. 2015(06)
[9]組織工程材料在周圍神經(jīng)損傷修復(fù)中應(yīng)用的研究進(jìn)展[J]. 陶學(xué)強(qiáng),祁全.  中國矯形外科雜志. 2015(04)
[10]頦神經(jīng)、頰神經(jīng)及鼻腭神經(jīng)損傷的原因及防治[J]. 鄧天閣,周宏志,胡開進(jìn),秦瑞峰.  中國實(shí)用口腔科雜志. 2014(09)

博士論文
[1]肝素化殼聚糖/大豆蛋白質(zhì)復(fù)合材料的制備及其抗凝血功能研究[D]. 王小梅.武漢大學(xué) 2011

碩士論文
[1]CBD-bFGF對(duì)小鼠放射性肺損傷的作用及其機(jī)制研究[D]. 黃振.蘇州大學(xué) 2015
[2]腺病毒介導(dǎo)的BDNF基因?qū)顾柚蠦DNF基因表達(dá)的影響[D]. 郭爾斐.河北醫(yī)科大學(xué) 2009
[3]改構(gòu)體aFGF對(duì)帕金森病大鼠神經(jīng)元損傷的保護(hù)[D]. 肖春茍.暨南大學(xué) 2005
[4]生物酶降解殼聚糖及其應(yīng)用研究[D]. 王奎蘭.廣東工業(yè)大學(xué) 2004



本文編號(hào)：3482206