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鹽酸右美托咪定對(duì)脂多糖誘導(dǎo)Kupffer細(xì)胞核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3炎癥小體通路的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-30 05:36
  目的探討鹽酸右美托咪定對(duì)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)Kupffer細(xì)胞(KCs)核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3(NLRP3)炎癥小體通路的影響。方法用500 ng·mL-1 LPS處理KCs 24 h,構(gòu)建炎性因子釋放模型細(xì)胞。將模型細(xì)胞隨機(jī)分為模型組和低、中、高劑量實(shí)驗(yàn)組,另取正常KCs作為空白組�?瞻捉M和模型組均不給予藥物處理,正常培養(yǎng)7 h;低、中、高劑量實(shí)驗(yàn)組分別給予50,200和500 ng·mL-1鹽酸右美托咪定處理1 h,繼續(xù)孵育6 h。用噻唑藍(lán)法檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率,用Western Blotting法檢測(cè)各組細(xì)胞炎癥小體相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果干預(yù)后,低、高劑量實(shí)驗(yàn)組和模型組、空白組的細(xì)胞存活率分別為(60.11±4.69)%,(85.02±5.04)%,(51.24±4.22)%和(100.00±5.24)%,NLRP3蛋白相對(duì)表達(dá)水平分別為2.49±0.28,1.21±0.21,3.37±0.30和1.02±0.22,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1相對(duì)表達(dá)水平分別為2.68±0.26,1.17±0.22,3.54±0.34和1.... 

【文章來源】:中國臨床藥理學(xué)雜志. 2020,36(22)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材料
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 模型構(gòu)建[4]
        2.3 細(xì)胞分組與給藥方法
        2.4 主要觀察指標(biāo)
            2.4.1 用噻唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)各組細(xì)胞的存活率[5]
            2.4.2 用Western Blotting法檢測(cè)各組細(xì)胞炎癥小體相關(guān)蛋白的表達(dá)水平[4]
        2.5 亞組觀察指標(biāo)
            2.5.1 用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)各組細(xì)胞上清液中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、IL-6和IL-1β水平[6]
            2.5.2 用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)炎癥小體相關(guān)分子mRNA的表達(dá)水平
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 5組細(xì)胞存活率的比較
    2 5組細(xì)胞炎癥小體相關(guān)蛋白表達(dá)水平的比較
    3 5組細(xì)胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β釋放量的比較
    4 5組細(xì)胞中炎癥小體相關(guān)分子mRNA表達(dá)水平的影響
討 論



本文編號(hào):3466157

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